UniVessel® - Sartorius AG

7.4 Preparación de los recipientes
de cultivo para el proceso
y Este apartado pretende dar una visión general sobre los pasos a dar. La docu -
mentación del biorreactor contiene indicaciones detalladas sobre la puesta en
funcionamiento del biorreactor.
7.4.1 llenado de la pared doble
en recipientes de doble pared
Peligro de rotura
En caso de disposición incorrecta (adaptador de manguera con conector de
encaje en el puerto inferior del recipiente, adaptador con acople de man guera
arriba) y conexión de la entrada en el puerto superior, la pared doble puede
quedar sometida a presión y explotar.
No aplicable para recipientes de pared simple, p. ej. BIOSTAT ® Aplus.
y Para conseguir una transferencia óptima de calor, la pared doble debe estar
totalmente llena de medio de atemperación. Compruebe el nivel de llenado antes
de cada esterilización o, en su caso, antes de iniciar el proceso y rellene si existe
déficit de medio.
1. Conecte el recipiente de cultivo al sistema de atemperación (al aparato base):
– La entrada al recipiente de cultivo es la conexión inferior de la pared doble
– El retorno es la conexión superior de la pared doble
2. Active la función “Fill Thermostat” t “Indicaciones de manejo del sistema micro-
DCU” o accione la tecla en el módulo de atemperación t “BIOSTAT ® Qplus o, en su
caso, BIOSTAT ® B-DCU”. Puede observar el proceso de llenado en la pared doble.
Después del llenado puede retirar las mangueras y seguir preparando el recipiente
de cultivo.
y El acople rápido de la conexión inferior cierra la entrada a la pared doble si no está
conectada la unión al sistema de atemperación.
La salida superior (conector del acople rápido) está abierta. No debe cerrar
(pinzar) la manguera.
7.4.2 Llenado de los recipientes
de cultivo
1. Llene con medio de cultivo a través de uno de los orificios de la tapa. Recuerde:
y Durante la esterilización se evapora una parte del medio de cultivo. Las pérdidas
por evaporación son de aprox. 100 ml por cada 30 min. de tiempo de esterilización.
Los valores precisos solo pueden determinarse de forma empírica. Puede llenar
más cantidad de medio o compensar las pérdidas durante la esterilización
añadiendo medio estéril después de esterilizar.
2. Si el medio de cultivo no es resistente al autoclave (el calor puede desnaturalizar
las proteínas o vitaminas existentes, los azúcares pueden caramelizar), llene con
un poco de agua (aprox. 200 … 300 ml), como mínimo la cantidad que se
evaporará durante la esterilización.
Evite esterilizar los recipientes de cultivo vacíos, el resultado no es una
esterilización segura.
100 Anexo