UniVessel® - Sartorius AG
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2.3 Puesto de trabajo 2.3.1 Colocación en el puesto de trabajo y Puede colocar los recipientes de cultivo en cualquier superficie de trabajo, p. ej. en mesas de laboratorio que – Tengan una superficie de apoyo suficientemente grande para todo el biorreactor y puedan soportar su peso – Permitan un cómodo acceso a todas las piezas del biorreactor que haya que manipular – Cumplan todos los requisitos que exige el proceso, p. ej. relativas a la seguridad biológica y sean resistentes a la acción de los medios utilizados, p. ej. ácidos y lejías – Se limpien fácilmente y, dado el caso, puedan desinfectarse y descontaminarse y Los requerimientos de espacio dependen del biorreactor, de la cantidad y tamaño de los recipientes de cultivo así como de los dispositivos periféricos que se vayan a conectar. Los dibujos de los recipientes de cultivo y las indicaciones de instalación del biorreactor contienen información relativa a las dimensiones. 2.3.2 Herramientas Para las tareas descritas a continuación relativas a los montajes de UniVessel ® se necesitan los correspondientes kits de herramientas. Para ejecutar correctamente todas las tareas descritas en este manual es necesario que utilice exclusivamente los kits de herramientas incluidos en las siguientes tablas. Modelo de UniVessel ® UniVessel ® 0,5 l UniVessel ® 1 l UniVessel ® 2 l UniVessel ® 5 l UniVessel ® 10 l Número de kit de herramientas BB-38247089 BB-38247097 BB-38247100 BB-38247119 BB-38247127 2.3.3 Esterilización en autoclave Peligro de rotura por sobrepresión: no debe cerrar (pinzar) el conducto de aire de escape durante la esterilización. El recipiente de cultivo se ventila durante la esterilización a través del filtro de aire de escape. Durante y después de la esterilización tiene lugar aquí la compensación estéril de presión. Transporte y coloque el recipiente de cultivo en el autoclave de forma que los conductos conectados y los componentes no puedan soltarse. No utilice auto - claves de vacío. El vacío puede provocar la aparición de espuma en el medio cultivado. La espuma que penetre en el filtro de aire de entrada o en el de escape puede bloquearlos y hacerlos inservibles. La esterilización por autoclave del recipiente de cultivo y las piezas conectadas debe llevarse a cabo a 121 °C. Evite temperaturas de esterilización superiores. Puede provocar daños en las piezas montadas, p. ej. en los sensores. 20 Colocación, equipamiento y puesta en funcionamiento
1. Para conseguir una esterilización segura (destrucción de las esporas termófilas), el interior del recipiente de cultivo debe mantenerse un mínimo de 20 minutos a temperatura de esterilización. Como valor orientativo puede tomarse una duración de esterilización aproximada de 40 minutos en un recipiente de cultivo de 2 l, 60 minutos en uno de 5l, etcétera. 2. Las condiciones para una esterilización segura, p. ej. la duración de la permanencia en el autoclave, deberá determinarlas de forma empírica. Observe la documenta - ción del autoclave. Para ello puede efectuar comprobaciones previas utilizando esporas de prueba de procedencia comercial (p. ej. Bacillus steathermophilus) y esterilizar el recipiente de cultivo por autoclave con las esporas en su interior. Antes de utilizar el autoclave 1. Compruebe todos los orificios de la tapa y los componentes montados. Cierre todos los orificios de la tapa. Los adaptadores y racores deben estar bien apretados con la mano. 2. Coloque las botellas de medios correctores en los soportes del recipiente de cultivo. Fije las piezas móviles (cables, mangueras, etc.) para que no se suelten durante el transporte. Para fijar las mangueras a las entradas del recipiente de cultivo es recomendable asegurarlas por medio de bridas de cables. 3. Desenganche la manguera de aire de entrada y todas las mangueras de componentes que se sumerjan en el medio. Durante la esterilización no debe presionarse ningún medio en el interior de las mangueras. 4. El motor del agitador no es apto para el autoclave. Si está montado sobre el recipiente de cultivo, suelte el tornillo de sujeción y retire el motor del adaptador del agitador. 5. Tire de los cables de unión de los tensores al máximo posible. – Envuelva los conectores de los sensores y el cable del Pt-100 con papel de aluminio para protegerlos de la acción directa del vapor durante la esteriliza - ción. – Algunos sensores se suministran con caperuzas de protección especiales que pueden colocarse al utilizar el autoclave. Para las sondas antiespuma y de nivel no es necesaria ninguna protección. 6. Transporte el recipiente de cultivo con todo el equipamiento conectado al auto - clave. Lleve a cabo la esterilización necesaria para destruir todos los gérmenes que puedan interferir. Preste atención a que durante el transporte al autoclave, el retorno al puesto de trabajo y la colocación en el mismo no se suelten los conductos de conexión ni los componentes montados en el recipiente de cultivo. Después de utilizar el autoclave Peligro de quemaduras por los componentes calentados en el autoclave. Deje que el aparato y los componentes conectados se refrigeren en el autoclave. Utilice guantes protectores durante la manipulación y el transporte. 1. Compruebe las uniones atornilladas de la tapa. La dilatación por calor al calentar y enfriar puede aflojarlas. Reapriete de nuevo fuertemente con la mano. 2. Transporte el recipiente cuidadosamente al puesto de trabajo. Colóquelo en la base del biorreactor de forma que todos los aparatos periféricos necesarios puedan conectarse con facilidad. Colocación, equipamiento y puesta en funcionamiento 21
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1. Para conseguir una esterilización segura (destrucción de las esporas termófilas),<br />
el interior del recipiente de cultivo debe mantenerse un mínimo de 20 minutos<br />
a temperatura de esterilización. Como valor orientativo puede tomarse una<br />
duración de esterilización aproximada de 40 minutos en un recipiente de cultivo<br />
de 2 l, 60 minutos en uno de 5l, etcétera.<br />
2. Las condiciones para una esterilización segura, p. ej. la duración de la permanencia<br />
en el autoclave, deberá determinarlas de forma empírica. Observe la documenta -<br />
ción del autoclave. Para ello puede efectuar comprobaciones previas utilizando<br />
esporas de prueba de procedencia comercial (p. ej. Bacillus steathermophilus) y<br />
esterilizar el recipiente de cultivo por autoclave con las esporas en su interior.<br />
Antes de utilizar el autoclave<br />
1. Compruebe todos los orificios de la tapa y los componentes montados.<br />
Cierre todos los orificios de la tapa. Los adaptadores y racores deben estar bien<br />
apretados con la mano.<br />
2. Coloque las botellas de medios correctores en los soportes del recipiente de<br />
cultivo. Fije las piezas móviles (cables, mangueras, etc.) para que no se suelten<br />
durante el transporte. Para fijar las mangueras a las entradas del recipiente de<br />
cultivo es recomendable asegurarlas por medio de bridas de cables.<br />
3. Desenganche la manguera de aire de entrada y todas las mangueras de<br />
componentes que se sumerjan en el medio. Durante la esterilización no debe<br />
presionarse ningún medio en el interior de las mangueras.<br />
4. El motor del agitador no es apto para el autoclave. Si está montado sobre el<br />
recipiente de cultivo, suelte el tornillo de sujeción y retire el motor del adaptador<br />
del agitador.<br />
5. Tire de los cables de unión de los tensores al máximo posible.<br />
– Envuelva los conectores de los sensores y el cable del Pt-100 con papel de<br />
aluminio para protegerlos de la acción directa del vapor durante la esteriliza -<br />
ción.<br />
– Algunos sensores se suministran con caperuzas de protección especiales que<br />
pueden colocarse al utilizar el autoclave. Para las sondas antiespuma y de nivel<br />
no es necesaria ninguna protección.<br />
6. Transporte el recipiente de cultivo con todo el equipamiento conectado al auto -<br />
clave. Lleve a cabo la esterilización necesaria para destruir todos los gérmenes que<br />
puedan interferir.<br />
Preste atención a que durante el transporte al autoclave, el retorno al puesto de<br />
trabajo y la colocación en el mismo no se suelten los conductos de conexión ni los<br />
componentes montados en el recipiente de cultivo.<br />
Después de utilizar el autoclave<br />
Peligro de quemaduras por los componentes calentados en el autoclave.<br />
Deje que el aparato y los componentes conectados se refrigeren en el autoclave.<br />
Utilice guantes protectores durante la manipulación y el transporte.<br />
1. Compruebe las uniones atornilladas de la tapa. La dilatación por calor al calentar<br />
y enfriar puede aflojarlas. Reapriete de nuevo fuertemente con la mano.<br />
2. Transporte el recipiente cuidadosamente al puesto de trabajo. Colóquelo en la<br />
base del biorreactor de forma que todos los aparatos periféricos necesarios<br />
puedan conectarse con facilidad.<br />
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