Roche Diagnostics - Roche España

Roche Diagnostics informa / Junio 2001
Valoración del analizador
hematológico XE 21OO en la
determinación de eritroblastos en
sangre periférica
C. Cárcamo 1 ; A. Arribas 1 ; M. I. de Frutos 1 ; F. de Frutos 1 ;
F. Omeñaca 2 ; A. Mª Viloria 1 .
1 Servicio de Hematología Analítica,
2 Servicio de Neonatología. Hospital La Paz. Madrid.
En este estudio hemos evaluado el
comportamiento del analizador hematológico
XE2100 en la determinación de eritroblastos
(NRBC) en sangre periférica en una población
de niños pertenecientes al Servicio de
Neonatología de nuestro hospital.
El objetivo era la comparación de las magnitudes
"recuento de leucocitos (WBC)" y "recuento de
eritroblastos/100 leucocitos (NRBC/100 WBC)"
en el analizador Sysmex XE2100 frente a los
resultados de las mismas magnitudes obtenidos
en otro analizador suficientemente evaluado como
es el Cell-Dyn 4000 (Abbott). Ambos analizadores
hematológicos sustraen automáticamente el
recuento de los NRBC del número total de
leucocitos, por lo cual son teóricamente
comparables. Asimismo se comparó el recuento
de eritroblastos del XE2100 con la observación
al microscopio óptico.
Materiales y Métodos
Pacientes
Se procesaron 107 muestras de sangre periférica, 89 de neonatos
y 18 de lactantes que pertenecían a 65 niños diferentes, ya que
en el 56% de los casos las muestras fueron remitidas al laboratorio
en más de una ocasión (entre 2 y 10 días) durante la realización
del estudio.
De los 65 niños estudiados, 43 eran prematuros y 22 nacieron
a término y sólo dos no tenían ninguna patología asociada,
habiendo nacido a término y con un peso superior a 2500 g
(3,1%). Los 63 niños restantes padecían una o más patologías,
distribuyéndose éstas de la forma siguiente:
Patologías del aparato respiratorio (49,2%):
Enfermedad de la membrana hialina (EMH) (20,6%); distress
respiratorio (9,5%); pausas de apnea (6,3%); neumonía en el
pulmón derecho (1,6%); pulmón seco (1,6%); neumopatía
intersticial (1,6%); asfixia por rotura uterina (1,6%); atresia
pulmonar (1,6%); crisis de cianosis (1,6%); displasia
broncopulmonar (1,6%); hipoplasia pulmonar (1,6%).
Patologías del aparato cardiovascular y hematológicas
(49,2%):
Tetralogía de Fallot (1,6%); ductus arterioso (4,8%); cardiopatía
congénita (1,6%); ventriculomegalia leve (1,6%); hipertensión
arterial (4,8%); hipovolemia (3,2%); trombosis aórtica (4,8%);
plétora (11,0%); hemofilia A (1,6%); transfusión (1,6%);
coagulopatía (1,6%); anemia (11,0%).
Patologías del sistema nervioso (25,5%):
Hemorragia subependimaria (3,2%); hemorragia cerebral (1,6%);
hidrocefalia (3,2%); encefalopatía (3,2%); hemorragia
intraventricular II (12,7%); agenesia del cuerpo calloso (1,6%).
Patologías del aparato digestivo (4,8%):
Enterocolitis necrotizante I-II (1,6%); melenas (1,6%); reflujo
gastroesofágico (1,6%).
Patologías del aparato urinario (4,8%):
Insuficiencia renal (1,6%); ureterohidronefrosis bilateral (1,6%);
tubulopatía (1,6%).
Infecciones (36,5%):
Sepsis nosocomial (1,6%); shock séptico (1,6%); infección
urinaria por enterococo (1,6%); infección por citomegalovirus
(CMV) (1,6%); infección por virus respiratorio sincitial (VRS)
(3,2%); candidiasis (1,6%); sepsis por estafilococo coagulasa
negativo (3,2%); meningitis (1,6%); sospecha de meningitis
(1,6%); riesgo de infección (11%); madre portadora de
estreptococo (6,3%); madre con hepatitis C (1,6%).
Alteraciones metabólicas (25,4%):
Hiperbilirrubinemia (4,8%); hipocalcemia (9,5%); acidosis
(7,9%); hipoglucemia (3,2%).
Miscelánea (46,2%):
Madre diabética (3,2%); traumatismo obstétrico (1,6%);
osteopenia del prematuro (1,6%); crisis de hipotonía (3,2%);
labio leporino completo bilateral (1,6%); ictericia (35%).
En cuanto a bajo peso y prematuridad, los 65 niños resultaron
ser: 42 prematuros con peso al nacer inferior a 2500 g; 3 nacidos
a término con peso al nacer inferior a 2500 g; 1 prematuro con
peso al nacer superior a 2500 g y 19 nacidos a término con un
peso al nacer superior a 2500 g.
Métodos
Análisis de los eritroblastos en el Sysmex XE2100
En un canal específico, los hematíes se lisan con el reactivo
diluyente Stromatolyser-NR que libera el núcleo de los NRBC
y con el reactivo colorante Stromatolyser-NR (polimetino) se
tiñen de forma específica los ácidos nucléicos de los leucocitos
y de los NRBC. Después la muestra se analiza por citometría de
flujo con láser semiconductor, registrando en el diagrama de
dispersión NRBC las señales de fluorescencia lateral emitida y
de dispersión frontal. La diferenciación entre los eritroblastos y
los leucocitos se hace por tamaño y por fluorescencia emitida
A partir de estos datos se realiza el recuento de los NRBC. Además,
el Sysmex XE2100 realiza la corrección automática del recuento
de leucocitos, restando los NRBC de los leucocitos totales.
Análisis de los eritroblastos en el Cell-Dyn 4000
El reactivo de los leucocitos lisa las células rojas (incluidos los
NRBC) y los núcleos de los eritroblastos se tiñen con ioduro de
propidio, luego la muestra pasa a través de una célula de flujo
óptico. Los datos de los NRBC se analizan en el canal de dispersión
frontal de la luz, dispersión lateral de luz polarizada y fluorescencia
roja. Utilizando estos 3 discriminadores los NRBC son separados
de los WBC y contados como una población celular específica,
independiente de la población de los leucocitos.
El examen al microscopio óptico de los eritroblastos se llevó a
cabo por 2 observadores expertos contando 200 células cada
uno, según recomendaciones del ICSH (International Committee
of Standardization in Haemathology).
Las ecuaciones de regresión de las magnitudes estudiadas se
calcularon mediante la regresión no paramétrica de Passing-
Bablok (1), calculándose aparte el coeficiente de correlación.
Resultados
Respecto a los recuentos de eritroblastos por cada 100 leucocitos
(NRBC/100 WBC), concentración de eritroblastos (NRBC
/10 3 mL) y concentración de leucocitos (WBC/10 -9 L) se utilizó
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