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Roche Diagnostics informa / Junio 2001 700 20 800 100 NRBCSY 600 500 400 300 200 100 0 ERYTROSYS 18 16 14 12 10 8 6 4 2 0 NRBCSY 700 600 500 400 300 200 100 0 NRBCMYC-NRBCSY 80 60 40 20 0 -20 -40 +1,96 SD 29,0 Media 2,5 -1,96 SD -24,0 0 100 200 300 400 500 600 700 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 0 100 200 300 400 500 600 700 800 0 100 200 300 400 500 600 700 800 NRBCCD ERYTROCD NRBMYC Valor medio de NRBMYC y NRBCSY Figura 1. Regresión de Passing & Bablok para el total de muestras analizadas; siendo NRBCSY el recuento de eritroblastos/100 leucocitos analizado por el Sysmex XE2100 y NRBCCD el mismo parámetro analizado por el Cell-Dyn 4000. Figura 2. Regresión de Passing & Bablok para el valor absoluto de eritroblastos x 10 3 µL para todas las muestras analizadas, siendo ERYTROSYS el valor obtenido en el Sysmex XE2100 y ERYTROCD el mismo parámetro obtenido en analizador de referencia. Figura 5. Regresión de Passing & Bablok para el total de muestras analizadas; siendo NRBCSY el recuento de eritroblastos/100 leucocitos analizado por el Sysmex XE2100 y NRBCMYC el mismo parámetro obtenido al microscopio óptico. Figura 6. Representación de Altman para todas las muestras analizadas; en donde NRBCSY es el recuento de eritroblastos/100 leucocitos y NRBCMYC el valor hallado en la observación al microscopio óptico. Tabla 1 NRBCCD-NRBCSY 20 10 0 -10 -20 -30 -40 -50 -60 -70 -80 +1,96 SD 17,8 Media -1,6 -1,96 SD -20,9 0 100 200 300 400 500 600 700 Valor medio de NRBCCD y NRBCSY Figura 3. Representación de Altman para todas las muestras analizadas; siendo NRBCSY el recuento de eritroblastos/100 leucocitos analizado por el Sysmex XE2100 y NRBCCD el mismo parámetro analizado por el Cell-Dyn 4000. la siguiente ecuación: XE2100 = a + b Cell-Dyn. En las figuras 1 y 2 aparecen las gráficas de regresión de Passing- Bablok, mientras que en las figuras 3 y 4 aparecen las representaciones de Altman (2). Debido a que la linealidad del recuento de NRBC en el cell-Dyn 4000 es hasta 275 NRBC/100 WBC (3) y que D’Onofrio (4) sólo comprobó la linealidad para el XE2100 hasta 81,9 NRBC/100 WBC (no disponía de muestras de mayor concentración), realizamos también los cálculos poniendo las acotaciones de NRBC/100 WBC < 81,9; NRBC/100 WBC < 200 y NRBC/100 WBC < 275, ERYTROCD-ERYTROSYS 1,6 1,4 1,2 1,0 0,8 0,6 0,4 0,2 -0,0 -0,2 -0,4 -0,6 +1,96 SD 0,54 Media 0,07 -1,96 SD -0,39 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 Valor medio de ERYTROCD y ERYTROSYS Figura 4. Representación de Altman para todas las muestras analizadas; en donde ERYTROSYS es el valor absoluto de eritroblastos x 10 3 µL en el Sysmex XE2100 y ERYTROCD el mismo parámetro en el otro analizador. obteniéndose los resultados que aparecen en la tabla 1. En relación a la comparación con la observación al microscopio óptico (MO), la fórmula empleada fue: XE2100 = c + d MO. La recta de regresión de Passing-Bablok y la representación de Altman aparecen en las figuras 5 y 6, respectivamente. Los resultados se recogen en la tabla 2. En cuanto a la sensibilidad (S), especificidad (E), valor predictivo positivo (VPP) y valor predictivo negativo (VPN) para la magnitud NRBC del XE 2100 se obtuvo: S = 92,86%; E = 69,44; VPP = 85,53% y VPN = 83,33%. Tabla 2 Magnitud a (IC 95%) b (IC 95%) r 2 n NRBC/100 WBC 0,00 (0,00-0,00) 0,98 (0,86-1,06) 0,997 106 NRBC/10 3 µL 0,00 (0,00-0,00) 0,86 (0,76-0,95) 0,994 106 NRBC/100 WBC < 81,9 0,00 (0,00-0,00) 0,89 (0,75-0,99) 0,946 101 NRBC/100 WBC < 200 0,00 (0,00-0,00) 0,91 (0,80-1,02) 0,976 103 NRBC/100 WBC < 275 0,00 (0,00-0,00) 0,96 (0,85-1,05) 0,990 105 WBC 0,18 (-0,86-1,81) 0,89 (0,74-0,98) 0,955 106 Magnitud c (IC 95%) d (IC 95%) r 2 n NRBC/100 WBC 0,00 (0,00-0,00) 0,90 (0,80-1,00) 0,993 107 NRBC/100 WBC < 81,9 0,00 (0,00-0,00) 0,95 (0,74-1,10) 0,936 102 NRBC/100 WBC < 200 0,00 (0,00-0,00) 0,98 (0,80-1,05) 0,987 104 Discusión El número de eritroblastos circulante muestra un descenso progresivo a medida que aumenta la edad gestacional. Los niños sanos nacidos a término muestran una media de aproximadamente 7 NRBC/100WBC (5), mientras que los niños nacidos prematura-mente muestran recuentos moderadamente aumentados de NRBC, encontrándose los valores más altos en los niños "pequeños" para su edad gestacional (6). Otras causas de NRBC normalmente altos incluyen determinadas patologías del recién nacido como daño neurológico, niños de madre diabética, hipoxia intrauterina, etc. (7-9), encontrándose los recuentos de NRBC más elevados en los neonatos con enfermedad hemolítica del recién nacido. En nuestro estudio obtuvimos valores de NRBC/100WBC en 12 muestras de sangre periférica; las características de los niños se recogen en la tabla 3. En cuanto a la valoración del Sysmex XE2100, se obtuvo una excelente correlación en los recuentos de NRBC/100WBC, tanto para todas las muestras analizadas como para las acotaciones referidas, por lo que concluimos que el límite de linealidad que informa D'Onofrio debe ser mayor, basándonos en nuestra experiencia y en el estudio realizado por Walters (10) quien informa un límite superior de 40.000 NRBC/mL. Los valores 22 Valoración del analizador hematológico XE 2100 en la determinación de eritroblastos en sangre periférica 23
Roche Diagnostics informa / Junio 2001 Tabla 3 Paciente* Peso al Edad gestacional Edad Diagnóstico NRBC/100WBC nacer (g) (semanas) (días) (MO)** S.M. 900 30 5 EMH; Inestabilidad hemodinámica; 782 Hemorragia intraventricular II C.M. 1000 33+6 0 Hemorragia intraventricular II; Plétora 340 S.M. 900 30 6 EMH; Inestabilidad hemodinámica; 287 Hemorragia intraventricular II C.M. 1000 33+6 1 Hemorragia intraventricular II; Plétora 196 A.M. 1080 31 1 Crecimiento intrauterino Retardado; Riesgo de infección; Plétora; Ictericia; Inestabilidad hemodinámica 174 S.M. 900 30 9 EMH; Inestabilidad hemodinámica; 86 Hemorragia intraventricular II C.M. 1600 27 0 Distress respiratorio; EMH; 21 Inestabilidad hemodinámica M.E. 850 27 1 EMH; Hipocalcemia; Ictericia 12 M.E. 850 27 4 EMH; Hipocalcemia; Ictericia 9 M.V. 1200 31 22 EMH; Hemorragia intraventricular II 8,5 Traumatismo obstétrico C.M. 1600 27 4 Distress respiratorio; EMH; 8,5 Inestabilidad hemodinamica S.M. 900 30 21 EMH; Inestabilidad hemodinámica; 7,5 Hemorragia intraventricular II *Iniciales de los nombres de los pacientes **Microscopía óptica MODULAR ANALYTICS < E > Inmunoanálisis Heterogéneos De absoluta confianza son totalmente transferibles entre los dos aparatos. Asimismo se obtuvieron unos excelentes resultados en la comparación con el microscopio óptico. Los resultados también fueron buenos para las medias de concentración de eritroblastos y leucocitos. Por tanto podemos concluir que el analizador hematológico Sysmex XE2100 facilita en gran medida el trabajo en el laboratorio clínico a la hora de evaluar eritroblastos en sangre periférica por su sensibilidad y especificidad elevadas y por proporcionar de modo independiente el recuento de eritroblastos y el de los leucocitos, evitando las correcciones manuales. Referencias 1) Passing H, Bablok W. A new biochemical procedure for testing the equality of measurements from two different analytical methods, Application of linear regression procedures for method comparison studies in Clinical Chemistry. J Clin Chem Clin Biochem 1983; 21:709. 2) Bland JM, Altman DG. Statistical methods for assessing agreement between two methods of clinical measurement. The Lancet 1986; 307. 3) Kim YR, Yee M, Metha S, et al. Simultaneous differentation and quantitation of erythroblasts and white blood cells on a high throughput clinical haematology analyser. Clin Lab Haemat 1998; 20: 21. 4) Zini G, Mistretta G, Crollari S, Laurenti L, Pelliccioni N, Mascagna G, D’Onofrio G. Poster presentado en el Congreso ISLH de Kobe (Japón) 1999. 5) Oski FA, Nairman JL. En Hematological Problems in the Newborn. Filadelfia. W B Saunders Co, 3ª edición, 1982; pg:14. 6) Philip AGS, Tito AM. Increased nucleated red blood cell counts in small for gestational age infants with very low birth weight. Am J Dis Child 1989; 143: 164. 7) Phelan JP, Ahn MO, Kurst LM, and Martin GI. Nucleated red blood cells: A marker for fetal asphyxia. Am J Obst, Gynaecol 1995; 173: 1380. 8) Green DW, Mimoumi F. Nucleated erytrocytes in healthy infants and in infants of diabetic mothers. J Pediat 1990; 116: 129. 9) Soothill PW, Nicolaidos KH, Campbell S. Prenatal asphyxia, hyperlactaemia, hipoglycaemia and erytroblastosis in growthretarded foetuses. Br Med J 1987; 294: 1051. 10) Walter J, Garrity P. Performance Evaluation of the Sysmex XE2100 Hematology Analyzer. Lab Hemathol 2000; 6:83. 24 Valoración del analizador hematológico XE 2100 en la determinación de eritroblastos en sangre periférica 25
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