Package Insert - 16359 - A - multi - 410591.indd - Doctorshop.it

DE
EN
FR
APPLICATION
bioNexia® BTA (Bladder Tumor-associated Antigen) est un test rapide qui permet la
détection qualitative des antigènes associés aux tumeurs de la vessie dans des échantillons
d’urine humaine. Ce test est utilisé comme une aide diagnostique pour le dépistage des
populations à haut risque et la surveillance des patients souffrant d’un cancer de la vessie.
Il est destiné exclusivement au diagnostic in vitro et est réservé à un usage professionnel.
RESUME ET EXPLICATION
Incidence
Les carcinomes de la vessie représentent approximativement 2 à 3 % des tumeurs malignes.
Le carcinome de la vessie se situe au 2 e rang, juste derrière le carcinome prostatique, en
terme d’incidence des tumeurs affectant le système génito-urinaire.
Cause
Parmi les facteurs accroissant le risque de carcinome de la vessie figurent le tabac, la cystite
chronique, l’exposition aux amines aromatiques dans l’environnement professionnel
(notamment salons de coiffure, industries chimiques, du cuir et de la peinture, pesticides,
etc.) (1), la radiothérapie du petit bassin, la bilharziose, la néphropathie des Balkans,
la néphrite interstitielle chronique ainsi que l’administration prolongée de certains
médicaments (chlornaphazine, phénacétine, cyclophosphamide), dont certains ont été
retirés du marché.
Symptômes cliniques
Une micro ou une macro-hématurie se produit chez 80 % des patients environ, une dysurie,
en particulier lorsque les antibiotiques n’entraînent aucune amélioration est un autre
symptôme qui peut indiquer un carcinome de la vessie. Aux stades avancés de la maladie,
des douleurs et une rétention urinaire avec les problèmes associés peuvent se produire.
Stadification et degré de différenciation
Une distinction est généralement faite entre les tumeurs superficielles et les tumeurs infiltrantes.
Les différentes phases sont résumées dans le tableau ci-dessous ; des sous-classifications a et
b sont possibles mais ne sont pas indiquées. Lorsqu’un diagnostic est établi, 75 à 85 % environ
des patients présentent un carcinome de la vessie superficiel et non-invasif (CCT = Carcinome
à Cellules Transitionnelles). Ces patients doivent être suivis régulièrement car ils présentent un
risque de récidive de 75 %.
TR RU PL CS SV PT
IT
ES
bioNexia® BTA
bioNexia® BTA
1
1

Stadification
Tx
Tumeur primaire, non évaluable
T0
Aucune indication de tumeur primaire
Ta
Tumeur superficielle n’atteignant pas la muqueuse
Tis Tumeur superficielle in situ : « tumeur superficielle »
T1
Tumeur envahissant le tissu conjonctif sous-épithélial
T2
Tumeur envahissant les muscles
T3
Tumeur envahissant le tissu péri-vésical
T4
Tumeur envahissant l’un des organes suivants : prostate, utérus, vagin,
paroi pelvienne, paroi abdominale.
Un autre élément de pronostic important est le degré de différenciation :
Degré du grade histologique de différenciation
G1
Bonne différenciation
G2
Différenciation modérée
G3
Mauvaise différenciation
G4
Carcinome anaplasique
Diagnostic
La cytologie urinaire et la cystoscopie sont les deux procédures les plus fréquemment
employées pour détecter le carcinome de la vessie. La cytologie urinaire analyse les
cellules desquamées présentes dans l’urine en vue de déceler des cellules cancéreuses.
Malheureusement, le nombre de cellules total est souvent faible. De plus, le milieu urinaire
attaque les cellules, ce qui peut masquer des caractéristiques de diagnostic importantes.
Très souvent, aucune procédure standardisée de prélèvement et de conservation des
échantillons n’est définie. Des procédures contrôlées de la miction semblent donner
les meilleurs résultats (2). La sensibilité clinique de la cytologie urinaire est sujette à des
fluctuations considérables et les tumeurs de stades précoces sont souvent non détectées
(2,3).
Du fait de sa spécificité et de sa sensibilité clinique, la cystoscopie est considérée comme
la procédure de diagnostic de référence (en plus de la biopsie). Mais cette intervention
invasive est lourde pour les patients et elle ne permet d’identifier que les tumeurs visibles.
Compte tenu des inconvénients liés aux procédures de diagnostic mentionnées ci-dessus, de
nombreuses recherches ont été lancées pour identifier les marqueurs de tumeurs susceptibles
d’aider au diagnostic des carcinomes de la vessie (4). Avec l’antigène associé aux tumeurs de
la vessie (BTA), une protéine a été découverte, dont l’occurrence est souvent accrue chez les
2
410591

FR
patients souffrant d’un carcinome de la vessie. Cette protéine a été isolée à partir de plusieurs
lignées cellulaires du carcinome de la vessie, mais pas à partir de cellules épithéliales normales.
Du point de vue biochimique, l’antigène BTA est une protéine étroitement liée au facteur H
du complément humain (protéine associée au facteur H du complément humain, hCFHrp)
(5,6). Les deux protéines sont détectées par les anticorps monoclonaux du test. Le facteur
H du complément humain joue un rôle inhibiteur important de la formation du complexe
d’attaque membranaire, la cascade du complément (7), qui est responsable de la lyse des
cellules dégénérées. Il a été prouvé in vitro que l’antigène BTA inhibait également la formation
du complexe d’attaque membranaire. Il est possible d’arrêter cette inhibition en ajoutant
des anticorps monoclonaux contre la protéine hCFHrp (8). Il peut donc être proposé que les
cellules cancéreuses échappent ainsi au système de défense de l’organisme.
Le test bioNexia® BTA permet de détecter l’antigène BTA dans l’urine au moyen d’une
réaction antigène-anticorps spécifique. Cette approche non-invasive se caractérise par une
sensibilité clinique nettement supérieure à celle de la cytologie urinaire, particulièrement en
cas de carcinomes aux stades précoces.
Dans les cas non résolus de micro et de macro-hématuries, la combinaison du test BTA et de
la cytologie peut accroître le taux de détection. Lors du suivi des patients souffrant d’une
tumeur de la vessie, ce test aide à l’évaluation du risque de récidives et peut ainsi contribuer
à éviter des cystoscopies ou des biopsies inutiles.
L’utilité de l’antigène BTA comme marqueur de tumeur a été confirmée par plusieurs études
(9,10). Le test s’effectue à partir de l’urine du patient et le résultat est obtenu en quelques
minutes.
PRINCIPE
bioNexia® BTA est un test immuno-chromatographique qualitatif permettant la détection
de l’antigène associé aux tumeurs de la vessie (BTA) dans l’urine humaine.
Ce test repose sur deux anticorps monoclonaux
spécifiques dirigés contre différents épitopes
de l’antigène BTA. La membrane comporte
deux anticorps : un anticorps monoclonal fixé
au niveau de la ligne T (voir figure) et un 2 e
anticorps coloré.
Ligne de contrôle (C)
Si l’échantillon d’urine contient l’antigène
Visible dans tous les
BTA, il formera un complexe avec l’anticorps
résultats valides
Ligne de test (T)
coloré. Ainsi, lorsque l’échantillon migre sur
Visible dans tous les
la membrane, ce complexe sera capturé par
échantillons positifs
l’anticorps immobilisé et une ligne rouge
apparaîtra dans la zone T. Si l’échantillon d’urine
ne contient aucun antigène BTA, l’anticorps
Puits d’échantillon (S)
Dépôt de l’échantillon
coloré ne forme pas de complexe et aucune
ligne de test ne sera générée dans la zone T.
TR RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
ID patient ou échantillon
Zone d’identification
bioNexia® BTA
3

En outre, le test comprend une ligne de contrôle de migration (C). Cette ligne de contrôle
sera générée, que l’antigène BTA soit présent ou non. L’anticorps coloré est directement
capturé par un réactif (chèvre anti-IgG de souris) immobilisé dans la zone de contrôle. Cette
ligne de contrôle doit apparaître pour valider la migration.
COMPOSITION DES REACTIFS DU COFFRET (10 TESTS)
10 cassettes test Ensachés individuellement avec une psipette de prélèvement
jetable et un dessicant. La membrane de la cassette de test contient
des anticorps monoclonaux de souris dirigés contre différents
épitopes de l’antigène BTA.
1 guide d’utilisation simplifié imprimé sur le coffret réactif
1 notice
MATERIEL NECESSAIRE MAIS NON FOURNI
• Récipient pour recueil de l’urine
• Ne pas utiliser de récipients en papier ou Styrofoam (mousse de polystyrène).
• Chronomètre
PRECAUTIONS D’UTILISATION
• Pour diagnostic in vitro exclusivement.
• Pour usage professionnel uniquement.
• Ce coffret contient des composants d’origine animale. La maîtrise de l’origine et/ou de
l’état sanitaire des animaux ne pouvant garantir de façon absolue que ces produits ne
contiennent aucun agent pathogène transmissible, il est recommandé de les manipuler
avec les précautions d’usage relatives aux produits potentiellement infectieux.
• Ne pas utiliser les réactifs après la date de péremption indiquée sur les emballages.
• La cassette doit être conservée jusqu’à utilisation dans le sachet scellé contenant le dessicant.
• La cassette est à usage unique, elle ne doit pas être réutilisée.
• Tous les prélèvements doivent être considérés comme potentiellement infectieux et
manipulés en suivant les précautions recommandées selon les règlements en vigueur dans
le pays d’utilisation.
• Ne pas utiliser le test si l’emballage est endommagé.
CONDITIONS DE STOCKAGE ET STABILITE
• Conserver le coffret entre 2 et 30 °C.
• NE PAS CONGELER.
• Tous les composants sont stables jusqu’à la date de péremption indiquée sur les
emballages, s’ils sont conservés dans les conditions préconisées. Ne pas utiliser au-delà
de la date de péremption.
• La cassette doit être maintenue dans son sachet scellé jusqu’à utilisation.
4
410591

FR
PRELEVEMENT ET PREPARATION DES ECHANTILLONS
1. Prélèvement
Le test s’effectue avec de l’urine humaine (recueil direct ou sur patient sous cathéter).
2. Préparation
Aucune préparation spéciale des échantillons d’urine n’est requise. Les échantillons doivent être
amenés à température ambiante avant réalisation du test. Si les échantillons sont conservés
pendant des périodes prolongées ou sont décongelés, ils doivent être bien homogénéisés avant
le test. Si l’urine doit également être utilisée pour d’autres examens, prélever un aliquot de 2 mL
environ pour le test BTA en premier lieu, afin d’éviter une contamination éventuelle.
3. Stockage
Après prélèvement, les échantillons d’urine peuvent être conservés à température ambiante
pendant 4 jours au maximum. Si les échantillons d’urine ne sont pas testés immédiatement,
ils doivent être conservés au réfrigérateur à une température comprise entre 2 et 8 °C
pendant 8 jours au maximum. Un échantillon d’urine congelé stocké à une température
comprise entre -19 °C et -31 °C est stable pendant 24 semaines, dans la limite de 3 cycles de
congélation/décongélation.
Notes
• Lire les remarques suivantes avant le prélèvement d’échantillons.
• Ne pas utiliser de récipients en papier ou Styrofoam (mousse de polystyrène) pour le
prélèvement des échantillons d’urine.
• Utiliser un nouveau récipient pour chaque échantillon afin d’éviter toutes contaminations
croisées.
• Identifier le récipient d’urine afin d’assurer l’identification patient.
• Le sérum, le plasma, le sang total, les lavages vésicaux et les échantillons cytologiques ne
peuvent pas être utilisés avec ce test.
• Ne pas prélever l’urine en période de menstruations ni pendant les deux jours suivants
l’arrêt des règles.
• Si des médicaments intravésicaux, tels que BCG (vaccin de Calmette et Guérin),
mitomycine C, thiotépa, bropiramine/interféron (dans le cadre de protocoles de
recherche), ont été administrés, il revient au médecin de déterminer si le test peut être
effectué.
• Les tests BTA ne doivent pas être effectués après une intervention chirurgicale, une
biopsie ou tout autre examen invasif de la vessie ou des voies urinaires. Laisser un délai
suffisant après de telles interventions pour permettre la récupération du traumatisme. Lire
également les sections « Limites du test » ou « PERFORMANCES ».
MODE OPERATOIRE
1. Le sachet scellé contenant la cassette de test ainsi que l’échantillon patient doivent être
amenés à température ambiante avant la réalisation du test. Ne pas ouvrir le sachet
réfrigéré, afin d’éviter la formation de condensation sur la membrane du test.
2. Ouvrir le sachet, retirer la cassette de test et la psipette. Jeter le sachet de dessicant.
TR RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
bioNexia® BTA
5

3. Agiter délicatement l’échantillon d’urine du patient. Remplir la psipette de prélèvement
fournie avec l’échantillon d’urine du patient et la maintenir en position verticale audessus
du puits d’échantillon (comme indiqué sur le protocole simplifié d’utilisation sur
le coffret) et déposer trois grosses gouttes dans le puits d’échantillon (S).
4. Démarrer le chronomètre aussitôt après avoir ajouté l’échantillon.
5. Lire les résultats à 5 minutes et ce, dans la limite de 6 minutes. Le résultat du test n’est
pas valide s’il est lu après 6 minutes.
RESULTATS ET INTERPRETATION
NEGATIF
Une ligne rouge apparaît dans la zone de la ligne de contrôle (C).
Aucune ligne rouge n’est visible dans la zone de la ligne de test (T).
POSITIF
Deux lignes rouges distinctes apparaissent.
Une ligne apparaît dans la zone de la ligne de contrôle (C) et une autre ligne apparaît dans
la zone de la ligne de test (T). Une ligne de test (T) rouge pâle peut être considérée comme
un résultat positif.
NON VALIDE
La ligne de contrôle (C) n’apparaît pas. L’absence de ligne rouge dans la zone de contrôle
(C) signifie que la migration de test ne s’est pas effectuée correctement et le résultat du
test n’est pas valide. Revoir la procédure et répéter le test avec une nouvelle cassette. Si le
problème persiste, ne plus utiliser le coffret de test et contacter le fournisseur.
Lire à 5 minutes mais pas
au-delà de 6 minutes.
Le résultat du test n’est
pas valide s’il est lu après
6 minutes
3 gouttes Drops of urine
d’urine
Negative Négatif Positive Positif Non Invalid valide Non Invalid
valide
-
+
x
x
CONTROLE DE QUALITE
Le test inclut un contrôle de migration indiqué par et une ligne de couleur (C). Si la ligne de
contrôle n’apparaît pas, le test est invalide.
Il est de la responsabilité de l’utilisateur de s’assurer que le contrôle de qualité est mis en
œuvre conformément à la législation locale en vigueur.
6
410591

RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
TR
FR
LIMITES DU TEST
• Le test BTA est une aide au diagnostic, le diagnostic ne doit pas s’effectuer exclusivement
sur le résultat. Le médecin doit évaluer ce dernier par rapport à d’autres résultats
cliniques et données d’examen, et doit confirmer son diagnostic à l’aide d’autres
procédures, le cas échéant.
• Le résultat ne doit pas être interprété comme la preuve absolue de la présence ou de
l’absence de carcinome de la vessie urinaire. Des concentrations de BTA élevées ont
également été détectées chez les patients souffrant de maladies bénignes telles que des
infections des voies urinaires, des calculs rénaux, une néphrite ou un traumatisme de la
vessie ou des voies urinaires.
Par ailleurs, un carcinome rénal et/ou un CCT (Carcinome à Cellules Transitionnelles) des voies
urinaires supérieures peuvent également entraîner un niveau de BTA élevé dans l’urine.
• La sensibilité clinique des tests BTA dépend de l’état d’avancement du carcinome de la
vessie. Lire la section « PERFORMANCES ».
• L’impact de la radiothérapie ou de la chimiothérapie systémique sur les résultats des tests
BTA n’est pas déterminé, de même que les effets des traitements à titre expérimental.
• Certaines pathologies bénignes telles que les calculs rénaux, la néphrite, les infections
des voies urinaires ou certaines maladies vénériennes, peuvent augmenter le nombre de
résultats positifs des tests.
• Le cancer rénal ou le carcinome urothélial des voies urinaires supérieures peuvent aussi
provoquer des niveaux de BTA accrus.
PERFORMANCES
Performances cliniques
Spécificité
555 échantillons d’urine prélevés sur des patients ne souffrant pas de carcinome de la vessie
ont été testés afin de vérifier la spécificité clinique du test bioNexia® BTA. L’âge moyen des
patients était de 55 ans et 48 % étaient des hommes. Outre 167 sujets sains, 388 patients
représentant différents cas cliniques ont été examinés. Ils ont été regroupés dans différentes
catégories. Les résultats de cette étude sont résumés dans le tableau suivant.
Groupe de patients
Caractéristiques ou cas
cliniques
Nombre Spécificité clinique en %
(intervalle de confiance de 95 %)
Sujets sains 167 95
(90 – 98)
Maladies et types de cancer non génito-urinaires
Maladies non
génito-urinaires
Cancers non
génito-urinaires
Total des cas cliniques
non génito-urinaires
Diabète, arthrite, lupus,
autres maladies dégénératives
du collagène
Carcinomes du sein, des
poumons, de l’estomac et
des intestins, leucémie,
lymphomes
52 98
(89 – 100)
53 89
(77 – 95)
105 93
(87 – 97)
bioNexia® BTA
7

Maladies génito-urinaires bénignes
Hyperplasie prostatique
bénigne
Maladies rénales Maladies rénales
bénignes
Calculs rénaux, néphrite
et autres
Maladies
génito-urinaires
diverses
Total des maladies
génito-urinaires
Prostatite, urétrite, infections
des voies urinaires,
incontinence, maladies
vénériennes
26 88
(71 – 98)
32 50
(32 – 68)
94 76
(65 – 84)
152 72
(65 – 79)
Types de cancer génito-urinaires
Carcinome prostatique 45 78
(63 – 89)
Cancer du rein 7 29
(4 – 71)
Autres types de cancer Carcinomes endométriaux,
ovariens et autres
25 76
(55 – 91)
Total des can cers
génito-urinaires
77 73
(61 – 82)
Traumatisme
génito-urinaire
54 33
(21 – 47)
La spécificité du test bioNexia® BTA chez 107 patients ayant des antécédents de cancer de la
vessie et ne présentant t aucun symptôme de la maladie était de 70 % (IC de 95 % : 60 – 79).
Sensibilité
La sensibilité clinique du test bioNexia® BTA a été déterminée à l’aide de 220 échantillons
d’urine prélevés sur des patients pour lesquels une tumeur de la vessie a été confirmée par
biopsie. L’âge moyen des patients était de 68 ans et 79 % étaient des hommes. La phase et le
grade histologique de la tumeur, ainsi que sa détection par le test BTA, sont présentées dans
le tableau suivant. Il n’a pas été possible de déterminer la phase et le grade histologique de
3 (a) et 12 (b) échantillons, respectivement.
Sensibilité du test BTA par phase et degré des tumeurs
Stade de la tumeur (a) Nombre d’échantillons Sensibilité clinique en %
(intervalle de confiance de 95 %)
Ta 111 51 (42 – 61)
Tis 18 61 (36 – 83)
T1 38 89 (75 – 97)
T2-T4 50 88 (76 – 95)
8
410591

FR
Grade histologique de la
tumeur (b)
Nombre d’échantillons Sensibilité clinique en %
(intervalle de confiance de 95 %)
1 57 42 (29 – 56)
2 56 66 (52 – 78)
3 95 83 (73 – 89)
131 échantillons d’urine sur 220 ont été examinés simultanément à l’aide de méthodes de
cytologie urinaire (VUC - Voided Urine Cytology). La sensibilité clinique de chacune des méthodes
et/ou la sensibilité des deux méthodes combinées sont résumées dans le tableau suivant.
Sensibilité du test BTA par phase des tumeurs
Sensibilité clinique en %
(intervalle de confiance de 95 %)
Stade de la
tumeur
Nombre
d’échantillons
Test BTA
Cytologie urinaire
(VUC)
Test BTA + VUC
Ta 73 45 (34 – 57) 7 (2 – 15) 49 (37 – 61)
Tis 15 53 (27 – 79) 60 (32 – 84) 80 (52 – 96)
T1 27 85 (66 – 96) 41 (22 – 61) 85 (66 – 96)
T2-T4 16 75 (48 – 93) 38 (15 – 65) 81 (54 – 96)
TR RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
Les données indiquent, en particulier aux phases précoces de la tumeur, que le test BTA
a une sensibilité nettement supérieure à celle de la cytologie urinaire. La détection des
tumeurs Tis (tumeurs in situ) est légèrement inférieure.
Performances analytiques
Intervalle de mesure du test bioNexia® BTA
La limite de détection inférieure du test se situe approximativement à 22,4 U/mL. Jusqu’à
une concentration de 12 400 U/mL, aucune réaction prozone (effet crochet à dose élevée)
n’est observée. Aucune concentration élevée n’est apparue dans les échantillons testés.
Répétabilité
Quatre échantillons présentant différents niveaux d’antigènes (2 U/mL, 32 U/mL, 67 U/mL,
292 U/mL) ont été testés 50 fois (10 tests x 5 réplicats) le même jour.
La répétabilité du dosage a été évaluée au niveau de deux sites. La concordance entre le
résultat observé et le résultat attendu des tests, sur la base de la concentration d’antigène
connue, était de 100 % au niveau des deux sites.
Reproductibilité
La précision entre les dosages et les lots a été évaluée sur un site. Quatre échantillons
présentant différents niveaux d’antigènes ont été testés 10 fois par jour, pendant 5 jours
consécutifs, avec deux lots.
La concordance entre le résultat observé et le résultat attendu des tests, sur la base de la
concentration d’antigène déterminée, est décrite dans le tableau ci-dessous. Le résultat final
a été déterminé par le résultat obtenu par au moins 2 des 3 lecteurs.
bioNexia® BTA
9

Echantillon Lot Nombre
de résultats
concordants
Pourcentage
de résultats
concordants
Reproductibilité analytique
en % (limite de confiance
de 95 %)
Echantillon
(2 U/mL)
Echantillon
(32 U/mL)
Echantillon
(67 U/mL)
Echantillon
(292 U/mL)
Dev3 50 100 92,9 – 100,0
Dev4 50 100 92,9 – 100,0
Dev3 50 100 92,9 – 100,0
Dev4 50 100 92,9 – 100,0
Dev3 50 100 92,9 – 100,0
Dev4 50 100 92,9 – 100,0
Dev3 50 100 92,9 – 100,0
Dev4 50 100 92,9 – 100,0
La concordance entre les dosages était égale à 100 %.
SUBSTANCES INTERFERENTES
Impact de substances endogènes et exogènes
Pour déterminer les interférences éventuelles du test, des pools d’urine négatifs et positifs
en BTA ont été mélangés avec les substances indiquées dans le tableau ci-dessous.
Les résultats des tests n’ont pas été affectés par les concentrations indiquées.
Substance
Constituants possibles de l’urine (substances endogènes)
Hémoglobine
Leucocytes
Erythrocytes
Albumine
Bilirubine (non conjuguée) a
IgG
Chlorure de sodium a
Acide urique
Acide ascorbique
Concentration
1 mg/mL
106 cellules/mL
106 cellules/mL
10 mg/mL
4 μg/mL
100 μg/mL
3,65 mg/mL
2,5 mg/mL
50 mg/mL
10
410591

FR
Molécules actives de traitements pharmaceutiques
Ampicilline
Doxorubicine-HCl
Mitomycine C
Nitrofurantoïne
Phénazopyridine-HCl a
Thiotépa
Triméthoprime
BCG
Finastéride
Flutamide
6 mg/mL
100 μg/mL
100 μg/mL
500 μg/mL
800 μg/mL
100 μg/mL
500 μg/mL
200 μg/mL
25 μg/mL
1 mg/mL
Loversol,
74 % (produit de contraste pour imagerie) a 1 %
Urised b
175 μg/mL
a : à des concentrations élevées, l’intensité de la ligne de résultat du test peut être réduite.
b : la coloration intrinsèque de la molécule gêne la lecture à des concentrations supérieures.
ELIMINATION DES DECHETS
Eliminer les réactifs utilisés ou non utilisés ainsi que les matériels à usage unique contaminés
en suivant les procédures relatives aux produits infectieux ou potentiellement infectieux.
Il incombe à chaque laboratoire de gérer les déchets et les effluents qu’il produit selon
leur nature et leur dangerosité, et de s’assurer du traitement et de l’élimination selon les
réglementations applicables.
TR RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES
1. Robert Koch Institut : Cancer in Germany. 2005/2006. Incidence and Trends. 7th ed. 2010.
p.84-87 HYPERLINK “http://www.rki.de/cln_160/nn_1219822/EN/Content/Health__Reporting/
GBEDownloadsB/KID2010,templateId=raw,property=publicationFile.pdf/KID2010.pdf” http://
www.rki.de/cln_160/nn_1219822/EN/Content/Health__Reporting/GBEDownloadsB/KID2010,
templateId=raw,property=publicationFile.pdf/KID2010.pdf (Accessed Dec 2010)
2. Umiker W.: Accuracy of Cytologic Diagnosis of Cancer of the Urinary Tract. Symposium on
Diagnostic Accuracy of Cytologic Technics 8:186-193,1964.
3. Badalament R.A., Hermansen D.K., et al : The Sensitivity of Bladder Wash Flow Cytometry,
Bladder Wash Cytology, and Voided Cytology in the Detection of Bladder Carcinoma. Cancer
60:1423-1427, 1987.
4. Grossmann H.B.: Markers for Bladder Cancer.
5. Kinders R., Jones T., et al: Complement Factor H or a Related Protein Is a Marker for Transitional
Cell Carcinoma of the Bladder. Clinical Cancer Research 4:2511-2520, 1998.
6. Corey M., Kinders R., et al: Factor H Related Proteins Are Upregulated In Bladder Cancer.
Proceedings of the American Association for Cancer Research 39: 263, 1998.
bioNexia® BTA
11

7. Austyn J. M., Wood K. J.: Principles of Cellular and Molecular Immunology. Oxford University
Press p. 522-554, 1993.
8. Corey M.J., Kinders R.J., et al: Enhancement of Complement-Mediated Lysis of Cancer Cells By
Anti-Factor H Antibodies. Proceedings of the American Association for Cancer Research 39: 304,
1998.
9. Sarosdy M.F., Hudson M.A., et al: Improved Detection of Recurrent Bladder Cancer Using the
Bard BTA stat Test. Urology 50(3):349 - 353,1997.
10. Raitanen M.-P., Marttila T., et al: The Bard BTA stat Test in Monitoring of Bladder Cancer. The
Journal of Urology 157: 28, 1997.
TABLE DES SYMBOLES
Symbole Signification Symbole Signification
Référence du catalogue
Dispositif médical de
diagnostic in vitro
Fabricant
Limites de température
Utiliser jusque
Code du lot
Consulter les instructions
d’utilisation
Ne pas réutiliser
Conserver à l’abri de la lumière
solaire
Contenu suffisant pour
tests
12
410591

FR
BIOMERIEUX, le logo bleu et bioNexia sont des marques de commerce utilisées, en
attente d’homologation et/ou déposées de bioMérieux SA ou de l’une de ses filiales.
CLSI est une marque déposée du Clinical and Laboratory Standards Institute Inc.
Tous les autres noms ou marques appartiennent à leurs propriétaires respectifs.
RU
EN
PT
PL
CS
IT
ES
DE
bioMérieux SA
69280 Marcy-l‘Etoile-France
Tel: 33 (0) 478 87 20 00
Fax: 33 (0) 478 87 20 90
www.biomerieux.com/bionexia
RCS LYON 673 620 399
SV
16359 A - 2010/12
TR
bioNexia® BTA
13

14
410591

DE
EN
FR
INTENDED USE
bioNexia® BTA is a rapid test for the qualitative detection of Bladder Tumor-associated
Antigen (BTA) in human urine specimens. The test is indicated for use as an aid for screening
high risk populations and monitoring bladder cancer patients. The test is intended for
professional in vitro diagnostic use only.
SUMMARY AND EXPLANATION
Incidence
Carcinomas of the urinary bladder represent approx. 2-3% of all malign tumors in humans.
After prostatic carcinoma, bladder carcinoma is second in incidence of all tumor diseases of
the genitourinary system.
Etiology
Among the factors increasing the risk of urinary bladder carcinoma are smoking, chronic
cystitis, exposure to aromatic amines at work (e.g. hairdressers, chemical, leather, and
paint industry, pest control, and others) (1), radiotherapy of the lesser pelvis, bilharziosis,
Balkan nephropathy, chronic interstitial nephritis as well as long-term application of certain
medications (chlornaphazine, phenacetine, cyclophosphamide), some of which have been
removed from the market.
Clinical Symptoms
Micro or macro hematuris occurs in approx. 80% of patients, although detection of both
forms often occurs only intermittently. Other frequent symptoms indicating a carcinoma
of the urinary bladder are dysuric micturition difficulties, particularly in cases where no
improvement is achieved with antibiotics. In advanced stages, pain and urinary retention,
and the accompanying problems, may occur.
Staging and degree of differentiation
Generally, a differentiation between superficial and infiltrating tumors is made. The various
stages are summarized in the table below; further sub-classifications into a and b are
possible (not shown) . When a diagnosis is made, approx. 75-85% of patients present a
superficial, non-invasive urinary bladder carcinoma (TCC = Transitional Cell Carcinoma). A
75% risk of relapse applies for these patients, so that they have to be regularly monitored for
new attacks of the disease in follow-up examinations.
TR RU PL CS SV PT
IT
ES
bioNexia® BTA
bioNexia® BTA
15
15

Staging
Tx
Primary tumor, not assessable
T0
No indication for primary tumor
Ta
Non-invasive carcinoma of the mucosa
Tis
Carcinoma in situ: “shallow tumor”
T1
Tumor is infiltrating subepithelial connective tissue
T2
Tumor is infiltrating muscles
T3
Tumor is infiltrating perivesical tissue
T4
Tumor is infiltrating one of the following organs: prostate gland, uterus,
vagina, pelvic wall, abdominal wall.
Another important grading for prognosis is the degree of differentiation:
Degree of differentiation grade
G1
Well differentiated
G2
Moderately differentiated
G3
Poorly differentiated
G4
Anaplastic carcinoma
Diagnosis
The two most frequently used procedures to detect a carcinoma of the bladder are urine
cytology and cystoscopy. In urine cytology, urine sediments are scrutinized for cancer cells.
Unfortunately, the total number of cells is frequently comparatively low. Furthermore, the
milieu conditions in urine attack the cells, with the consequence that important diagnostic
characteristics may be obscured. Frequently, no standard procedures for taking and storing
specimens are in place. Controlled bladder voiding procedures seem to produce the best
results (2). One major limitation of this diagnostic procedure is however, that clinical
sensitivity is subject to considerable fluctuations and that tumors in the early stages are
often overlooked (2,3).
Due to its clinical sensitivity and specificity, cystoscopy is regarded as standard
diagnostic procedure (besides biopsy). The disadvantage of this invasive intervention
is that it is strenuous for the patient and that only visible tumors are identified.
Based on the disadvantages of the above-mentioned diagnostic procedures, an intensive
search for tumor markers, which might be helpful in diagnosing urinary bladder carcinoma,
took place (4). With the Bladder Tumor-associated Antigen (BTA), a protein was discovered,
the occurrence of which is often increased in patients suffering from bladder carcinoma. It
was isolated from several cell-lines of bladder carcinoma, but not from normal epithelial cells.
16
410591

FR
TR RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
Biochemically, BTA is a protein which is closely related to the human complement factor H
(human complement factor H-related protein, hCFHrp) (5,6). Both proteins are detected by
the monoclonal antibodies of the test. The human complement factor H plays an important
inhibiting role in the formation of the membrane attack complex, the complement cascade
(7), which is responsible for the lysis of degenerated cells. It could be proven in vitro that
BTA also inhibits the formation of the membrane attack complex. It was possible to stop
inhibition by adding monoclonal antibodies against hCFHrp (8). It is conceivable that cancer
cells escape the defense system of the body in this manner.
The bioNexia® BTA test cassette enables the detection of BTA in urine by means of specific
antigen-antibody reaction. This non-invasive approach is characterized by a considerably
higher clinical sensitivity than urine cytology, particularly in carcinomas in the early stages.
In unresolved cases of micro and macro hematuris, a combination of both methods
can increase the detection rate. In the monitoring of bladder tumor patients, the test
furthermore supports the assessment of the risk of relapses and can help to reduce
unnecessary cystoscopies or biopsies.
The usefulness of BTA as a tumor marker has been confirmed in several trials (9,10). The test
is simply performed with the patient’s urine and allows visual evaluation of the result within
a couple of minutes.
PRINCIPLE
The bioNexia® BTA test is a qualitative immuno chromatographic assay for detection of
Bladder Tumor-associated Antigen (BTA) in human urine.
The test is based on two specific monoclonal antibodies directed against different BTAepitopes.
The membrane is pre-coated with one monoclonal antibody on the test line (T)
region (as shown in the figure on the right). The second antibody is color-marked.
When the urine specimen contains BTA, it
will form a complex with the color–marked
antibody. When the fluid runs over the
membrane, this complex will be captured by
the antibody immobilized on the membrane,
and a red line will appear in the T-region. If the
Control line (C)
urinary specimen does not contain any BTA, the
Visible in all valid results
color-marked antibody will be unable to form a
Test line (T)
Visible in all positive samples
complex and no test line will be generated in
the test line (T) region.
Furthermore, the test incorporates a procedural
control line, in the control region (C). This control
Sample well (S)
line will be generated, irrespective of the presence
For the addition of sample
material
of BTA. The color-marked antibody is directly
Patient or sample ID
captured by a reagent (goat-anti-mouse IgG)
For identification purposes
immobilized in the control region. The control
line will appear in every valid test, indicating that
test migration has been correctly performed.
bioNexia® BTA
17

CONTENT OF THE KIT (10 TESTS)
10 Test cassettes In individual sealed pouches with a disposable specimen pipette and
a desiccant. The membrane of test cassette is coated with mouse
monoclonal antibodies directed against different BTA-epitopes.
1 User quick guide printed on the box
1 Package insert
MATERIALS REQUIRED BUT NOT PROVIDED
• Urine specimen container
• Do not use paper or Styrofoam cups (foamed polystyrene).
• Timer
WARNINGS AND PRECAUTIONS
• For in vitro diagnostic use only.
• For professional use only.
• This kit contains products of animal origin. Certified knowledge of the origin and/or
sanitary state of the animals does not totally guarantee the absence of transmissible
pathogenic agents. It is therefore recommended that these products be treated as
potentially infectious, and handled observing the usual safety precautions .
• Do not use reagents after the expiry date indicated on the packaging.
• The test device should be stored in the sealed pouch containing the desiccant, until use.
• The test device is a disposable; it should not be reused.
• All specimens should be considered infectious and handled following the recommended
precautions (CLSI® M29-A, Protection of Laboratory Workers from Instrument Biohazards
and Infectious Disease Transmitted by Blood, Body Fluids, and Tissue; Approved
Guideline – Current revision). For additional information on handling precautions, refer
to “Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories – CDC/NIH – Latest edition”,
or the current regulations in the country of use.
• Do not use the test if the pouch foil packaging is damaged.
STORAGE AND STABILITY
• Store the kit at 2-30°C.
• DO NOT FREEZE.
• If stored according to the recommended conditions, all components are stable until the
expiry date indicated on the packaging. Do not use beyond the expiry date.
• The test device should remain in the pouch until use.
SPECIMEN COLLECTION AND PREPARATION
1. Specimen
The test is carried out with human urine or urine from a catheterized patient.
2. Preparation
No special preparation of the urine specimens is required. The specimens have to be
brought to room temperature before testing. After prolonged storage periods or in case of
18
410591

FR
thawed specimens, the urine should be mixed thoroughly before testing. When the urine is
to be used for other examinations as well, please collect an aliquot of approx. 2 mL for the
BTA-test first, in order to ensure that the urine specimen is not contaminated.
3. Storage
Urine samples may be stored at room temperature for up to 4 days after collection. If the urine
sample is not tested immediately, it should be refrigerated at 2-8°C for up to 8 days. A frozen
urine sample stored at -19°C to -31°C is stable for 24 weeks including up to 3 freeze/thaw cycles.
Notes
• Please read the following notes before specimen collection.
• Do not use paper or Styrofoam cups (foamed polystyrene) for urine specimen collection.
• Use a new container for each specimen, in order to avoid cross-contaminations.
• Adequately mark the urine container to ensure correct specimen identification.
• Cytology specimens, serum, plasma, whole blood or bladder-washouts are not suitable
for the test.
• Do not collect the urine during the menstrual period or within the two following days.
• If intravesical medications have been administered, such as BCG (Bacillus Calmette-
Guerin), mitomycin C, thiotepa, bropiramine (for research purposes) or interferon (for
research purposes), a test should be performed at the physician’s discretion.
• BTA-tests should not be performed following surgery, biopsy or any other invasive
examination of the bladder or urinary tract. Allow sufficient time after such interventions
for trauma recovery. Please also read the sections “Limitations of the Method” or
“PERFORMANCE”.
INSTRUCTIONS FOR USE
1. The sealed pouch containing the test cassettes and the patient specimen, must be
brought to room temperature before performing the test. Do not open the refrigerated
pouch, to avoid condensation of atmospheric humidity on the test membrane.
2. Open the pouch, remove the test cassette and the pipette. Discard the desiccant pouch.
3. Gently swirl the patient’s urine sample. Fill the specimen pipette provided with the
patient’s urine sample and hold it upright above the sample well (as shown in the quick
guide on the box) and put three full drops into the sample well (S).
4. Start the timer immediately after adding the specimen.
5. When the timer reaches 5 minutes, read results within 1 minute. The test result is not
valid if it is read after more than 6 minutes.
INTERPRETATION OF RESULTS
NEGATIVE Result
One red line appears in the control line region (C).
No apparent red line appears in the test line region (T).
POSITIVE Result
Two distinct red lines appear.
One line appears in the control line region (C) and another line appears in the test line region
(T). A faint red test line (T) should be considered positive.
TR RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
bioNexia® BTA
19

INVALID Result
The control line (C) does not appear. No red line in the control region (C) means that
test migration has not been correctly performed and the test result is invalid. Review the
procedure and repeat the test with a new test cassette. If the problem persists, discontinue
using the test kit immediately and contact your local distributor.
Read at 5 minutes but
not later than 6 minutes.
Test result is not valid if
read after 6 minutes
3 Drops of urine
Negative Positive Invalid Invalid
-
+
x
x
QUALITY CONTROL
The test includes an internal procedural control and a colored line (C) indicates that test
migration has been correctly performed. If the control line does not appear, the test is invalid.
It is the responsibility of the user to perform Quality Control in accordance with any local
applicable regulations.
LIMITATIONS OF THE METHOD
• The test result should not be the sole basis for diagnosis but should be evaluated by
a physician against other clinical findings and examination data, and confirmed by
additional diagnostic procedures, if necessary.
• The result should not be interpreted as absolute evidence for the presence or absence
of urinary bladder carcinoma. Elevated BTA concentrations have also been detected in
patients with benign diseases such as urinary tract infections, kidney stones, nephritis or
trauma to the bladder or urinary tract.
Furthermore, carcinomas of the kidneys and/or TCC (Transitional Cell Carcinoma) of the
upper urinary tract may also cause increased BTA-levels in the urine.
• The clinical sensitivity of the BTA-test depends on the stage of the bladder carcinoma.
Please also read the section “PERFORMANCE”.
• The effects of radiotherapy or systemic chemotherapy on the BTA-test result are
unknown, as is the influence of experimental medications.
• Some benign diseases such as kidney stones, nephritis, infections of the urinary tract or
some venereal diseases, may increase the number of positive test results.
• Cancer of the kidneys or urothelium carcinoma of the upper urinary tract may also
cause increased BTA-levels.
PERFORMANCE
Clinical performance
Specificity
555 urine specimens from patients without bladder carcinoma were tested in order to
20
410591

FR
verify the clinical specificity of the bioNexia® BTA test cassette. The average patient age was
55 years, 48% were male. Besides 167 healthy subjects, 388 patients with various clinical
pictures were examined. They were grouped into various categories. The results of this trial
are summarized in the table following.
Patient group
Characteristics or clinical
pictures
Count Clinical specificity in %
(95% confidence interval)
Healthy subjects 167 95
(90-98)
Non-genitourinary diseases and forms of cancer
Non-genitourinary
diseases
Non-genitourinary
forms of cancer
Non-genitourinary
clinical pictures in
total
Benign genitourinary diseases
Diabetes, arthritis, lupus,
other collagen degenerative
diseases
Carcinomas of the breast,
lungs, stomach, intestines,
leukemia , lymphomas
52 98
(89-100)
53 89
(77-95)
105 93
(87-97)
IT
ES DE EN
Benign kidney
diseases
Various genitourinary
diseases
Total genitourinary
diseases
Benign prostatic
hyperplasia
Kidney diseases
kidney stones, nephritis
and others
Prostatitis, urethritis, urinary
tract infections,
incontinence, venereal
disease
26 88
(71-98)
32 50
(32-68)
94 76
(65-84)
152 72
(65-79)
PT
SV
Genitourinary forms of cancer
Prostatic carcinoma 45 78
(63-89)
Kidney cancer 7 29
(4-71)
Other types of cancer
Endometrial, ovarian and
other forms of carcinoma
25 76
(55-91)
CS
PL
Genitourinary forms of
cancer in total
77 73
(61-82)
Genitourinary trauma 54 33
(21-47)
The specificity of the bioNexia® BTA test in 107 patients with a history of bladder cancer and
no evidence of the disease was 70% (95% CI: 60-79).
RU
TR
bioNexia® BTA
21

Sensitivity
The clinical sensitivity of the bioNexia® BTA test was determined using 220 urine specimens
from patients in whom a bladder tumor had been confirmed by means of biopsy. The
average patient age was 68 years, 79% were male. Stage and grade of the tumor, as well
as its detection by the BTA test, are presented in the following table. It was not possible to
determine a stage or a grade for 3 (a) and 12 (b) specimens respectively.
Sensitivity of BTA test by tumor stage and grade
Stage of the tumor (a) Number of specimens Clinical sensitivity in %
(95% Confidence interval)
Ta 111 51 (42-61)
Tis 18 61 (36-83)
T1 38 89 (75-97)
T2-T4 50 88 (76-95)
Grade of the tumor (b) Number of specimens Clinical sensitivity in %
(95% Confidence interval)
1 57 42 (29-56)
2 56 66 (52-78)
3 95 83 (73-89)
131 of the 220 urine specimens were simultaneously examined using urine cytologic
methods (voided urine cytology). The clinical sensitivity of the two methods and/or the
sensitivity of both methods combined, are summarized in the following table.
Sensitivity of BTA test by tumor stage
Clinical sensitivity in %
(95% Confidence interval)
Stage of the
tumor
Number of
specimens
BTA test
Voided Urine Cytology
(VUC)
BTA test +VUC
Ta 73 45 (34-57) 7 (2-15) 49 (37-61)
Tis 15 53 (27-79) 60 (32-84) 80 (52-96)
T1 27 85 (66-96) 41 (22-61) 85 (66-96)
T2-T4 16 75 (48-93) 38 (15-65) 81 (54-96)
The data show that, particularly in the early stages of tumor, the BTA test has a distinctly
higher sensitivity than voided urine cytology. Detection of Tis-tumors (Tumor in situ) is
slightly lower.
22
410591

FR
Analytical performance
Measuring range of the bioNexia® BTA test
The lower detection limit of the test is approx. 22.4 U/mL. Up to a concentration of 12,400
U/mL, no prozone reaction (High Dose Hook Effect) is observed. Higher concentrations did
not occur in the tested specimens.
Repeatability
Four samples with different spiked antigen levels (2 U/mL, 32 U/mL, 67 U/mL, 292 U/mL)
were tested fifty times (10 tests x 5 replicates) on the same day.
The repeatability of the assay was evaluated at two sites. The agreement (consistency)
between the observed test result and the expected result, based on the known
concentration of antigen, was 100% at the two sites.
Reproducibility
Inter- assay and lot-to-lot precision were evaluated at one site. Four samples with different
spiked antigen levels were tested ten times each day for a total of five successive days with
two lots.
The agreement (consistency) between the observed test result and the expected result,
based on the known concentration of antigen, was listed in the table below. The consensus
was determined by the result obtained by at least 2 of the 3 readers.
IT
ES DE EN
Sample Lot Number of
Consistent result
Percentage
of consistent
result
Analytical reproducibility in
% (95% Confidence Limit)
PT
Sample
Dev3 50 100 92.9-100.0
(2 U/mL)
Sample
(32 U/mL)
Sample
(67 U/mL)
Sample
(292 U/mL)
Dev4 50 100 92.9-100.0
Dev3 50 100 92.9-100.0
Dev4 50 100 92.9-100.0
Dev3 50 100 92.9-100.0
Dev4 50 100 92.9-100.0
Dev3 50 100 92.9-100.0
Dev4 50 100 92.9-100.0
SV
CS
PL
There was 100% consistency between assays.
INTERFERING SUBSTANCES
Impact of endogenous and exogenous substances
To determine whether any test interference occurred, BTA-positive and negative urine pools
were mixed with the substances listed in the table below.
RU
TR
bioNexia® BTA
23

The test result was not impacted at the following concentrations.
Substance
Concentration
Possible constituents of the urine (endogenous substances)
Hemoglobin
1 mg/mL
Leukocytes
Erythrocytes
Albumin
Bilirubin (unconjugated) a
IgG
Sodium chloride a
Uric acid
Ascorbic acid
Therapeutic active pharmaceutical ingredients
Ampicillin
Doxorubicin-HCl
Mitomycin C
Nitrofurantoin
Phenazopyridine-HCl a
Thiotepa
Trimethoprim
Bacillus Calmette Guerin
Finasteride
106 cells/mL
106 cells/mL
10 mg/mL
4 μg/mL
100 μg/mL
3,65mg/mL
2.5 mg/mL
50 mg/mL
6 mg/mL
100 μg/mL
100 μg/mL
500 μg/mL
800 μg/mL
100 μg/mL
500 μg/mL
200 μg/mL
25 μg/mL
Flutamide
1 mg/mL
Ioversol,
74% (contrast medium for imaging procedures) a 1%
Urised b
175 μg/mL
a: with increased concentrations, the intensity of the test result line may be reduced.
b: due to the intrinsic coloration, reading of lines is impeded for higher concentrations.
WASTE DISPOSAL
Dispose of used or unused reagents as well as any other contaminated disposable materials
following procedures for infectious or potentially infectious products.
It is the responsibility of each laboratory to handle waste and effluents produced according
to their nature and degree of hazardousness and to treat and dispose of them (or have them
treated and disposed of) in accordance with any applicable regulations.
24
410591

FR
LITERATURE REFERENCES
1. Robert Koch Institut : Cancer in Germany. 2005/2006. Incidence and Trends. 7th ed. 2010.
p.84-87 HYPERLINK “http://www.rki.de/cln_160/nn_1219822/EN/Content/Health__Reporting/
GBEDownloadsB/KID2010,templateId=raw,property=publicationFile.pdf/KID2010.pdf” http://
www.rki.de/cln_160/nn_1219822/EN/Content/Health__Reporting/GBEDownloadsB/KID2010,
templateId=raw,property=publicationFile.pdf/KID2010.pdf (Accessed Dec 2010)
2. Umiker W.: Accuracy of Cytologic Diagnosis of Cancer of the Urinary Tract. Symposium on
Diagnostic Accuracy of Cytologic Technics 8:186-193,1964.
3. Badalament R.A., Hermansen D.K., et al : The Sensitivity of Bladder Wash Flow Cytometry,
Bladder Wash Cytology, and Voided Cytology in the Detection of Bladder Carcinoma. Cancer
60:1423-1427, 1987.
4. Grossmann H.B.: Markers for Bladder Cancer.
5. Kinders R., Jones T., et al: Complement Factor H or a Related Protein Is a Marker for Transitional
Cell Carcinoma of the Bladder. Clinical Cancer Research 4:2511-2520, 1998.
6. Corey M., Kinders R., et al: Factor H Related Proteins Are Upregulated In Bladder Cancer.
Proceedings of the American Association for Cancer Research 39: 263, 1998.
7. Austyn J. M., Wood K. J.: Principles of Cellular and Molecular Immunology. Oxford University
Press p. 522-554, 1993.
8. Corey M.J., Kinders R.J., et al: Enhancement of Complement-Mediated Lysis of Cancer Cells By
Anti-Factor H Antibodies. Proceedings of the American Association for Cancer Research 39: 304,
1998.
9. Sarosdy M.F., Hudson M.A., et al: Improved Detection of Recurrent Bladder Cancer Using the
Bard BTA stat Test. Urology 50(3):349 - 353,1997.
10. Raitanen M.-P., Marttila T., et al: The Bard BTA stat Test in Monitoring of Bladder Cancer. The
Journal of Urology 157: 28, 1997.
INDEX OF SYMBOLS
SV PT
IT
ES DE EN
Symbol Meaning Symbol Meaning
Catalogue Number
In Vitro Diagnostic
Medical Device
Batch code
Consult Instructions for Use
CS
PL
Manufacturer
Do not reuse
Temperature limitation
Keep Away From Sunlight
RU
Use by
Contains sufficient for
tests
TR
bioNexia® BTA
25

WARRANTY
bioMérieux disclaims all warranties, express or implied, including any implied warranties of
MERCHANTABILITY AND FITNESS FOR A PARTICULAR USE. bioMérieux shall not be liable for
any incidental or consequential damages.
IN NO EVENT SHALL BIOMERIEUX’S LIABLITY TO CUSTOMER UNDER ANY CLAIM EXCEED A
REFUND OF THE AMOUNT PAID TO BIOMERIEUX FOR THE PRODUCT OR SERVICE WHICH IS
THE SUBJECT OF THE CLAIM.
BIOMERIEUX, the blue logo, bioNexia are used, pending and/or registered
trademarks belonging to bioMérieux SA or one of its subsidiaries.
CLSI is a trademark belonging to Clinical Laboratory and Standards Institute, Inc.
Any other name or trademark is the property of its respective owner.
bioMérieux SA
69280 Marcy-l‘Etoile-France
Tel: 33 (0) 478 87 20 00
Fax: 33 (0) 478 87 20 90
www.biomerieux.com/bionexia
RCS LYON 673 620 399
16359 A - 2010/12
26
410591

DE
TR RU PL CS SV PT
IT
ES
EN
FR
VERWENDUNGSZWECK
bioNexia® BTA ist ein Schnelltest für den qualitativen Nachweis von Blasentumorantigen
(BTA) in menschlichen Urinproben. Der Test ist als unterstützende Maßnahme bei
der Durchführung eines Screeningtests von Populationen mit hohem Risiko und zur
Überwachung von Patienten mit einem Blasentumor angezeigt. Der Test ist nur für die
in-vitro-Diagnostik durch Fachpersonal angezeigt.
EINFÜHRUNG UND TESTERKLÄRUNG
Vorkommen
Karzinome der Harnblase machen ungefähr 2 – 3 % aller malignen Tumore des Menschen
aus. Nach dem Prostatakarzinom ist das Harnblasenkarzinom die zweithäufigste
Tumorerkrankung des Urogenitalsystems.
Ätiologie
Zu den Faktoren, die das Risiko eines Harnblasenkarzinoms erhöhen, zählen Rauchen,
chronische Blasenentzündung, das Einatmen von aromatischen Aminen am Arbeitsplatz (z. B. bei
Friseuren, in der Chemie-, Leder- und Lackindustrie, bei der Schädlingsbekämpfung usw.) (1),
Strahlentherapie des kleinen Beckens, Bilharziose, Balkannephropathie, chronische interstitielle
Nierenentzündung sowie eine Langzeittherapie mit bestimmten Medikamenten (Chlornaphazin,
Phenacetin, Cyclophosphamid), von denen einige vom Markt genommen wurden.
Klinische Symptome
Mikro- oder Makrohämaturie tritt bei ungefähr 80 % aller Patienten auf, obwohl beide Formen
häufig nur intermittierend nachweisbar sind. Weitere häufig beobachtete Symptome, die auf ein
Harnblasenkarzinom hindeuten können, sind dysurische Miktionsbeschwerden, insbesondere
wenn die Verabreichung von Antibiotika zu keiner Besserung führt. In fortgeschritteneren Stadien
können Schmerzen, Harnverhaltung und die damit verbundenen Problematiken auftreten.
Stadieneinteilung und Differenzierungsgrad
Im Allgemeinen wird zwischen oberflächlichen und infiltrierenden Tumoren differenziert.
Die verschiedenen Stadien sind in der untenstehenden Tabelle aufgeführt; weitere
Klassifizierungen in die Unterkategorien a und b sind möglich (hier nicht aufgeführt). Bei
der Diagnosestellung liegt bei ungefähr 75 – 85 % der Patienten ein oberflächliches, nichtinvasives
Harnblasenkarzinom (Urothelkarzinom) vor. Bei diesen Patienten liegt das Risiko
eines Rezidivs bei 75 %, sodass sich diese in regelmäßigen Abständen Kontrolluntersuchungen
unterziehen müssen, um ein erneutes Auftreten der Krankheit rechtzeitig zu erkennen.
bioNexia® BTA
27

Stadieneinteilung
Tx
Primärtumor, kann nicht beurteilt werden
T0
Keine Indikation für einen Primärtumor
Ta
Nicht-invasives Karzinom der Schleimhaut
Tis
Carcinoma in situ: „flacher Tumor“
T1
Tumor infiltriert subepitheliales Bindegewebe
T2
Tumor infiltriert Muskulatur
T3
Tumor infiltriert perivesikales Gewebe
T4
Tumor infiltriert eines der folgenden Organe: Prostata, Uterus, Vagina,
Beckenwand, Bauchwand
Wichtig für die Erstellung einer Prognose ist auch der Differenzierungsgrad:
Differenzierungsgrad
G1
Gut differenziert
G2
Mäßig differenziert
G3
Schlecht differenziert
G4
Anaplastisches Karzinom
Diagnose
Die beiden häufigsten Verfahren zum Nachweis eines Blasenkarzinoms sind eine
Harnzytologie und Blasenspiegelung (Zytoskopie). Bei einer Harnzytologie werden
Harnsedimente auf Krebszellen untersucht. Leider ist bei dieser Methode die Gesamtzahl
der untersuchten Zellen häufig verhältnismäßig gering. Zudem werden durch das Milieu
des Urins die Zellen angegriffen, und als Konsequenz können wichtige diagnostische
Eigenschaften unentdeckt bleiben. Häufig gibt es keine Standardverfahren für die
Entnahme und Aufbewahrung von Proben. Kontrollierte Blasenentleerungsverfahren
scheinen daher die besten Ergebnisse zu erzielen (2). Eine der Haupteinschränkungen dieses
Diagnostikverfahrens ist jedoch, dass die klinische Sensitivität erheblichen Schwankungen
unterliegen kann und Tumore im Frühstadium häufig übersehen werden (2,3).
Aufgrund ihrer klinischen Sensitivität und Spezifität gilt die Blasenspiegelung – neben der
Biopsie – als Standardverfahren der Diagnostik. Der Nachteil dieses Verfahrens ist, dass
der invasive Eingriff für den Patienten anstrengend ist und lediglich sichtbare Tumore
erkannt werden. Aufgrund der Nachteile der zuvor erwähnten Diagnostikverfahren
wurden intensive Tests zur Feststellung von Tumormarkern durchgeführt, die die
Diagnostizierung eines Harnblasenkarzinoms erleichtern könnten (4). Mit dem
Blasentumorantigen (BTA) wurde ein Protein entdeckt, das bei Patienten mit einem
28
410591

FR
TR RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
Blasenkarzinom häufig erhöht ist. Das Protein wurde aus verschiedenen Zelllinien des
Blasenkarzinoms, jedoch nicht aus normalen epithelialen Zellen isoliert. Biochemisch
betrachtet ist BTA ein Protein, das eng mit dem humanen Komplementfaktor H (human
complement factor H-related protein, hCFHrp) (5,6) verwandt ist. Beide Proteine
werden durch die monoklonalen Antikörper des Tests nachgewiesen. Der humane
Komplementfaktor H spielt eine wichtige inhibierende Rolle bei der Bildung des
Membranangriffskomplexes, der Komplementkaskade (7), die für die Auflösung von
entarteten Zellen verantwortlich ist. Es konnte in vitro nachgewiesen werden, dass BTA
die Bildung des Membranangriffskomplexes ebenfalls hemmt. Die hemmende Wirkung
konnte durch das Hinzufügen monoklonaler Antikörper gegen hCFHrp (8) unterbunden
werden. Es ist denkbar, dass sich Krebszellen so dem Abwehrsystem des Körpers entziehen.
Mithilfe der bioNexia® BTA-Testkassette kann BTA im Urin durch eine spezifische Antigen-
Antikörper-Reaktion nachgewiesen werden. Diese nicht-invasive Methode zeichnet sich
durch eine deutlich stärker ausgeprägte klinische Sensitivität als die der Harnzytologie aus.
Dies gilt insbesondere für Karzinome im Anfangsstadium.
In den Fällen, in denen eine Mikro- und Makrohämaturie nicht eindeutig festgestellt werden
konnte, kann eine Kombination beider Methoden zu einer erhöhten Detektionsrate führen.
Im Rahmen von Überwachungen von Blasentumorpatienten kann mithilfe des Tests auch
das Risiko eines Rezidivs beurteilt werden. Unnötige Blasenspiegelungen oder Biopsien
können somit vermieden werden.
Die Zweckmäßigkeit von BTA als Tumormarker wurde im Rahmen mehrerer Studien
bewiesen (9,10). Der Test wird einfach mit dem Urin des Patienten durchgeführt und
ermöglicht innerhalb weniger Minuten eine visuelle Auswertung des Ergebnisses.
PRINZIP
Der bioNexia® BTA-Test ist ein qualitativer Test für den immun-chromatografischen Nachweis
eines Blasentumorantigens (BTA) im menschlichen Urin.
Der Test wird auf der Grundlage von zwei
spezifischen monoklonalen Antikörpern gegen
verschiedene BTA-Epitope durchgeführt. Die
Membran wird mit einem monoklonalen
Antikörper im Bereich der Testlinie (T)
Kontrolllinie (C)
vorbeschichtet (vgl. Abb. rechts). Der zweite
Control Erkennbar line bei (C) allen
Visible
Antikörper wird farbig markiert.
gültigen in Ergebnissen
all valid results
Wenn die Urinprobe BTA enthält, bildet sich ein
Testlinie line (T) (T)
Visible Erkennbar in all bei positive allen samples
Komplex mit dem farbig markierten Antikörper.
positiven Proben
Fließt die Flüssigkeit über die Membran, wird
dieser Komplex von dem immobilisierten
Antikörper auf der Membran erfasst. Im T-Bereich
Sample Probenöffnung well (S) (S)
For
wird eine rote Linie angezeigt. Enthält die
Für the die Zugabe addition von of sample
Probenmaterial
Urinprobe kein BTA, kann der farbig markierte
Patienten- or sample oder Proben-ID
Antikörper keinen Komplex bilden. Es wird folglich
For Zu Identifikationszwecken
identification purposes
keine Testlinie im Testlinienbereich (T) angezeigt.
bioNexia® BTA
29

Zusätzlich beinhaltet der Test eine Kontrolllinie im Kontrollbereich (C), mit dem das Verfahren
überprüft werden kann. Diese Kontrolllinie wird unabhängig davon angezeigt, ob in der Probe
BTA enthalten ist. Der farbig markierte Antikörper wird direkt von einem immobilisierten
Reagenz (Ziege-anti-Maus IgG) im Kontrollbereich erfasst. Die Kontrolllinie wird bei jedem
gültig durchgeführten Test erkennbar und zeigt an, dass der Test korrekt durchgeführt wurde.
PACKUNGSINHALT (10 TESTS)
10 Testkassetten In einzeln versiegelten Beuteln mit einer Pinzette zur Probenentnahme
und einem Trockenmittel. Die Membran der Testkassette ist mit
monoklonalen Antikörpern aus Maus gegen verschiedene BTA-Epitope
beschichtet.
1 Kurzanleitung auf der Verpackung
1 Arbeitsanleitung
ZUSÄTZLICH ERFORDERLICHE MATERIALIEN
• Behälter für die Urinprobe
• Verwenden Sie keine Papier- oder Styroporbecher (Schaumpolystyrol).
• Stoppuhr
VORSICHTSMASSNAHMEN
• Ausschließlich für die in vitro-Diagnostik bestimmt.
• Nur für die Verwendung durch Fachkundige bestimmt.
• Dieser Kit enthält Produkte tierischen Ursprungs. Da durch die Kontrolle der Herkunft
und/oder des Gesundheitszustandes der Tiere nicht völlig gewährleistet werden
kann, dass diese Produkte keine übertragbaren pathogenen Erreger enthalten, ist
es empfehlenswert, die Produkte als potenziell infektiös zu betrachten und unter
Beachtung entsprechender Vorsichtsmaßnahmen zu behandeln.
• Die Reagenzien nach Ablauf des auf der Verpackung angegebenen Verfallsdatums nicht
mehr verwenden.
• Die Kassette muss bis zum Gebrauch mit dem Trockenmittel im versiegelten Beutel
gelagert werden.
• Die Kassette ist nur für den einmaligen Gebrauch bestimmt. Nicht wiederverwenden.
• Alle Proben müssen als potenziell infektiös betrachtet und unter Beachtung geeigneter
Vorsichtsmaßnahmen sachgemäß behandelt werden. Siehe „CLSI® M29-A, Protection of
Laboratory Workers from Instrument Biohazards and Infectious Disease Transmitted by
Blood, Body Fluids, and Tissue, Approved Guideline (CLSI® M29-A, Schutz von Laboranten
vor biologisch gefährlichen Instrumenten und infektiösen, über Blut, Körperflüssigkeiten
und Gewebe übertragenen Krankheiten, Zugelassene Richtlinie) – Aktuelle Revision“.
Weitere diesbezügliche Informationen finden Sie in „Biosafety in Microbiological and
Biomedical Laboratories, CDC/NIH (Biosicherheit in mikrobiologischen und biomedizinischen
Laboratorien – CDC/NIH) – Letzte Ausgabe“ oder in den jeweils gültigen Richtlinien.
• Verwenden Sie die Testkassette nicht, wenn die Schutzfolie beschädigt ist.
30
410591

FR
LAGERUNGSBEDINGUNGEN UND HALTBARKEIT
• Lagern Sie den Kit bei 2 bis 30°C.
• NICHT EINFRIEREN.
• Unter den empfohlenen Lagerungsbedingungen sind alle Kitbestandteile bis zu dem auf
der Verpackung angegebenen Verfallsdatum haltbar. Nach Ablauf des Verfallsdatums
nicht mehr verwenden.
• Die Testkassette muss bis zum Gebrauch im Originalbeutel aufbewahrt werden.
PROBENGEWINNUNG UND -VORBEREITUNG
1. Probe
Der Test wird mit humanem Urin oder mit Urin von einem katheterisierten Patienten
durchgeführt.
2. Vorbereitung
Es ist keine spezielle Aufbereitung der Urinproben erforderlich. Die Proben müssen
vor Durchführung des Tests auf Raumtemperatur gebracht werden. Nach längeren
Lagerungszeiten oder im Falle von aufgetauten Proben sollte der Urin vor dem Test sorgfältig
durchgemischt werden. Wenn der Urin auch für andere Untersuchungen verwendet werden
soll, entnehmen Sie zunächst eine Teilprobe von ungefähr 2 ml für den BTA-Test. So stellen
Sie sicher, dass die Urinprobe nicht kontaminiert ist.
3. Aufbewahrung
Urinproben können bei Raumtemperatur bis zu 4 Tage nach der Probenentnahme aufbewahrt
werden. Wenn die Urinprobe nicht sofort getestet wird, kann sie bis zu 8 Tage lang bei 2 bis 8 °C
aufbewahrt werden. Eine eingefrorene Urinprobe, die bei -19 °C bis -31 °C aufbewahrt wird, bleibt
24 Wochen (einschließlich max. 3 Gefrier-/Auftau-Zyklen) stabil.
Anmerkungen
• Bitte lesen Sie die folgenden Anmerkungen durch bevor Sie mit der Probenentnahme
beginnen.
• Verwenden Sie keine Papier- oder Styroporbecher (Schaumpolystyrol) zur Entnahme
von Urinproben.
• Verwenden Sie zur Vermeidung von Kreuzkontaminationen für jede Probe einen neuen
Behälter.
• Kennzeichnen Sie den Behälter mit dem Urin hinreichend, so dass die Probe eindeutig
zugeordnet werden kann.
• Zytologie-Proben, Serum, Plasma, Vollblut oder Blasenspülungen sind für den Test ungeeignet.
• Entnehmen Sie keine Urinprobe während der Menstruationsperiode der Patientin oder
während der beiden darauffolgenden Tage.
• Wurden dem Patienten intravesikale Mittel wie BCG (Bacillus Calmette-Guerin),
Mitomycin C, Thiotepa, Bropiramin (zu Forschungszwecken) oder Interferon (zu
Forschungswecken) verabreicht, sollte ein Test nur nach Absprache mit dem
behandelnden Arzt durchgeführt werden.
• Nach Operationen, Biopsien oder anderen invasiven Untersuchungen der Blase oder der
Harnwege sollte kein BTA-Test durchgeführt werden. Bitte lassen Sie nach derartigen
TR RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
bioNexia® BTA
31

Eingriffen ausreichend Zeit vergehen, damit eventuelle Traumata abklingen können.
Bitte lesen Sie hierzu auch den Abschnitt „Limitierungen“ bzw. „PERFORMANCE“.
TESTDURCHFÜHRUNG
1. Der versiegelte Beutel mit der Testkassette und die Patientenprobe sind vor der
Testdurchführung auf Raumtemperatur zu bringen. Öffnen Sie keine gekühlten Beutel,
um eine Kondensation von Luftfeuchtigkeit auf der Testmembran zu vermeiden.
2. Öffnen Sie den Beutel und entnehmen Sie die Testkassette und die Pipette. Entsorgen
Sie den Beutel mit dem Trockenmittel.
3. Schwenken Sie die Urinprobe des Patienten vorsichtig. Befüllen Sie die beigefügte
Pipette zur Probenentnahme mit der Urinprobe des Patienten. Halten Sie die Pipette
senkrecht über die Probenkammer (wie in der Kurzanleitung auf der Verpackung
dargestellt) und geben Sie drei volle Tropfen in die Probenkammer (S).
4. Starten Sie die Stoppuhr unmittelbar nach der Probenzugabe.
5. Lesen Sie nach Ablauf von 5 Minuten die Ergebnisse innerhalb von einer Minute ab. Das
Testergebnis ist ungültig, wenn es nach mehr als 6 Minuten abgelesen wird.
INTERPRETATION DER ERGEBNISSE
NEGATIVES Ergebnis
Eine rote Linie wird im Kontrolllinienbereich (C) erkennbar.
Keine offensichtliche rote Linie ist im Testlinienbereich (T) erkennbar.
POSITIVES Ergebnis
Zwei rote Linien sind deutlich erkennbar.
Eine Linie liegt im Kontrolllinienbereich (C), die andere Linie wird im Testlinienbereich (T)
erkennbar. Eine schwach rot gefärbte Testlinie (T) sollte als positives Ergebnis gewertet
werden.
UNGÜLTIGES Ergebnis
Die Kontrolllinie (C) wird nicht angezeigt. Wird keine rote Linie im Kontrollbereich (C)
erkennbar, so ist dies auf eine inkorrekte Durchführung der Testmigration zurückzuführen.
Das Testergebnis ist somit ungültig. Überprüfen Sie das Verfahren und wiederholen Sie
den Test mit einer neuen Testkassette. Falls das Problem bestehen bleibt, brechen Sie die
Verwendung des Testkits sofort ab und wenden Sie sich bitte an Ihre Vertretung vor Ort.
Read Nach at 5 Minuten 5 minutes ablesen but
not (jedoch later nicht than später 6 minutes.
Test als nach result 6 Minuten). is not valid if
read Testergebnis after 6 minutes ist ungültig,
wenn es nach 6 Minuten
abgelesen wird.
3 Tropfen Drops of Urin urine
Negative Positive Ungültig Invalid Ungültig Invalid
-
+
x
x
32
410591

FR
QUALITÄTSKONTROLLE
Der Test beinhaltet eine interne Verfahrenskontrolle und eine farbige Linie (C) zeigt an, dass
die Testmigration richtig durchgeführt wurde. Wird die Kontrolllinie nicht angezeigt, ist der
Test ungültig.
Es liegt in der Verantwortung des Anwenders, die Qualitätskontrolle in Übereinstimmung
mit den einschlägigen lokalen Vorschriften durchzuführen.
LIMITIERUNGEN
• Das Testergebnis sollte nicht als alleinige Grundlage für eine Diagnose dienen, sondern
vor dem Hintergrund weiterer klinischer Befunde und Untersuchungsdaten durch einen
Arzt bewertet und ggf. durch weitere diagnostische Verfahren bestätigt werden.
• Das Ergebnis sollte nicht als absoluter Beweis für das Vorliegen oder die Abwesenheit
eines Harnblasenkarzinoms gewertet werden. Erhöhte BTA-Konzentrationen wurden
auch bei Patienten mit gutartigen Erkrankungen wie Harnwegsinfekten, Nierensteinen,
Nephritis, Blasen- oder Harnwegstraumata nachgewiesen.
Außerdem können auch Nierenkarzinome und/oder Urothelkarzinome der oberen
Harnwege zu erhöhten BTA-Werten im Urin führen.
• Die klinische Sensitivität des BTA-Tests ist vom Stadium des Blasenkarzinoms abhängig.
Bitte lesen Sie hierzu auch den Abschnitt „PERFORMANCE“.
• Die Auswirkungen einer Strahlentherapie oder systemischen Chemotherapie sowie einer
Einnahme experimenteller Medikamente auf die BTA-Testergebnisse sind nicht bekannt.
• Einige gutartige Krankheiten wie z. B. Nierensteine, Nephritis, Harnwegsinfekte
sowie einige Geschlechtskrankheiten können zu einer erhöhten Anzahl positiver
Testergebnisse führen.
• Nierenkrebs oder ein Urothelkarzinom der oberen Harnwege können auch Auslöser für
erhöhte BTA-Werte sein.
PERFORMANCE
Klinische Performance
Spezifität
Um die klinische Spezifität des BioNexia® BTA-Kassettentests zu untersuchen, wurden
555 Urinproben von Patienten ohne Blasenkarzinom mit dem Test untersucht. Das
durchschnittliche Lebensalter der Patienten lag bei 55 Jahren und 48 % von ihnen waren
männlich. Neben 167 gesunden Personen wurden 388 Patienten mit unterschiedlichen
Krankheitsbildern untersucht. Diese wurden in verschiedene Gruppen zusammengefasst.
Die Ergebnisse der Untersuchung sind in der nachfolgenden Tabelle zusammengefasst.
Patientengruppe
bioNexia® BTA
Merkmale oder
Krankheitsbilder
Anzahl Klinische Spezifität in %
(95 % Vertrauensbereich)
Gesunde Personen 167 95
(90 – 98)
Nicht-urogenitale Krankheiten und Krebsformen
Nicht-urogenitale
Krankheiten
Nicht-urogenitale
Krebsformen
Diabetes, Arthritis, Lupus,
andere collagendegenerative
Krankheiten
Brust-, Lungen-, Magen,
Darm-Karzinome, Leukämie,
Lymphome
52 98
(89 – 100)
53 89
(77 – 95)
TR RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
33

Nicht-urogenitale
Krankheitsbilder
gesamt
Gutartige Urogenitalerkrankungen
105 93
(87 – 97)
Gutartige
Nierenerkrankungen
Verschiedene Urogenitalerkrankungen
Urogenitale
Erkrankungen gesamt
Gutartige
Prostatahyperplasie
Nierenerkrankungen
Nierensteine, Nephritis
u. a.
Prostatitis, Urethritis,
Harnwegsinfekte,
Inkontinenz,
Geschlechtskrankheiten
26 88
(71 – 98)
32 50
(32 – 68)
94 76
(65 – 84)
152 72
(65 – 79)
Urogenitale Krebsformen
Prostatakarzinom 45 78
(63 – 89)
Nierenkrebs 7 29
(4 – 71)
Andere Krebsarten Endometrial, Ovarial und
andere Krebsformen
25 76
(55 – 91)
Urogenitale
Krebsformen gesamt
77 73
(61 – 82)
Urogenitales Trauma 54 33
(21 – 47)
Bei 107 Patienten mit einer Vorgeschichte von Blasenkrebs, die zum Zeitpunkt der Tests
keine Symptome der Erkrankung aufwiesen, lag die Spezifität des bioNexia® BTA-Tests bei
70 % (95 % Vertrauensbereich: 60 – 79).
Sensitivität
Für die Ermittlung der klinischen Sensitivität des BioNexia® BTA-Tests wurden 220
Urinproben von Patienten untersucht, bei denen ein Blasentumor durch Biopsie bestätigt
worden war. Das durchschnittliche Lebensalter der Patienten lag bei 68 Jahren und 79 %
von ihnen waren männlich. Stadium und Differenzierungsgrad des Tumors sowie seine
Erfassung durch den BTA-Test sind in der nachfolgenden Tabelle aufgeführt. Den Proben
3 (a) bzw. 12 (b) konnte kein Stadium bzw. Grad zugeordnet werden.
Sensitivität des BTA-Tests nach Stadium und Grad des Tumors
Stadium des Tumors (a) Probenanzahl Klinische Sensitivität in %
(95 % Vertrauensbereich)
Ta 111 51 (42 – 61)
Tis 18 61 (36 – 83)
T1 38 89 (75 – 97)
34
410591

FR
T2-T4 50 88 (76 – 95)
Grad des Tumors (b) Probenanzahl Klinische Sensitivität in %
(95 % Vertrauensbereich)
1 57 42 (29 – 56)
2 56 66 (52 – 78)
3 95 83 (73 – 89)
131 der 220 Urinproben wurden parallel dazu mithilfe urinzytologischer Methoden
(Miktionsurinzytologie, MUZ) untersucht. Die klinische Sensitivität beider Methoden und/
oder die Sensitivität einer Kombination beider Methoden sind in der nachfolgenden Tabelle
zusammengefasst.
Sensitivität des BTA-Tests nach Stadium des Tumors
Klinische Sensitivität in %
(95 % Vertrauensbereich)
Stadium des
Tumors
Probenanzahl BTA-Test Miktionsurinzytologie
(MUZ)
BTA-Test + MUZ
TR RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
Ta 73 45 (34 – 57) 7 (2 – 15) 49 (37 – 61)
Tis 15 53 (27 – 79) 60 (32 – 84) 80 (52 – 96)
T1 27 85 (66 – 96) 41 (22 – 61) 85 (66 – 96)
T2-T4 16 75 (48 – 93) 38 (15 – 65) 81 (54 – 96)
Aus den Daten geht hervor, dass der BTA-Test insbesondere bei Tumoren im Anfangsstadium
deutlich sensitiver ist als die Miktionsurinzytologie. Tis (Tumor in situ)-Tumore werden
geringfügig schlechter erfasst.
Analytische Performance
Messbereich des bioNexia® BTA-Tests
Die untere Nachweisgrenze des Tests liegt bei ungefähr 22,4 U/ml. Bis zu einer Konzentration
von 12.400 U/ml ist kein Prozoneneffekt (High Dose Hook Effect) zu beobachten. Höhere
Konzentrationen traten bei den untersuchten Proben nicht auf.
Wiederholbarkeit
Vier Proben mit unterschiedlich hohen Antigen-Konzentrationen (2 U/ml, 32 U/ml, 67 U/ml,
292 U/ml) wurden fünfzig Mal am selben Tag getestet (10 Tests x 5 Wiederholungen).
Die Reproduzierbarkeit des Tests wurde an zwei Standorten evaluiert. Die Übereinstimmung
(Konsistenz) zwischen den beobachteten Testergebnissen und den aufgrund der jeweiligen
Konzentration des Antigens zu erwartenden Ergebnissen betrug an beiden Standorten 100 %.
Reproduzierbarkeit
Der Genauigkeitsgrad von Test zu Test und von Charge zu Charge wurde an einem Standort
evaluiert. Vier Proben mit unterschiedlich hohen Antigen-Konzentrationen wurden über
bioNexia® BTA
35

einen Zeitraum von insgesamt fünf aufeinander folgenden Tagen jeden Tag zehn Mal mit
zwei Chargen getestet.
Die Übereinstimmung (Konsistenz) zwischen dem beobachteten Testergebnis und dem
aufgrund der jeweiligen Konzentration des Antigens zu erwartenden Ergebnis wird in der
untenstehenden Tabelle aufgeführt. Die Übereinstimmung wurde mithilfe des Ergebnisses
von mindestens 2 der 3 Anwender bestimmt.
Probe Charge Anzahl der
konsistenten
Ergebnisse
Prozentsatz
der
konsistenten
Ergebnisse
Analytische
Reproduzierbarkeit in %
(95 % Vertrauensgrenze)
Probe
(2 U/ml)
Probe
(32 U/ml)
Probe
(67 U/ml)
Probe
(292 U/ml)
Dev3 50 100 92,9 – 100,0
Dev4 50 100 92,9 – 100,0
Dev3 50 100 92,9 – 100,0
Dev4 50 100 92,9 – 100,0
Dev3 50 100 92,9 – 100,0
Dev4 50 100 92,9 – 100,0
Dev3 50 100 92,9 – 100,0
Dev4 50 100 92,9 – 100,0
Es bestand eine 100 %ige Konsistenz zwischen den Tests.
STÖRSUBSTANZEN
Einfluss endogener und exogener Substanzen
BTA-positive und negative Urinpools wurden mit den in der Tabelle aufgeführten Substanzen
versetzt, um zu überprüfen, ob es zu Interferenzen mit dem Testergebnis kommt.
Bei den folgenden Konzentrationen wurde kein Einfluss auf das Testergebnis festgestellt.
Substanz
Mögliche Urinbestandteile (endogene Substanzen)
Hämoglobin
Leukozyten
Erythrozyten
Albumin
Bilirubin (nicht konjugiert) a
IgG
Konzentration
1 mg/ml
106 Zellen/ml
106 Zellen/ml
10 mg/ml
4 μg/ml
100 μg/ml
36
410591

FR
Natriumchlorid a
Harnsäure
Ascorbinsäure
Therapeutische Wirkstoffe
Ampicillin
Doxorubicin-HCl
Mitomycin C
Nitrofurantoin
Phenazopyridin-HCl a
Thiotepa
Trimethoprim
Bacillus Calmette Guerin
Finasterid
Flutamid
3,65mg/ml
2,5 mg/ml
50 mg/ml
6 mg/ml
100 μg/ml
100 μg/ml
500 μg/ml
800 μg/ml
100 μg/ml
500 μg/ml
200 μg/ml
25 μg/ml
1 mg/ml
Ioversol,
74 % (bildgebendes Kontrastmittel) a 1%
Urised b
175 μg/ml
a: Bei höheren Konzentrationen kann die Intensität der Testergebnislinie abgeschwächt werden.
b: Aufgrund der Eigenfärbung wird das Ablesen der Linien bei höheren Konzentrationen behindert.
BESEITIGUNG DER ABFÄLLE
Entsorgen Sie alle gebrauchten und nicht gebrauchten Reagenzien sowie kontaminierte
Einwegmaterialien gemäß den für infektiöse oder potenziell infektiöse Materialien
geltenden Bestimmungen.
Es liegt in der Verantwortung jedes Labors, die entstandenen Fest- und Flüssigabfälle gemäß
der jeweiligen Risikogruppe zu behandeln und deren Entsorgung in Übereinstimmung mit
den gültigen gesetzlichen Bestimmungen sicherzustellen.
TR RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
LITERATUR
1. Robert Koch Institut : Cancer in Germany. 2005/2006. Incidence and Trends. 7th ed. 2010.
p.84-87 HYPERLINK “http://www.rki.de/cln_160/nn_1219822/EN/Content/Health__Reporting/
GBEDownloadsB/KID2010,templateId=raw,property=publicationFile.pdf/KID2010.pdf” http://
www.rki.de/cln_160/nn_1219822/EN/Content/Health__Reporting/GBEDownloadsB/KID2010,
templateId=raw,property=publicationFile.pdf/KID2010.pdf (Accessed Dec 2010)
2. Umiker W.: Accuracy of Cytologic Diagnosis of Cancer of the Urinary Tract. Symposium on
Diagnostic Accuracy of Cytologic Technics 8:186-193,1964.
3. Badalament R.A., Hermansen D.K., et al : The Sensitivity of Bladder Wash Flow Cytometry,
Bladder Wash Cytology, and Voided Cytology in the Detection of Bladder Carcinoma. Cancer
60:1423-1427, 1987.
bioNexia® BTA
37

4. Grossmann H.B.: Markers for Bladder Cancer.
5. Kinders R., Jones T., et al: Complement Factor H or a Related Protein Is a Marker for Transitional
Cell Carcinoma of the Bladder. Clinical Cancer Research 4:2511-2520, 1998.
6. Corey M., Kinders R., et al: Factor H Related Proteins Are Upregulated In Bladder Cancer.
Proceedings of the American Association for Cancer Research 39: 263, 1998.
7. Austyn J. M., Wood K. J.: Principles of Cellular and Molecular Immunology. Oxford University
Press p. 522-554, 1993.
8. Corey M.J., Kinders R.J., et al: Enhancement of Complement-Mediated Lysis of Cancer Cells By
Anti-Factor H Antibodies. Proceedings of the American Association for Cancer Research 39: 304,
1998.
9. Sarosdy M.F., Hudson M.A., et al: Improved Detection of Recurrent Bladder Cancer Using the
Bard BTA stat Test. Urology 50(3):349 - 353,1997.
10. Raitanen M.-P., Marttila T., et al: The Bard BTA stat Test in Monitoring of Bladder Cancer. The
Journal of Urology 157: 28, 1997.
SYMBOLE
Symbol Bedeutung Symbol Bedeutung
Bestellnummer
In-vitro-
Diagnostikum
Hersteller
Temperaturbegrenzung
Verwendbar bis
Chargenbezeichnung
Gebrauchsanweisung
beachten
Nicht zur Wiederverwendung
Vor Sonnenlicht schützen
Inhalt ausreichend für
Prüfungen
38
410591

FR
BIOMERIEUX, das blaue Logo, bioNexia sind aktuell genutzte, angemeldete
und/oder eingetragene Marken von bioMérieux SA oder einer ihrer
Tochtergesellschaften.
CLSI ist eine Marke von Clinical Laboratory and Standards Institute, Inc.
Alle anderen Namen oder Marken sind Eigentum ihrer jeweiligen Inhaber.
RU
EN
PT
PL
CS
IT
ES
DE
bioMérieux SA
69280 Marcy-l‘Etoile-France
Tel: 33 (0) 478 87 20 00
Fax: 33 (0) 478 87 20 90
www.biomerieux.com/bionexia
RCS LYON 673 620 399
SV
16359 A - 2010/12
TR
bioNexia® BTA
39

40
410591

DE
TR RU PL CS SV PT
IT
ES
EN
FR
USO PREVISTO
bioNexia® BTA es una prueba rápida para la detección cualitativa del antígeno asociado con
tumores vesicales (BTA) en muestras de orina humana. La prueba está indicada para uso
como ayuda en la detección sistemática de poblaciones de alto riesgo y en la monitorización
de pacientes con cáncer vesical. La prueba está concebida exclusivamente para uso
diagnóstico profesional in vitro.
RESUMEN Y EXPLICACIÓN
Incidencia
Los carcinomas vesicales urinarios representan aproximadamente el 2 – 3% de todos los tumores
malignos en los seres humanos. Después del carcinoma prostático, el carcinoma vesical es el
segundo en incidencia de todas las enfermedades tumorales del sistema genitourinario.
Etiología
Entre los factores que aumentan el riesgo del carcinoma vesical urinario son el hábito
de fumar, la cistitis crónica, la exposición a aminas aromáticas en el lugar de trabajo (por
ejemplo, peluqueros, industria de productos químicos, cuero y pintura, control de plagas,
y otros) (1), la radioterapia de la pelvis menor, la esquistosomiasis, la nefropatía balcánica,
la nefritis intersticial crónica, así como la aplicación a largo plazo de ciertos medicamentos
(clornafazina, fenacetina, ciclofosfamida), algunos de los cuales se han retirado del mercado.
Síntomas clínicos
La micro o macro hematuria ocurren en aproximadamente el 80% de los pacientes, si bien la
detección de ambas formas con frecuencia ocurre sólo de manera intermitente. Otros síntomas
frecuentes que indican un carcinoma vesical urinario son las dificultades en la micción
(disuria), particularmente en casos en donde no se logra mejora alguna con antibióticos. En
estadios avanzados, pueden ocurrir dolor y retención urinaria, y los problemas concomitantes.
Estadios y grado de diferenciación
Por lo general, se hace una diferenciación entre tumores superficiales e infiltrantes.
Los diferentes estadios se resumen en la tabla que aparece a continuación; son posibles
ulteriores subclasificaciones en a y b (no se muestran). Cuando se hace un diagnóstico,
aproximadamente el 75 – 85% de los pacientes presenta un carcinoma vesical urinario no
invasivo (TCC = carcinoma celular de transición). Estos pacientes presentan un riesgo de
recaída del 75%, por lo cual deben monitorizarse regularmente en caso que se produzcan
nuevos ataques de la enfermedad en los exámenes de seguimiento.
bioNexia® BTA
41

Estadio
Tx
Tumor primario, no valorable
T0
No hay indicación de tumor primario
Ta
Carcinoma no invasivo de la mucosa
Tis
Carcinoma in situ: “tumor superficial”
T1
El tumor está infiltrando el tejido conectivo subepitelial
T2
El tumor está infiltrando los músculos
T3
El tumor está infiltrando el tejido perivesical
T4
El tumor está infiltrando uno de los órganos siguientes: próstata, útero,
vagina, pared pélvica, pared abdominal.
Otra clasificación importante para el pronóstico es el grado de diferenciación:
Grado de diferenciación
G1
Bien diferenciado
G2
Moderadamente diferenciado
G3
Mal diferenciado
G4
Carcinoma anaplásico
Diagnóstico
Los dos procedimientos utilizados con mayor frecuencia para detectar un carcinoma vesical
son la citología urinaria y la cistoscopia. En la citología urinaria, se analizan sedimentos de
orina en busca de células cancerígenas. Desafortunadamente, el número total de células con
frecuencia es comparativamente bajo. Además, las condiciones del medio interno en la orina
atacan las células. Como consecuencia, es posible que queden enmascaradas importantes
características de diagnóstico. Con frecuencia, no hay procedimientos estándar para tomar y
almacenar muestras. Los procedimientos de micción vesical controlada parecen producir los
mejores resultados (2). Sin embargo, una limitación importante de este procedimiento de
diagnóstico es que la sensibilidad clínica está sujeta a considerables fluctuaciones y que con
frecuencia no se presta atención a los tumores en los estadios tempranos (2,3).
Debido a su sensibilidad clínica y especificidad, la cistoscopia se considera como un
procedimiento de diagnóstico estándar (además de la biopsia). La desventaja de esta
intervención invasiva es que es agotador para el paciente y que sólo se identifican tumores
visibles. Basándose en las desventajas de los procedimientos de diagnóstico arriba mencionados,
se hizo una búsqueda intensiva de marcadores de tumores que pudieran resultan de utilidad
para diagnosticar un carcinoma vesical urinario (4). Con el antígeno asociado a tumores vesicales
(BTA), se descubrió una proteína que suele aparecer con mayor frecuencia en pacientes que
42
410591

FR
TR RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
padecían de carcinoma vesical. Fue aislada de varias estirpes celulares de carcinoma vesical,
pero no de células epiteliales normales. Bioquímicamente, el antígeno BTA es una proteína que
está estrechamente relacionada con el factor H del complemento humano (proteína asociada al
factor H del complemento humano) (5,6). Ambas proteínas son detectadas por los anticuerpos
monoclonales de la prueba. La biotina complementaria humana desempeña un importante rol
inhibitorio en la formación del complejo de ataque a la membrana, la cascada complementaria
(7), que es responsable de la lisis de las células degeneradas. Podría demostrarse in vitro que
el BTA también inhibe la formación del complejo de ataque a la membrana. Fue posible
detener la inhibición al añadir anticuerpos monoclonales anti-hCFHrp (8). Es concebible
que las células cancerígenas se escapen del sistema de defensa del cuerpo de esta manera.
El casete de prueba bioNexia® BTA permite la detección del BTA en orina por medio de una
reacción específica antígeno-anticuerpo. Este enfoque no invasivo se caracteriza por una
sensibilidad clínica considerablemente más alta que la citología urinaria, particularmente
en el caso de carcinomas en estadios tempranos.
En casos no resueltos de micro y macro hematuria, una combinación de ambos métodos
puede incrementar el porcentaje de detección. En la monitorización de pacientes con
tumores vesicales, la prueba además admite la valoración del riesgo de recaídas y puede
ayudar a reducir citoscopias o biopsias innecesarias.
La utilidad del BTA como marcador tumoral ha sido confirmado en varios estudios (9,10). La
prueba se realiza simplemente con la orina del paciente y permite una evaluación visual del
resultado al cabo de unos pocos minutos.
PRINCIPIO
La prueba bioNexia® BTA es un ensayo inmuno cromatográfico cualitativo para la detección
del antígeno asociado con tumores vesicales (BTA) en orina humana.
La prueba se basa en dos anticuerpos monoclonales específicos dirigidos contra diferentes
epítopos del BTA. La membrana se recubre previamente con un anticuerpo monoclonal en
la región de la línea de análisis (T) (tal como se
muestra en la figura de la derecha). El segundo
anticuerpo está marcado con colores.
Cuando la muestra de orina contiene BTA, formará
un complejo con el anticuerpo marcado con colores.
Línea de control (C)
Cuando el fluido se desplaza sobre la membrana,
Visible Control en line todos (C) los
este complejo será capturado por el anticuerpo
resultados Visible in all válidos valid results
inmovilizado en la membrana, y aparecerá una línea
Línea Test line de (T) análisis (T)
Visible in en all todas positive las samples
roja en la región T. Si la muestra urinaria no contiene
muestras positivas
ningún BTA, el anticuerpo marcado con colores no
podrá formar un complejo y no se generará ninguna
línea de análisis en la región de la línea de análisis (T).
Pocillo de la muestra (S)
Además, la prueba incorpora una línea de
Para la adición de material
de muestra
control del procedimiento, en la región de
ID de paciente o muestra
control (C). Se generará esta línea de control
Para propósitos de
identificación
independientemente de la presencia del BTA.
bioNexia® BTA
43

El anticuerpo marcado con colores es capturado directamente por un reactivo (IgG antiratón
de cabra) inmovilizado en la región de control. La línea de control aparecerá en cada
prueba válida, indicando que la migración de la prueba se ha realizado correctamente.
CONTENIDO DEL KIT (10 PRUEBAS)
10 casetes de
prueba
En bolsas selladas individuales, con una pipeta desechable para
muestras y un desecante. La membrana del casete de la prueba está
recubierta con anticuerpos monoclonales de ratón dirigidos contra
diferentes epítopos del BTA.
1 guía rápida para el usuario, impresa en la caja
1 ficha técnica
MATERIALES NECESARIOS PERO NO SUMINISTRADOS
• Recipiente para muestras de orina
• No utilice papel ni recipientes de espuma de poliestireno.
• Cronómetro
ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES
• Sólo para uso diagnóstico in vitro.
• Sólo para uso profesional.
• Este kit contiene productos de origen animal. La certificación del origen o estado sanitario
de los animales no garantiza totalmente la ausencia de agentes patógenos transmisibles.
Por lo tanto, se recomienda tratar a estos productos como potencialmente infecciosos, y
manipularlos observando las precauciones de seguridad habituales.
• No utilice los reactivos después de la fecha de caducidad indicada en el envase.
• El dispositivo de prueba debe almacenarse en la bolsa sellada que contiene el desecante,
hasta el momento de usarlo.
• El dispositivo de prueba es desechable; no debe volver a utilizarse.
• Todas las muestras deben considerarse como infecciosas y manipularse siguiendo las
precauciones recomendadas (CLSI® M29-A, Protection of Laboratory Workers from
Instrument Biohazards and Infectious Disease Transmitted by Blood, Body Fluids, and
Tissue; Approved Guideline [Protección del personal de laboratorio de los riesgos
biológicos del instrumento y de enfermedades infecciosas transmitidas por la sangre, los
líquidos corporales y los tejidos] – Revisión actual). Para información adicional sobre las
precauciones de manipulación, consulte con “Biosafety in Microbiological and Biomedical
Laboratories [Seguridad biológica en los laboratorios de microbiología y biomedicina]–
CDC/NIH – Última edición”, o las normativas actuales en el país de utilización.
• No utilice la prueba si la envoltura de papel metalizado está dañada.
CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD
• Almacene el kit a 2 – 30 °C.
• NO LO CONGELE.
44
410591

TR
FR
• Si se almacena de acuerdo con las condiciones recomendadas, todos los componentes
son estables hasta la fecha de caducidad indicada en el envase. No lo utilice después de
la fecha de caducidad.
• El dispositivo de la prueba debe permanecer en la bolsa hasta el momento de utilización.
RECOGIDA Y PREPARACIÓN DE MUESTRAS
1. Muestra
La prueba se realiza con orina humana o con orina tomada de un paciente cateterizado.
2. Preparación
No se requiere una preparación especial de las muestras de orina. Las muestras deben
alcanzar la temperatura ambiente antes de realizar la prueba. Después de períodos
prolongados de almacenamiento o en caso de muestras descongeladas, la orina deberá
mezclarse muy bien antes de analizarla. Cuando la orina debe utilizarse también para otros
exámenes, recoja primero una alícuota de aproximadamente 2 ml para la prueba del BTA,
con el fin de asegurarse de que la muestra de orina no esté contaminada.
3. Conservación
Las muestras de orina pueden almacenarse a temperatura ambiente durante como máximo
4 días después de su recogida. Si la muestra de orina no se analiza inmediatamente, deberá
refrigerarse a 2 – 8 °C como máximo 8 días. Una muestra de orina congelada almacenada a
temperaturas entre -19 °C y -31 °C es estable durante 24 semanas, incluso hasta 3 ciclos de
congelamiento/descongelamiento.
Notas
• Lea las notas siguientes antes de recoger una muestra.
• No utilice papel ni recipientes de espuma de poliestireno para recoger una muestra de
orina.
• Utilice un recipiente nuevo para cada muestra, a fin de evitar las contaminaciones
cruzadas.
• Marque adecuadamente el recipiente de orina para asegurar una correcta identificación
de la muestra.
• Las muestras de citología, suero, plasma, sangre total o lavados vesicales no son
adecuadas para la prueba.
• No recoja la orina durante el período menstrual ni dentro de los dos días subsiguientes.
• Si se han administrado medicamentos intravesicales, tal como BCG (bacilo Calmette-
Guerin), mitomicina C, tiotepa, bropiramina (para propósitos de investigación) o interferón
(para propósitos de investigación), se deberá realizar un análisis siguiendo el criterio del
médico.
• Las pruebas del BTA no deben realizarse después de una cirugía, biopsia ni ningún otro
examen invasivo de la vejiga o de las vías urinarias. Deje pasar tiempo suficiente después
de tales intervenciones para permitir la recuperación del traumatismo. Lea también las
secciones “Límites del método” o “RENDIMIENTO”.
RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
bioNexia® BTA
45

INSTRUCCIONES DE USO
1. La bolsa sellada que contiene los casetes de prueba y la muestra del paciente deben
alcanzar la temperatura ambiente antes de realizar la prueba. No abra la bolsa refrigerada,
para evitar la condensación de la humedad atmosférica en la membrana de prueba.
2. Abra la bolsa, retire el casete de prueba y la pipeta. Elimine la bolsa desecante.
3. Gire suavemente la muestra de orina del paciente. Llene la pipeta de muestras provista
con la muestra de orina del paciente y sujétela en posición vertical encima del pocillo de
la muestra (tal como se muestra en la guía rápida que aparece en la caja) y coloque tres
gotas completas en el pocillo para muestras (S).
4. Inicie el cronómetro inmediatamente después de añadir la muestra.
5. Cuando el cronómetro llegue a los 5 minutos, lea los resultados dentro de un plazo de
1 minuto. El resultado de la prueba no es válida si se lee después de más de 6 minutos.
INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
Resultado NEGATIVO
Aparece una línea roja en la región de la línea de control (C).
No aparece una línea roja clara en la región de la línea de análisis (T).
Resultado POSITIVO
Aparecen dos líneas rojas definidas.
Aparece una línea en la región de la línea de control (C) y otra línea en la región de la línea de
análisis (T). Una línea de análisis roja tenue (T) debe considerarse como un resultado positivo.
Resultado NO VÁLIDO
No aparece la línea de control (C). Si no aparece una línea roja en la región de control
(C), esto significa que la migración de la prueba no se ha realizado correctamente y que el
resultado de la prueba no es válido. Revise el procedimiento y repita la prueba con un nuevo
casete de prueba. Si el problema continúa, interrumpa el uso del equipo de inmediato y
comuníquese con su distribuidor local.
Read Lea a at los 55 minutes minutos but
not pero later no después than 6 minutes. de los
Test 6 minutos. result is El not resultado valid if
read de la after prueba 6 minutes no válido
si se lee después de los
6 minutos.
3 Drops gotas de of urine orina
Negativo
Negative Positive Positivo No Invalid válido No Invalid
válido
-
+
x
x
CONTROL DE CALIDAD
La prueba incluye un control interno del procedimiento y una línea de control de color (C)
indica que la migración de la prueba se ha realizado correctamente. Si no aparece la línea de
control, la prueba no es válida.
46
410591

RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
TR
FR
Es responsabilidad del usuario realizar el control de calidad de acuerdo con cualquier
normativa aplicable local.
LIMITACIONES DEL MÉTODO
• El resultado de la prueba no debe ser la única base para el diagnóstico sino que debe ser
evaluado por un médico frente a otros datos clínicos y datos de examen, y confirmado
mediante procedimientos adicionales de diagnóstico, en caso de ser necesario.
• El resultado no debe interpretarse como evidencia absoluta de la presencia o ausencia
de carcinoma vesical urinario. También se han detectado concentraciones elevadas
del BTA en pacientes con enfermedades benignas tales como infecciones de las vías
urinarias, cálculo renal, nefritis o traumatismo de la vejiga o de las vías urinarias.
Además, los carcinomas de los riñones o TCC (carcinoma celular de transición) de las vías
urinarias superiores también pueden causar un aumento de los niveles de BTA en la orina.
• La sensibilidad clínica de la prueba del BTA depende del estadio del carcinoma vesical.
Lea también la sección “RENDIMIENTO”.
• No se conocen los efectos de la radioterapia o de la quimioterapia sistémica en el resultado
de la prueba del BTA, ni tampoco de la influencia de medicamentos experimentales.
• Algunas enfermedades benignas, tales como cálculos renales, nefritis, infecciones de
las vías urinarias o algunas enfermedades venéreas, pueden aumentar el número de
resultados positivos de la prueba.
• El cáncer de riñones o un carcinoma del urotelio de las vías urinarias superiores también
pueden causar un aumento de los niveles de BTA.
RENDIMIENTO
Rendimiento clínico
Especificidad
Se analizaron 555 muestras de orina de pacientes sin carcinoma vesical para verificar
la especificidad clínica del casete de la prueba bioNexia® BTA. La edad promedio de
los pacientes fue de 55 años, siendo el 48% hombres. Además de 167 sujetos sanos, se
examinaron 388 pacientes con diversos cuadros clínicos. Los mismos fueron agrupados en
diversas categorías. Los resultados de este estudio se resumen en la tabla siguiente.
Grupo de pacientes
Características o imágenes
clínicas
Recuento Especificidad clínica en %
(intervalo de confianza del 95%)
Sujetos sanos 167 95
(90 – 98)
Enfermedades y formas de cáncer no genitourinarias
Enfermedades no
genitourinarias
Formas de cáncer no
genitourinarias
Imágenes clínicas
no genitourinarias
en total
Diabetes, artritis, lupus,
otras enfermedades
degenerativas del colágeno
Carcinomas de mamas,
pulmones, estómago,
intestinos, leucemia,
linfomas
52 98
(89 – 100)
53 89
(77 – 95)
105 93
(87 – 97)
bioNexia® BTA
47

Enfermedades genitourinarias benignas
Hiperplasia prostática
benigna
Enfermedades renales Enfermedades renales
benignas
cálculos renales, nefritis
y otras
Diversas
enfermedades
genitourinarias
Enfermedades genitourinarias
totales
Prostatitis, uretritis,
infecciones de las vías
urinarias, incontinencia,
enfermedad venérea
26 88
(71 – 98)
32 50
(32 – 68)
94 76
(65 – 84)
152 72
(65 – 79)
Formas de cáncer genitourinarias
Carcinoma prostático 45 78
(63 – 89)
Cáncer del riñón 7 29
(4 – 71)
Otros tipos de cáncer Carcinoma endometrial,
ovárico y de otro tipo
25 76
(55 – 91)
Formas genitourinarias
de cáncer en total
77 73
(61 – 82)
Traumatismo genitourinario
54 33
(21 – 47)
La especificidad de la prueba bioNexia® BTA en 107 pacientes con un historial de cáncer
vesical y sin evidencia de la enfermedad fue del 70% (95% CI: 60 – 79).
Sensibilidad
La sensibilidad clínica de la prueba bioNexia® BTA fue determinada utilizando 220 muestras
de orina de pacientes con un tumor vesical confirmado por medio de biopsia. La edad
promedio de los pacientes fue de 68 años, siendo el 79% hombres. El estadio y grado
del tumor, así como su detección por medio de la prueba BTA, se presentan en la tabla
siguiente. No fue posible determinar el estadio o grado histológico para las muestras 3 (a) y
12 (b) respectivamente.
Sensibilidad de la prueba del BTA por estadio y grado del tumor
Estadio del tumor (a) Número de muestras Sensibilidad clínica en %
(intervalo de confianza del 95%)
Ta 111 51 (42 – 61)
Tis 18 61 (36 – 83)
T1 38 89 (75 – 97)
T2-T4 50 88 (76 - 95)
48
410591

TR
FR
Grado del tumor (b) Número de muestras Sensibilidad clínica en %
(intervalo de confianza del 95%)
1 57 42 (29 – 56)
2 56 66 (52 – 78)
3 95 83 (73 – 89)
131 de las 220 muestras de orina fueron examinadas simultáneamente utilizando métodos
citológicos en orina (citología urinaria). La sensibilidad clínica de los dos métodos o la
sensibilidad de ambos métodos combinados se resumen en la tabla siguiente.
Sensibilidad de la prueba del BTA por estadio del tumor
Sensibilidad clínica en %
(intervalo de confianza del 95%)
Estadio del
tumor
Número de
muestras
RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
Prueba BTA
Citología urinaria
(VUC)
Prueba BTA + VUC
Ta 73 45 (34 – 57) 7 (2 – 15) 49 (37 – 61)
Tis 15 53 (27 – 79) 60 (32 – 84) 80 (52 – 96)
T1 27 85 (66 – 96) 41 (22 – 61) 85 (66 – 96)
T2-T4 16 75 (48 – 93) 38 (15 – 65) 81 (54 – 96)
Los datos muestran que, particularmente en los primeros estadios del tumor, la prueba del
BTA tiene una sensibilidad netamente superior que la citología urinaria. La detección de
tumores “Tis” (tumor in situ) es ligeramente menor.
Rendimiento analítico
Rango de medida de la prueba bioNexia® BTA
El límite menor de detección de la prueba es de aproximadamente 22,4 U/ml. En
concentraciones de hasta 12.400 U/ml, no se observa reacción de prozona (efecto Hook de
dosis alta). No aparecieron concentraciones superiores en las muestras analizadas.
Repetibilidad
Se analizaron cuatro muestras con diferentes niveles de antígeno añadido (2 U/ml, 32 U/ml,
67 U/ml, 292 U/ml) cincuenta veces (10 pruebas x 5 réplicas) el mismo día.
La repetibilidad del ensayo fue evaluada en dos centros. La concordancia (coherencia) entre
el resultado observado de la prueba y el resultado esperado, basado en la concentración
conocida del antígeno, fue del 100% en ambos centros.
Reproducibilidad
En un centro, se evaluó la precisión entre ensayos y de lote a lote. Se analizaron cuatro
muestras con diferentes niveles de antígeno añadido diez veces cada día por un total de
cinco días sucesivos con dos lotes.
bioNexia® BTA
49

La concordancia (coherencia) entre el resultado observado de la prueba y el resultado
esperado, basándose en la concentración conocida del antígeno, se detalla en la tabla
siguiente. Se determinó el consenso por el resultado obtenido en al menos 2 de los 3 lectores.
Muestra Lote Número de
Resultados
coherentes
Porcentaje
de resultados
coherentes
% de reproducibilidad
analítica (límite de confianza
del 95%)
Muestra
(2 U/ml)
Muestra
(32 U/ml)
Muestra
(67 U/ml)
Muestra
(292 U/ml)
Dev3 50 100 92,9 – 100,0
Dev4 50 100 92,9 – 100,0
Dev3 50 100 92,9 – 100,0
Dev4 50 100 92,9 – 100,0
Dev3 50 100 92,9 – 100,0
Dev4 50 100 92,9 – 100,0
Dev3 50 100 92,9 – 100,0
Dev4 50 100 92,9 – 100,0
Hubo una coherencia del 100% entre ensayos.
SUSTANCIAS INTERFERENTES
Impacto de sustancias endógenas y exógenas
Para determinar si ocurrió alguna interferencia en la prueba, un grupo de orinas BTA
negativas y positivas se mezcló con las sustancias enumeradas en la tabla siguiente.
El resultado de la prueba no se vio afectado por las concentraciones siguientes.
Sustancia
Concentración
Posibles componentes de la orina (sustancias endógenas)
Hemoglobina
1 mg/ml
Leucocitos
Eritrocitos
Albúmina
Bilirrubina (no conjugada) a
IgG
Cloruro sódico a
Ácido úrico
Ácido ascórbico
106 células/ml
106 células/ml
10 mg/ml
4 μg/ml
100 μg/ml
3,65mg/ml
2,5 mg/ml
50 mg/ml
50
410591

FR
Ingredientes farmacéuticos activos terapéuticos
Ampicilina
Doxorubicina-HCl
Mitomicina C
Nitrofurantoína
Fenazopiridina-HCl a
Tiotepa
Trimetoprim
Bacilo Calmette Guerin
Finasterida
Flutamida
6 mg/ml
100 μg/ml
100 μg/ml
500 μg/ml
800 μg/ml
100 μg/ml
500 μg/ml
200 μg/ml
25 μg/ml
1 mg/ml
Ioversol,
1%
74% (medio de contraste para procedimientos de formación
de imágenes) a
Urisado b
175 μg/ml
a: con concentraciones crecientes, la intensidad de la línea de resultados de la prueba puede
verse reducida.
b: debido a la coloración intrínseca, la lectura de las líneas se ve impedida en las
concentraciones superiores.
ELIMINACIÓN DE RESIDUOS
Elimine los reactivos usados o no usados, así como cualquier otro material desechable
contaminable, siguiendo los procedimientos para productos infecciosos o potencialmente
infecciosos.
Es responsabilidad de cada laboratorio gestionar los residuos y efluentes producidos de
acuerdo con su tipo y grado de peligro, y tratarlos y desecharlos (o hacer que se los trate y
deseche) de acuerdo con las normativas aplicables.
TR RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. Robert Koch Institut : Cancer in Germany. 2005/2006. Incidence and Trends. 7th ed. 2010.
p.84-87 HYPERLINK “http://www.rki.de/cln_160/nn_1219822/EN/Content/Health__Reporting/
GBEDownloadsB/KID2010,templateId=raw,property=publicationFile.pdf/KID2010.pdf” http://
www.rki.de/cln_160/nn_1219822/EN/Content/Health__Reporting/GBEDownloadsB/KID2010,
templateId=raw,property=publicationFile.pdf/KID2010.pdf (Accessed Dec 2010)
2. Umiker W.: Accuracy of Cytologic Diagnosis of Cancer of the Urinary Tract. Symposium on
Diagnostic Accuracy of Cytologic Technics 8:186-193,1964.
3. Badalament R.A., Hermansen D.K., et al : The Sensitivity of Bladder Wash Flow Cytometry,
Bladder Wash Cytology, and Voided Cytology in the Detection of Bladder Carcinoma. Cancer
60:1423-1427, 1987.
4. Grossmann H.B.: Markers for Bladder Cancer.
bioNexia® BTA
51

5. Kinders R., Jones T., et al: Complement Factor H or a Related Protein Is a Marker for Transitional
Cell Carcinoma of the Bladder. Clinical Cancer Research 4:2511-2520, 1998.
6. Corey M., Kinders R., et al: Factor H Related Proteins Are Upregulated In Bladder Cancer.
Proceedings of the American Association for Cancer Research 39: 263, 1998.
7. Austyn J. M., Wood K. J.: Principles of Cellular and Molecular Immunology. Oxford University
Press p. 522-554, 1993.
8. Corey M.J., Kinders R.J., et al: Enhancement of Complement-Mediated Lysis of Cancer Cells By
Anti-Factor H Antibodies. Proceedings of the American Association for Cancer Research 39: 304,
1998.
9. Sarosdy M.F., Hudson M.A., et al: Improved Detection of Recurrent Bladder Cancer Using the
Bard BTA stat Test. Urology 50(3):349 - 353,1997.
10. Raitanen M.-P., Marttila T., et al: The Bard BTA stat Test in Monitoring of Bladder Cancer. The
Journal of Urology 157: 28, 1997.
ÍNDICE DE SÍMBOLOS
Símbolo Significado Símbolo Significado
Número de catálogo
Diagnóstico in vitro
Dispositivo médico
Fabricante
Limitación de
temperatura
Fecha de caducidad
Código de lote
Consultar las instrucciones
de uso
No reutilizar
No exponer a la luz solar
Contenido suficiente para
ensayos
52
410591

FR
BIOMERIEUX, el logotipo azul, bioNexia son marcas comerciales utilizadas, en
trámite y/o registradas de bioMérieux SA o una de sus filiales.
CLSI es una marca registrada del Clinical and Laboratory Standards Institute Inc.
Cualquier otro nombre o marca comercial es propiedad de su respectivo
propietario.
RU
EN
PT
PL
CS
IT
ES
DE
bioMérieux SA
69280 Marcy-l‘Etoile-France
Tel: 33 (0) 478 87 20 00
Fax: 33 (0) 478 87 20 90
www.biomerieux.com/bionexia
RCS LYON 673 620 399
SV
16359 A - 2010/12
TR
bioNexia® BTA
53

54
410591

DE
TR RU PL CS SV PT
IT
ES
EN
FR
MODALITÀ DI IMPIEGO
bioNexia® BTA è un test rapido qualitativo per la rilevazione dell’Antigene Tumorale della
Vescica (BTA) in campioni di urina umana. Il test è indicato come aiuto per lo screening delle
popolazioni ad alto rischio e per il monitoraggio di pazienti affetti da cancro alla vescica. Il
test è esclusivamente per un uso diagnostico in vitro professionale.
INTRODUZIONE E OBIETTIVO DEL TEST
Incidenza
I carcinomi della vescica urinaria rappresentano circa il 2 – 3% dei tumori maligni nell’uomo.
Dopo il carcinoma prostatico, il carcinoma alla vescica è il tumore del sistema genitourinario
più frequente.
Eziologia
Tra i fattori di rischio che aumentano la probabilità di carcinoma alla vescica vi sono il
fumo, cistiti croniche, esposizione ad ammine aromatiche sul posto di lavoro (ad esempio
parrucchieri, industrie chimiche, la lavorazione del cuoio e la produzione di vernici, di
pesticidi ed altro) (1) radioterapia del piccolo bacino, schistosomiasi, nefropatia Balkan,
nefrite interstiziale cronica, applicazione a lungo termine di alcuni farmaci (clornafazina,
fenacetina, ciclofosfamide), alcuni dei quali sono stati ritirati dal commercio.
Sintomi clinici
La micro o macro ematuria si verifica in circa l’80% dei pazienti, nonostante che in entrambi i
casi la rilevazione sia spesso intermittente. Altri sintomi frequenti che indicano un carcinoma
della vescica urinaria sono problemi di minzione disuria, particolarmente in casi in cui non vi
sono miglioramenti dopo l’assunzione di antibiotici.
Stadiazione e grado di differenziazione
Generalmente, viene eseguita una differenziazione tra tumori superficiali ed i tumori infiltranti.
I vari stadi sono riassunti nella tabella in basso; sono possibili ulteriori sottoclassificazioni
in a e b (non mostrate). Al momento della diagnosi, circa il 75 – 85% dei pazienti presenta
un carcinoma superficiale e non invasivo della vescica urinaria (TCC = carcinoma a cellule
di transizione). Tali pazienti soffrono di un rischio di recidiva del 75%, devono quindi essere
monitorati regolarmente per il rilevamento di eventuali nuovi attacchi della malattia in esami
di follow-up.
bioNexia® BTA
55

Stadiazione
Tx
Tumore primitivo. Non valutabile
T0
Assenza di segni di tumore primitivo
Ta
Carcinoma della mucosa non invasivo
Tis
Carcinoma in situ: "tumore superficiale"
T1
Tumore che invade il tessuto connettivo sub-epiteliale
T2
Tumore che invade i muscoli
T3
Tumore che invade il tessuto perivescicale
T4
Tumore che invade uno dei seguenti organi: glande della prostata,
utero, vagina, parete pelvica, parete addominale.
Un altro importante fattore per la gradazione della prognosi è il grado di differenziazione:
Grado di differenziazione
G1
Buona differenziazione
G2
Moderata differenziazione
G3
Pessima differenziazione
G4
Carcinoma anaplastico
Diagnosi
Le procedure utilizzate più frequentemente per rilevare il carcinoma della vescica urinaria
sono la cistoscopia e la citologia urinaria. Nella citologia urinaria, sono analizzati sedimenti
urinari per individuare le cellule tumorali. Purtroppo, spesso il numero totale di cellule è
comparativamente basso. Inoltre, le condizioni ambientali delle urine attaccano le cellule,
causando il mascheramento di importanti caratteristiche diagnostiche. Frequentemente,
non sono definite procedure standard per la raccolta e l’archiviazione di campioni. Procedure
controllate di svuotamento vescicale sembrano produrre i risultati migliori (2). Tuttavia, uno dei
principali limiti di tale procedura diagnostica consiste nel fatto che la sensibilità clinica è soggetta
a considerevoli fluttuazioni e che spesso i tumori in stadi iniziali non vengono rilevati (2,3).
A causa della sua specificità e della sua sensibilità clinica, la cistoscopia è considerata come
procedura diagnostica standard (oltre alla biopsia). Lo svantaggio di questo intervento
invasivo è che ha un impatto pesante sul paziente e consente di individuare solo tumori visibili.
A causa della sua specificità e della sua sensibilità clinica, la cistoscopia è considerata come la
procedura diagnostica di riferimento (oltre alla biopsia). Lo svantaggio di questo intervento
invasivo è che è spiacevole per il paziente e consente di individuare solo tumori visibili.
Sulla base degli svantaggi delle tecniche diagnostiche sopra citate, è stata realizzata una
approfondita ricerca di marcatori tumorali per aiutare la diagnosi del carcinoma della
56
410591

FR
vescica urinaria (4) ed è stata scoperta una proteina, l’Antigene associato al Tumore della
Vescica, la cui frequenza è spesso maggiore in pazienti sofferenti di carcinoma della vescica.
Questa proteina è stata isolata da diverse linee cellulari di carcinomi della vescica, ma non da
normali cellule epiteliali. Da un punto di vista biochimico, il BTA è una proteina strettamente
correlata al fattore complementare umano H (proteina correlata al fattore complementare
H umano, hCFHrp) (5,6). Entrambe le proteine sono rilevate con gli anticorpi monoclonali
del test. Il fattore complementare H gioca un importante ruolo inibitorio nella formazione
del complesso che attacca la membrana, la cascata del complemento (7), responsabile della
lisi delle cellule degenerate. È stato possibile dimostrare in vitro che il BTA inibisce inoltre la
formazione del complesso di attacco delle membrane. È stato possibile arrestare l’inibizione
aggiungendo anticorpi monoclonali contro hCFHrp (8). Si può supporre che, in questo
modo, le cellule cancerose sfuggano al sistema di difesa dell’organismo.
La card per test bioNexia® BTA consente il rilevamento del BTA nell’urina per mezzo di una
particolare reazione antigene-anticorpo. Questo approccio non invasivo è caratterizzato
da una sensibilità clinica considerevolmente superiore rispetto alla citologia urinaria, in
particolare nei primi stadi del carcinoma.
In casi irrisolti di micro e macro-ematurie, una combinazione dei due metodi può aumentare
le possibilità di rilevamento. Nel monitoraggio di pazienti affetti da tumore alla vescica, il
test supporta ulteriormente la valutazione del rischio di recidive e può essere d’aiuto per la
riduzione di cistoscopie o biopsie superflue.
L’utilità del BTA come marcatore tumorale è stata confermata in diversi studi (9,10). Il test è
eseguito utilizzando semplicemente l’urina del paziente e consente una valutazione visuale
del risultato in un paio di minuti.
PRINCIPIO
bioNexia® BTA è un test immunocromatografico di rilevazione qualitativa dell’Antigene
associato al Tumore della Vescica (BTA) in campioni di urina umana.
Il test è basato su due anticorpi monoclonali
specifici diretti verso differenti epitopi di BTA.
La membrana è pre-coattata con un anticorpo
monoclonale sulla regione della linea del test (T)
(come mostrato nella figura a destra). Il secondo
Linea di controllo (C)
anticorpo è marcato da un colore.
Visibile in tutti i risultati
Quando il campione di urina contiene BTA, forma
validi
un complesso con l’anticorpo marcato da un
Linea di test (T)
Visibile in tutti i campioni
colore. Quando il fluido scorre sulla membrana,
positivi
il complesso viene catturato dall’anticorpo
immobilizzato sulla membrana e nella regione T
comparirà una linea rossa. Se il campione urinario
Pozzetto del campione (S)
non contiene BTA, l’anticorpo colorato non
Per l’aggiunta di campioni
formerà alcun complesso e non compariranno
ID campione o paziente
linee nella regione della linea del test (T).
TR RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
A scopi identificativi
bioNexia® BTA
57

Inoltre, il test incorpora una linea di controllo procedurale, nella regione di controllo
(C). Questa linea di controllo sarà generata in ogni caso, indipendentemente
dalla presenza di BTA. L’anticorpo colorato è catturato direttamente
da un reagente (anticorpo di capra anti-topo IgG) immobilizzato nella regione di controllo.
La linea di controllo comparirà in ogni test valido, indicando che la migrazione del test è
avvenuta correttamente.
CONTENUTO DEL KIT (10 TEST)
10 card per test Ciascuno in un sacchetto chiuso con una pipetta monouso per il
campione ed un sacchetto disidratante. La membrana della card è
rivestita di anticorpi monoclonali diretti verso vari epitopi BTA.
1 Guida rapida per l’utente stampata sulla scatola
1 Foglietto illustrativo
MATERIALI NECESSARI MA NON FORNITI
• Contenitore per il campione di urina
• Non utilizzare carta o coppette in Styrofoam (polistirene espanso).
• Cronometro
AVVERTENZE E PRECAUZIONI
• Solo per uso diagnostico in vitro.
• Solo per uso professionale.
• Questo kit contiene prodotti di origine animale. La conoscenza certa delle origine e/o
delle condizioni sanitarie degli animali non garantisce totalmente l’assenza di agenti
patogeni trasmissibili. Si raccomanda quindi che questi prodotti vengano trattati e
gestiti come prodotti potenzialmente infetti, osservando le abituali precauzioni di
sicurezza.
• Non utilizzare reagenti dopo la data di scadenza indicata sulla confezione.
• La card per il test deve restare chiusa nel sacchetto contenente il disidratante fino al
momento dell’utilizzo.
• La card per il test è monouso; non riutilizzarla.
• Tutti i campioni devono essere considerati potenzialmente infetti e maneggiati in
conformità alle precauzioni consigliate (CLSI® M29-A, Protection of Laboratory Workers
from Instrument Biohazards and Infectious Disease Transmitted by Blood, Body Fluids,
and Tissue; Approved Guideline (Protezione del personale dei laboratori da rischi
biologici e malattie infettive trasmesse da sangue, fluidi corporei e tessuti; Linee guida
approvate) – Revisione corrente). Per ulteriori informazioni sulle precauzioni da adottare,
fare riferimento a “Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories (Sicurezza
biologica in laboratori microbiologici e biomedici) – CDC/NIH – Ultima Edizione”, o alla
regolamentazione vigente nel paese d’uso del prodotto.
• Non utilizzare il test se il sacchetto protettivo è danneggiato.
58
410591

TR
FR
CONSERVAZIONE E STABILITÀ
• Conservare il kit a 2 – 30°C.
• NON CONGELARE.
• Se conservati secondo le condizioni raccomandate, tutti i componenti sono stabili fino alla
data di scadenza indicata sulla confezione. Non utilizzare dopo la data di scadenza.
• La card per il test deve restare nel sacchetto fino all’utilizzo.
PRELIEVO E PREPARAZIONE DEI CAMPIONI
1. Campione
Il test si esegue con urine umane o urine da un paziente cateterizzato.
2. Preparazione
Non è richiesto alcun trattamento particolare dei campioni di urina. I campioni devono essere
a temperatura ambiente al momento del test. Dopo periodi prolungati di conservazione o in
caso di campioni scongelati, mescolare l’urina con cura prima di eseguire il test. Quando l’urina
serve anche per altri esami, raccogliere innanzitutto un’aliquota di circa 2 ml per il test BTA, in
modo da assicurare che il campione di urina non sia contaminato.
3. Conservazione
I campioni di urina possono essere conservati a temperatura ambiente per un massimo
di 4 giorni dalla raccolta. Se il campione di urina non è testato immediatamente, deve
essere conservato in frigorifero a circa 2 – 8°C per un massimo di 8 giorni. Un campione di
urine congelato può essere conservato a una temperatura compresa tra -19°C e -31°C per
24 settimane consentendo fino a 3 cicli di congelamento/scongelamento.
Note
• Leggere le seguenti note prima di effettuare la raccolta del campione.
• Non utilizzare carta o coppette in Styrofoam (polistirene espanso) per la raccolta di
campioni di urine.
• Utilizzare un nuovo contenitore per ciascun campione, in modo da evitare
contaminazioni.
• Contrassegnare adeguatamente il contenitore dell’urina per assicurare un’identificazione
corretta del campione.
• Campioni per citologia, serio, plasma, sangue intero o liquido di lavaggio vescicale non
son adatti per questo test.
• Non raccogliere le urine nel periodo mestruale o nei due giorni successivi.
• In caso di medicazioni intravescicali, come BCG (Bacillo Calmette-Guerin), mitomicina
C, tiotepa, bropiramina (a fini di ricerca) o interferone (a fini di ricerca), il test può essere
eseguito a solo discrezione del medico.
• I test BTA non devono essere eseguiti in seguito a interventi chirurgici, biopsie o esami
invasivi della vescica o del tratto urinario. Posticipare il test per un periodo sufficiente al
recupero dal trauma provocato da questi interventi. Leggere anche le sezioni “Limiti del
metodo” o “PERFORMANCE”.
RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
bioNexia® BTA
59

ISTRUZIONI PER L’USO
1. Il sacchetto chiuso contenente la card del test e il campione del paziente devono essere
portati a temperatura ambiente prima dell’esecuzione del test. Non aprire il sacchetto
refrigerato, per evitare che la condensazione dell’umidità atmosferica si depositi sulla
membrana del test.
2. Aprire il sacchetto, rimuovere la card per il test e la pipetta. Gettare il sacchetto
del disidratante.
3. Agitare delicatamente il campione di urina del paziente. Riempire la pipetta fornita con
il campione di urina del paziente e posizionarla giusto sopra il pozzetto del campione
(come mostrato nella guida rapida sulla confezione) e versare tre gocce nel pozzetto del
campione (S).
4. Avviare il cronometro immediatamente dopo l’aggiunta del campione.
5. Quando il cronometro raggiunge i 5 minuti, leggere il risultato entro 1 minuto.
Il risultato del test non è valido se letto dopo più di 6 minuti.
INTERPRETAZIONE DEI RISULTATI
Risultato NEGATIVO
Compare una linea rossa nella regione della linea di controllo (C)
Nessuna linea rossa è visibile nella regione della linea di test (T).
Risultato POSITIVO
Compaiono due linee rosse differenti.
Una linea compare nella regione della linea di controllo (C) e un’altra nella regione della
linea di test (T). Una linea rossa di test (T), anche solo lievemente visibile, è da considerare
un risultato positivo.
Risultato NON VALIDO
La linea di controllo (C) non compare. La mancata comparsa di linee rosse sulla regione
di controllo (C) indica che la migrazione del test non è stata eseguita correttamente e
il risultato del test è non è valido. Rivedere la procedura e ripetere il test con una nuova
card di test. Se il problema persiste, interrompere immediatamente l’uso del kit per il test e
contattare il distributore locale.
Leggere dopo 5 minuti
ma non attendere oltre
6 minuti. Il risultato del
test non è valido se letto
dopo 6 minuti
3 gocce di urina
Negative Negativo Positive Positivo Non Invalid valido Non Invalid valido
-
+
x
x
60
410591

FR
CONTROLLO DI QUALITÀ
Il test include un sistema di controllo interno, una linea colorata (C) indica che la migrazione
del test è avvenuta correttamente. Se la linea di controllo non compare, il test non è valido.
È responsabilità dell’utilizzatore di eseguire i Controlli di Qualità secondo le normative locali
vigenti.
LIMITI DEL METODO
• Il risultato del test non deve costituire base esclusiva per la diagnosi ma deve essere
valutato da un medico comparandolo ad altri risultati clinici e di esami, e se necessario
confermato da ulteriori procedure diagnostiche.
• Il risultato non deve essere interpretato come prova definitiva della presenza o
dell’assenza di un carcinoma della vescica urinaria. Concentrazioni elevate di BTA sono
state rilevate anche in pazienti con malattie benigne come infezioni del tratto urinario,
calcoli renali, nefriti o traumi alla vescica o al tratto urinario.
Inoltre, carcinomi dei reni e/o TCC (carcinomi a cellule di transizione) del tratto urinario
superiore che potrebbero causare un aumento dei livelli del BTA nelle urine.
• La sensibilità clinica del test del BTA dipende dallo stadio del carcinoma della vescica. Si
prega di leggere anche la sezione “PERFORMANCE”.
• Gli effetti della radioterapia o chemioterapia sistemica sui risultati del test del BTA sono
sconosciuti, così come l’influenza di terapie sperimentali.
• Alcune malattie benigne come calcoli renali, nefriti, infezioni del tratto urinario o malattie
veneree possono aumentare il numero di risultati positivi.
• Il cancro al rene o il carcinoma uroteliale del tratto urinario superiore può anche causare
un incremento dei livelli del BTA.
PERFORMANCE
Performance cliniche
Specificità
Sono stati testati 555 campioni di urina di pazienti senza carcinoma alla vescica per verificare
la specificità clinica del test bioNexia® BTA. L’età media dei pazienti era 55 anni, il 48% dei
pazienti era di sesso maschile. Oltre a 167 soggetti sani, sono stati esaminati 388 pazienti
con profili clinici di vario tipo. Questi sono stati raggruppati in diverse categorie. I risultati
della prova sono stati riassunti nella seguente tabella.
Gruppo di pazienti
Caratteristiche o profili
clinici
Conteggio Specificità clinica in %
(intervallo di affidabilità
del 95%)
Soggetti sani 167 95
(90 – 98)
Malattie o forme di cancro non genito-urinarie
Malattie non genitourinarie
Forme di cancro non
genito-urinarie
Totale profili clinici
non genito-urinari
Diabete, artrite, lupus, altre
malattie degenerative del
collagene
Carcinomi al seno, ai polmoni,
allo stomaco, all’intestino,
leucemie, linfomi
52 98
(89 – 100)
53 89
(77 – 95)
TR RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
105 93
(87 – 97)
bioNexia® BTA
61

Malattie genito-urinarie benigne
Iperplasia benigna della
prostata
Malattie benigne Malattie dei reni
dei reni
calcoli renali, nefriti
ed altre
Malattie genitourinarie
di vario
genere
Totale pazienti con
malattie genitourinarie
Prostatiti, uretriti, infezioni
del tratto urinario.
incontinenza, malattie
veneree
26 88
(71 – 98)
32 50
(32 – 68)
94 76
(65 – 84)
152 72
(65 – 79)
Forme di cancro genito-urinarie
Carcinoma della prostata 45 78
(63 – 89)
Cancro al rene 7 29
(4 – 71)
Altri tipi di cancro Endometrio, alle ovaie ed
altre forme di carcinoma
25 76
(55 – 91)
Totale pazienti con
forme di cancro
genito-urinario
Trauma genitourinario
77 73
(61 – 82)
54 33
(21 – 47)
La specificità del test bioNexia® BTA in 107 pazienti con anamnesi di cancro alla prostata e
nessuna prova della malattia è stata pari al 70% (IA 95%: 60 – 79).
Sensibilità
La sensibilità clinica del test bioNexia® BTA è stata determinata usando 220 campioni di
urina da pazienti in cui un tumore della vescica è stato confermato con la biopsia. L’età
media dei pazienti era 68 anni, il 79% dei pazienti era di sesso maschile. La seguente tabella
presenta lo stadio e il grado del tumore, ed il relativo risultato del test BTA. Non è stato
possibile determinare uno stadio o un grado rispettivamente per 3 (a) e 12 (b) campioni.
Sensibilità del test del BTA per stadio e grado del tumore
Stadio del tumore (a) Numero di campioni Sensibilità clinica in %
(Intervallo di affidabilità del 95%)
Ta 111 51 (42 – 61)
Tis 18 61 (36 – 83)
T1 38 89 (75 – 97)
T2-T4 50 88 (76 – 95)
62
410591

FR
Grado del tumore (b) Numero di campioni Sensibilità clinica in %
(Intervallo di affidabilità del 95%)
1 57 42 (29 – 56)
2 56 66 (52 – 78)
3 95 83 (73 – 89)
131 dei 200 campioni di urina sono stati esaminati simultaneamente usando metodi
citologici delle urine (citologia del sedimento urinario). La sensibilità clinica dei due metodi
e/o la sensibilità combinata dei due metodi sono riassunti nella seguente tabella.
Sensibilità del test del BTA per stadio e grado del tumore
Sensibilità clinica in %
(Intervallo di affidabilità del 95%)
Stadio del
tumore
Numero di
campioni
Test BTA
Citologia del
sedimento urinario
(VUC)
Test BTA + VUC
TR RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
Ta 73 45 (34 – 57) 7 (2 – 15) 49 (37 – 61)
Tis 15 53 (27 – 79) 60 (32 – 84) 80 (52 – 96)
T1 27 85 (66 – 96) 41 (22 – 61) 85 (66 – 96)
T2-T4 16 75 (48 – 93) 38 (15 – 65) 81 (54 – 96)
I dati mostrano che, soprattutto nei primi stadi del tumore, il test BTA ha una sensibilità
nettamente superiore rispetto alla citologia del sedimento urinario. La rilevazione di tumori
Tis (Tumore in situ) è leggermente inferiore.
Performance analitiche
Range di misura del test bioNexia® BTA
Il limite di rilevazione più basso del test è di circa 22,4 U/ml. Fino a una concentrazione di
12.400 U/ml, non risultano reazioni prozona (effetto gancio). Nei campioni testati non si
sono verificate concentrazioni superiori.
Ripetibilità
Quattro campioni con livelli di antigeni noti (2 U/ml, 32 U/ml, 67 U/ml, 292 U/ml) sono stati
testati cinquanta volte (10 test x 5 replicati) lo stesso giorno.
La ripetibilità dell’esame è stato valutato in due siti. La concordanza (coerenza) tra i risultati
di test osservati e i risultati previsti, in base alla concentrazione nota degli antigeni, è stata
pari al 100% in entrambi i siti.
Riproducibilità
È stata valutata la precisione tra saggi e tra lotto e lotto in un unico sito. Quattro campioni
con livelli di antigeni noti sono stati testati dieci volte al giorno per un totale di cinque giorni
consecutivi con due lotti.
bioNexia® BTA
63

La concordanza (coerenza) tra i risultati di test osservati e i risultati previsti, in base alla
concentrazione conosciuta di antigeni, è mostrata nella tabella in basso. Il consenso è stato
determinato dal risultato ottenuti da almeno 2 dei 3 lettori.
Campione Lotto Numero di risultati
coerenti
Percentuale
di risultati
coerenti
Riproducibilità analitica
in % (limite di affidabilità
del 95%)
Campione
(2 U/ml)
Campione
(32 U/ml)
Campione
(67 U/ml)
Campione
(292 U/ml)
Disp3 50 100 92,9 – 100,0
Disp4 50 100 92,9 – 100,0
Disp3 50 100 92,9 – 100,0
Disp4 50 100 92,9 – 100,0
Disp3 50 100 92,9 – 100,0
Disp4 50 100 92,9 – 100,0
Disp3 50 100 92,9 – 100,0
Disp4 50 100 92,9 – 100,0
Era stata ottenuta una coerenza del 100% tra i saggi.
SOSTANZE INTERFERENTI
Impatto delle sostanze endogene ed esogene
Per determinare eventuali interferenze sul test, sono stati mescolati un pool di urine BTA
positive ed uno negative con le sostanze elencate nella tabella in basso.
Il risultato del test non ha subito alcuna variazione alle seguenti concentrazioni.
Sostanza
Concentrazione
Possibili costituenti dell’urina (sostanze endogene)
Emoglobina
1 mg/ml
Leucociti
Eritrociti
Albumina
Bilirubina (non coniugata) a
IgG
Cloruro di sodio a
Acido urico
Acido ascorbico
106 celle/ml
106 celle/ml
10 mg/ml
4 μg/ml
100 μg/ml
3,65 mg/ml
2,5 mg/ml
50 mg/ml
64
410591

FR
Ingredienti farmaceutici con principi attivi
Ampicillina
Doxorubicina-HCl
Mitomicina C
Nitrofurantoina
Fenazopiridina-HCl a
Tiotepa
Trimetoprim
Bacillo Calmette-Guerin
Finasteride
Flutamide
6 mg/ml
100 μg/ml
100 μg/ml
500 μg/ml
800 μg/ml
100 μg/ml
500 μg/ml
200 μg/ml
25 μg/ml
1 mg/ml
Ioversol,
74% (mezzo di contrasto per procedure di imaging) a 1%
Urised b
175 μg/ml
a: con concentrazioni maggiori, l’intensità della linea del test potrebbe ridursi.
b: a causa di colorazioni intrinseche, la lettura delle linee non è possibile in caso di
concentrazioni superiori.
SMALTIMENTO DEI RIFIUTI
Smaltire reagenti usati o non usati e ogni altro materiale monouso contaminato seguendo
le procedure previste per prodotti infetti o potenzialmente infetti.
È responsabilità di ogni laboratorio gestire i rifiuti e gli effluenti prodotti a seconda della
loro natura e della loro pericolosità ed assicurarne (o farne assicurare) il trattamento e lo
smaltimento conformemente alla legislazione vigente.
TR RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
RIFERIMENTI BIBLIOGRAFICI
1. Robert Koch Institut : Cancer in Germany. 2005/2006. Incidence and Trends. 7th ed. 2010.
p.84-87 HYPERLINK “http://www.rki.de/cln_160/nn_1219822/EN/Content/Health__Reporting/
GBEDownloadsB/KID2010,templateId=raw,property=publicationFile.pdf/KID2010.pdf” http://
www.rki.de/cln_160/nn_1219822/EN/Content/Health__Reporting/GBEDownloadsB/KID2010,
templateId=raw,property=publicationFile.pdf/KID2010.pdf (Accessed Dec 2010)
2. Umiker W.: Accuracy of Cytologic Diagnosis of Cancer of the Urinary Tract. Symposium on
Diagnostic Accuracy of Cytologic Technics 8:186-193,1964.
3. Badalament R.A., Hermansen D.K., et al : The Sensitivity of Bladder Wash Flow Cytometry,
Bladder Wash Cytology, and Voided Cytology in the Detection of Bladder Carcinoma. Cancer
60:1423-1427, 1987.
4. Grossmann H.B.: Markers for Bladder Cancer.
5. Kinders R., Jones T., et al: Complement Factor H or a Related Protein Is a Marker for Transitional
Cell Carcinoma of the Bladder. Clinical Cancer Research 4:2511-2520, 1998.
bioNexia® BTA
65

6. Corey M., Kinders R., et al: Factor H Related Proteins Are Upregulated In Bladder Cancer.
Proceedings of the American Association for Cancer Research 39: 263, 1998.
7. Austyn J. M., Wood K. J.: Principles of Cellular and Molecular Immunology. Oxford University
Press p. 522-554, 1993.
8. Corey M.J., Kinders R.J., et al: Enhancement of Complement-Mediated Lysis of Cancer Cells By
Anti-Factor H Antibodies. Proceedings of the American Association for Cancer Research 39: 304,
1998.
9. Sarosdy M.F., Hudson M.A., et al: Improved Detection of Recurrent Bladder Cancer Using the
Bard BTA stat Test. Urology 50(3):349 - 353,1997.
10. Raitanen M.-P., Marttila T., et al: The Bard BTA stat Test in Monitoring of Bladder Cancer. The
Journal of Urology 157: 28, 1997.
INDICE DEI SIMBOLI
Simbolo Significato Simbolo Significato
Numero di catalogo
Dispositivo medicodiagnostico
in vitro
Fabbricante
Limite di temperatura
Utilizzare entro
Codice del lotto
Consultare le istruzioni per
l’uso
Non riutilizzare
Tenere lontano dalla luce
solare diretta
Contenuto sufficiente per
“n” saggi
66
410591

FR
BIOMERIEUX, il logo blu, bioNexia sono marchi utilizzati, depositati e/o registrati di
proprietà di bioMérieux SA o di una delle sue filiali.
CLSI è un marchio depositato del Clinical and Laboratory Standards Institute Inc.
Altri nomi e marchi sono di proprietà dei rispettivi proprietari.
RU
EN
PT
PL
CS
IT
ES
DE
bioMérieux SA
69280 Marcy-l‘Etoile-France
Tel: 33 (0) 478 87 20 00
Fax: 33 (0) 478 87 20 90
www.biomerieux.com/bionexia
RCS LYON 673 620 399
SV
16359 A - 2010/12
TR
bioNexia® BTA
67

68
410591

DE
TR RU PL CS SV PT
IT
ES
EN
FR
OBJECTIVO DO TESTE
O bioNexia® BTA é um teste rápido de detecção qualitativa de Antigénio associado ao tumor
da bexiga (BTA) em amostras de urina humana. O teste foi concebido para ser utilizado como
ajuda no rastreio de populações de alto risco e na monitorização de doentes com cancro da
bexiga. O teste destina-se a ser utilizado apenas para diagnóstico in vitro profissional.
INTRODUÇÃO E OBJECTIVO DO TESTE
Incidência
Os carcinomas da bexiga urinária representam aprox. 2 – 3% de todos os tumores malignos
em humanos. Depois do carcinoma da próstata, o carcinoma da bexiga é o segundo com
maior incidência de todas as doenças tumorais do sistema geniturinário.
Etiologia
Entre os factores que aumentam o risco de carcinoma da bexiga encontram-se: o
tabaco, cistite crónica, exposição a aminas aromáticas no local de trabalho (por exemplo,
cabeleireiros, indústria química, dos curtumes e das tintas, desinfestações e outros) (1),
radioterapia da pélvis inferior, bilharziose, nefropatia dos Balcãs, nefrite intersticial crónica,
bem como a aplicação a longo prazo de determinados medicamentos (clornafazina,
fenacetina, ciclofosfamida), tendo alguns dos quais sido retirados do mercado.
Sintomas Clínicos
Uma macro ou micro hematúria ocorre em aproximadamente 80% dos doentes, embora a
detecção de ambas as formas ocorra apenas de forma intermitente. Outros sintomas frequentes
que indicam a existência de um carcinoma da bexiga urinária são: dificuldades miccionais
disúricas, particularmente em casos onde não se conseguem melhorias com antibióticos. Nos
graus mais avançados, pode ocorrer dor e retenção urinária e problemas inerentes.
Faseamento e factor de diferenciação
Geralmente, é feita uma diferenciação entre tumores superficiais e infiltrativos. Os vários
graus encontram-se resumidos na tabela seguinte; são possíveis outras subclassificações em
a e b (não ilustradas). Quando é efectuado um diagnóstico, aprox. 75 – 85% dos doentes
apresenta um carcinoma da bexiga urinária não invasivo, superficial (TCC = carcinoma das
células de transição). Existe um risco de 75% de reincidência nestes doentes, por isso têm
de ser regularmente monitorizados para verificar a existência de novos ataques da doença
através de exames de acompanhamento.
bioNexia® BTA
69

Faseamento
Tx
Tumor primário, não avaliável
T0
Sem indicação de tumor primário
Ta
Carcinoma não invasivo da mucosa
Tis
Carcinoma in situ: “tumor superficial”
T1
O tumor está a infiltrar-se no tecido conjuntivo subepitelial
T2
O tumor está a infiltrar-se nos músculos
T3
O tumor está a infiltrar-se no tecido peri-vesical
T4
O tumor está a infiltrar-se num dos seguintes órgãos: glândula da
próstata, útero, vagina, parede pélvica, parede abdominal.
Outra classificação importante para o prognóstico é o grau de diferenciação:
Grau do factor de diferenciação
G1
Bem diferenciado
G2
Moderadamente diferenciado
G3
Pouco diferenciado
G4
Carcinoma anaplásico
Diagnóstico
Os dois procedimentos utilizados com maior frequência para detectar um carcinoma da
bexiga são a citologia e a cistoscopia. Na citologia urinária, os sedimentos urinários são
escrutinados para verificar a existência de células cancerígenas. Infelizmente, o número total
de células é com frequência relativamente baixo. Para além disso, as condições no meio
urinário atacam as células, tendo como consequência o facto de características importantes
de diagnóstico poderem ser ocultadas. Frequentemente, não se encontram implementados
procedimentos padrão de recolha e conservação de amostras. Os procedimentos
controlados de esvaziamento da bexiga parecem produzir os melhores resultados (2).
No entanto, uma limitação muito importante deste procedimento de diagnóstico é a
sensibilidade clínica estar sujeita a flutuações consideráveis e os tumores nas fases iniciais
passarem frequentemente despercebidos (2,3).
Devido à sua sensibilidade e especificidade clínicas, a cistoscopia é considerada o
procedimento diagnóstico padrão (para além da biopsia). A desvantagem desta intervenção
invasiva é ser difícil para o doente e o facto de apenas serem identificados tumores visíveis.
Com base nas desvantagens dos procedimentos de diagnóstico acima referidos, teve lugar
uma procura intensiva de marcadores tumorais, que podem ser úteis para diagnosticar o
carcinoma da bexiga urinária (4). Com o Antigénio associado ao tumor da bexiga (BTA), foi
70
410591

FR
descoberta uma proteína, cuja ocorrência é frequentemente aumentada em doentes que
sofrem de carcinoma da bexiga. Foi isolada de várias linhas de células de carcinoma da bexiga,
mas não de células epiteliais normais. A nível bioquímico, o BTA é uma proteína que está
intimamente relacionada com o factor de complemento humano H (proteína relacionada com
o factor de complemento humano H, hCFHrp) (5,6). Ambas as proteínas são detectadas pelos
corpos monoclonais do teste. O factor de complemento humano H assume um importante
papel inibidor na formação do complexo de ataque da membrana, a cascata do complemento
(7), que é responsável pela lise degenerativa das células. Pode ser comprovado in vitro que
o BTA também inibe a formação do complexo de ataque da membrana. Foi possível parar a
inibição adicionando anticorpos monoclonais contra a hCFHrp (8). É concebível que as células
cancerígenas escapem do sistema de defesa do corpo desta forma.
A cassete de teste bioNexia® BTA permite a detecção de BTA por meio de uma reacção
específica de antigénios e anticorpos. Esta abordagem não invasiva é caracterizada por uma
sensibilidade clínica consideravelmente superior à citologia da urina, particularmente em
carcinomas das fases iniciais.
Em casos não resolvidos de macro e micro-hematúria, uma combinação de ambos os
métodos pode aumentar a taxa de detecção. Na monitorização de doentes com tumor da
bexiga, o teste suporta, para além disso, a avaliação do risco de reincidências e pode ajudar
a reduzir o número de cistoscopias ou biopsias desnecessárias.
A utilidade do BTA enquanto marcador tumoral foi confirmada em vários ensaios (9, 10).
O teste é simplesmente efectuado com a urina do doente e permite a avaliação visual do
resultado em alguns minutos.
PRINCÍPIO
O teste bioNexia® BTA é um ensaio imunocromatográfico qualitativo para a detecção do
Antigénio associado ao tumor da bexiga (BTA) na urina humana.
O teste baseia-se em dois anticorpos monoclonais específicos direccionados contra os
diferentes epítopos do BTA. A membrana é prérevestida
com um anticorpo monoclonal na
região da linha de testes (T) (conforme ilustrado
na figura da direita). O segundo anticorpo é
marcado com cor.
Quando a amostra de urina contém BTA, forma
Linha de controlo (C)
Visível em todos os
um complexo com o anticorpo marcado com
resultados válidos
cor. Quando o fluido passa pela membrana,
Linha de teste (T)
Visível em todas as
este complexo será captado pelo anticorpo
amostras positivas
imobilizado na membrana e surge uma linha
vermelha na região T. Se a amostra urinária não
contiver qualquer BTA, o anticorpo marcado
Poço de amostras (S)
com cor não poderá formar um complexo e não
Para a adição de material
de amostra
será gerada nenhuma linha de teste na região
da linha de testes (T).
ID do doente ou da amostra
TR RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
Para fins de identificação
bioNexia® BTA
71

Para além disso, o teste integra uma linha de controlo de procedimentos, na região de
controlo (C). Esta linha de controlo será gerada, independentemente da presença de BTA. O
anticorpo marcado com cor é capturado directamente por um reagente (IgG anti-ratinhocaprino)
imobilizado na região de controlo. A linha de controlo surgirá em cada teste válido,
indicando que a migração do teste foi efectuada de forma correcta.
COMPOSIÇÃO DOS REAGENTES DA EMBALAGEM (10 TESTES)
10 Cassetes de
teste
Em bolsas individuais seladas, com uma pipeta descartável para
amostras e um desidratante. A membrana da cassete de teste é
revestida com anticorpos monoclonais de ratinho direccionados
contra diferentes epítopos do BTA.
1 Guia rápido do utilizador impresso na caixa
1 Folheto informativo
MATERIAL NECESSÁRIO MAS NÃO FORNECIDO
• Recipiente para amostra de urina
• Não utilizar papel ou copos Styrofoam (poliestireno expandido).
• Cronómetro
PRECAUÇÕES DE UTILIZAÇÃO
• Apenas para utilização em diagnóstico in vitro.
• Apenas para utilização profissional.
• Este dispositivo contém produtos de origem animal. O controlo da origem e/ou do estado
sanitário dos animais não pode garantir de maneira absoluta que estes produtos não
contenham nenhum agente patogénico transmissível, pelo que é aconselhável manipulálos
com as precauções de utilização relativas aos produtos potencialmente infecciosos.
• Não utilizar os reagentes após a data de validade indicada na embalagem.
• O dispositivo de teste deve ser conservado na bolsa selada, que contém o desidratante,
até ser utilizado.
• O dispositivo é descartável: não voltar a utilizá-lo.
• Todas as amostras devem ser consideradas potencialmente infecciosas e manipuladas
em conformidade com as precauções recomendadas (CLSI® M29-A, Protection of
Laboratory Workers from Instrument Biohazards and Infectious Disease Transmitted
by Blood, Body Fluids, and Tissue; Approved Guideline [Protecção de trabalhadores
laboratoriais de perigos biológicos provenientes de instrumentos e doenças infecciosas
transmitidas pelo sangue, fluidos corporais e tecidos; norma aprovada] - Revisão
em vigor). Para informações complementares sobre as precauções de manipulação,
consultar o “Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories [Segurança
biológica em laboratórios microbiológicos e biomédicos) - CDC/NIH – Última edição”, ou
a regulamentação em vigor no país de utilização.
• Não utilizar o teste se a embalagem de folha de alumínio estiver danificada.
72
410591

FR
ARMAZENAMENTO E ESTABILIDADE
• Conservar a embalagem entre 2 – 30 °C.
• NÃO CONGELAR.
• Todos os componentes permanecem estáveis até à data de validade indicada nas
embalagens, se forem conservados nas condições exigidas. Não utilizar após a data de
validade.
• O dispositivo deve ser mantido na bolsa selada até utilização.
COLHEITA E PREPARAÇÃO DAS AMOSTRAS
1. Amostra
O teste é efectuado com urina humana ou com urina do doente cateterizado.
2. Preparação
Não é necessária uma preparação especial das amostras de urina. As amostras devem ser
colocadas à temperatura ambiente antes de serem testadas. Após longos períodos de
armazenamento ou em caso de amostras descongeladas, a urina deve ser completamente
misturada antes de ser testada. Quando se prevê utilizar a urina também em outros exames,
deve ser efectuada uma colheita de uma aliquota de aprox. 2 ml primeiro para o teste de
BTA, por forma a assegurar que a amostra de urina não foi contaminada.
3. Armazenamento
As amostras de urina podem ser armazenadas à temperatura ambiente durante no
máximo 4 dias após a colheita. Se a amostra de urina não for imediatamente testada, deve
ser refrigerada a 2 – 8 °C durante no máximo 8 dias. Uma amostra de urina congelada
entre -19 °C e -31 °C mantém-se estável durante 24 semanas, incluindo até 3 ciclos de
congelamento/descongelamento.
Notas
• Ler as notas seguintes antes de proceder à colheita de amostras.
• Não utilizar papel ou copos Styrofoam (poliestireno expandido) para a colheita de
amostras de urina.
• Utilizar um novo recipiente para cada amostra, por forma a evitar contaminações cruzadas.
• Marcar o recipiente de urina de forma adequada para assegurar a correcta identificação
da amostra.
• Amostras citológicas, soro, plasma, sangue total ou lavagens da bexiga não são
adequados para este teste.
• Não proceder à colheita de urina durante o período menstrual ou nos dois dias
seguintes.
• Se tiverem sido administrados medicamentos intravesicais, como BCG (Bacillus Calmette-
Guerin), mitocima C, tiotepa, bropiramina (para fins de investigação) ou interferon (para
fins de investigação), só deve ser efectuado um teste, se o médico assim o entender.
• Os testes de BTA não devem ser efectuados após uma cirurgia, biopsia ou qualquer outro
exame invasivo da bexiga ou do tracto urinário. Permitir que decorra tempo suficiente
após esse tipo de intervenção para o doente recuperar do trauma. Ler também as
secções “LIMITES DO TESTE” ou “COMPORTAMENTO FUNCIONAL”.
bioNexia® BTA
TR RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
73

INSTRUÇÕES DE UTILIZAÇÃO
1. A bolsa selada que contém a cassete de teste e a amostra do doente devem ser colocadas
à temperatura ambiente antes de se realizar o teste. Não abrir a bolsa refrigerada para
evitar a condensação de humidade atmosférica na membrana de teste.
2. Abrir a bolsa e retirar a cassete de teste e a pipeta. Eliminar a saqueta desidratante.
3. Misturar por rotação suave a amostra de urina do doente. Encher a pipeta de amostra
fornecida com a amostra de urina do doente e segurá-la em posição vertical por cima do
poço de amostras (conforme ilustrado no guia de referência rápida impresso na caixa) e
colocar três gotas cheias no poço de amostras (S).
4. Iniciar o cronómetro imediatamente após adicionar a amostra.
5. Quando o cronómetro atingir os 5 minutos, ler os resultados no espaço de 1 minuto.
O resultado do teste não é válido se for lido após mais de 6 minutos.
INTERPRETAÇÃO DOS RESULTADOS
Resultado NEGATIVO
Aparece uma linha vermelha na região da linha de controlo (C).
Não aparece qualquer linha vermelha visível na região da linha de teste (T).
Resultado POSITIVO
Aparecem duas linhas vermelhas distintas.
Aparece uma linha na região da linha de controlo (C) e aparece outra linha na região da linha
de teste (T). Uma linha de teste (T) vermelha ligeira deve ser considerada positiva.
Resultado INVÁLIDO
A linha de controlo (C) não aparece. Nenhuma linha vermelha na região de controlo (C)
significa que a migração do teste não foi correctamente efectuada e o resultado do teste é
inválido. Rever o procedimento e repetir o teste com uma nova cassete de teste. Se o problema
persistir, deixar de utilizar a embalagem de teste imediatamente e contactar o distribuidor local.
Ler aos 5 minutos, mas
nunca após 6 minutos. O
resultado do teste não é
válido se for lido passado
6 minutos
3 Gotas de urina
Negativo Negative Positive Positivo Inválido Invalid Inválido Invalid
-
+
x
x
CONTROLO DE QUALIDADE
O teste inclui um controlo de procedimento interno e uma linha colorida (C) indica que a migração
do teste foi correctamente efectuada. Se a linha de controlo não aparecer, o teste é inválido.
É da responsabilidade do utilizador garantir que o controlo de qualidade é efectuado em
conformidade com a legislação local em vigor.
74
410591

FR
LIMITES DO TESTE
• O resultado do teste não deve ser a única base de diagnóstico, deve sim ser avaliado
por um médico confrontando com outras descobertas clínicas e dados de exame e
confirmado por procedimentos de diagnóstico adicionais, se necessário.
• O resultado não deve ser interpretado como evidência absoluta da presença ou ausência
de carcinoma da bexiga urinária. Também foram detectadas concentrações elevadas de
BTA em doentes com doenças benignas, tais como infecções do tracto urinário, pedras
nos rins, nefrite ou trauma da bexiga ou do tracto urinário.
Para além disso, os carcinomas dos rins e/ou TCC (carcinoma das células de transição) do
tracto urinário superior também podem originar níveis aumentados de BTA na urina.
• A sensibilidade clínica do teste de BTA depende da fase do carcinoma da bexiga. Ler
também a secção “COMPORTAMENTO FUNCIONAL”.
• Desconhecem-se os efeitos da radioterapia ou da quimioterapia sistémica no resultado
do teste de BTA, bem como a influência de medicamentos experimentais.
• Algumas doenças benignas como pedras nos rins, nefrite, infecções do tracto urinário ou
algumas doenças venéreas, podem aumentar o número de resultados positivos.
• O cancro dos rins ou o carcinoma urotelial do tracto urinário superior também pode
originar níveis aumentados de BTA.
COMPORTAMENTO FUNCIONAL
Comportamento funcional clínico
Especificidade
Foram testadas 555 amostras de urina de doentes sem carcinoma da bexiga para verificar
a especificidade clínica da cassete de teste bioNexia® BTA. A idade média dos doentes
situava-se nos 55 anos, 48% dos quais homens. Para além de 167 participantes saudáveis,
foram examinados 388 doentes com quadros clínicos variados. Foram agrupados em várias
categorias. Os resultados deste ensaio encontram-se resumidos no quadro seguinte.
Grupo de doentes
Características ou quadros
clínicos
Participantes
saudáveis
Doenças e formas de cancro não geniturinárias
Doenças não
Diabetes, artrite, lúpus,
geniturinárias outras doenças do
colagénio degenerativas
Formas de cancro não
geniturinárias
Quadros clínicos não
geniturinários no total
Doenças geniturinárias benignas
Carcinomas da mama,
pulmões, estômago,
intestinos, leucemia, linfomas
Contagem Especificidade clínica em %
(95% de intervalo de
confiança)
167 95
(90 – 98)
52 98
(89 – 100)
53 89
(77 – 95)
105 93
(87 – 97)
RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
Doenças renais
benignas
Hiperplasia benigna da
próstata
Doenças renais
Pedras nos rins, nefrite
e outras
26 88
(71 – 98)
32 50
(32 – 68)
TR
bioNexia® BTA
75

Várias doenças
geniturinárias
Total de doenças
geniturinárias
76
Prostatite, uretrite, infecções
do tracto urinário,
incontinência, doença venérea
94 76
(65 – 84)
152 72
(65 – 79)
Formas de cancro geniturinárias
Carcinoma da próstata 45 78
(63 – 89)
Cancro renal 7 29
(4 – 71)
Outros tipos de cancro Endometrial, o ovário e
outras formas de carcinoma
Formas de cancro
geniturinárias no total
25 76
(55 – 91)
77 73
(61 – 82)
Trauma geniturinário 54 33
(21 – 47)
A especificidade do teste bioNexia® BTA em 107 doentes com historial de cancro da bexiga
e sem evidências da doença foi de 70% (95% IC): 60 – 79).
Sensibilidade
A sensibilidade clínica do teste bioNexia® BTA foi determinada utilizando 220 amostras
de urina de doentes com tumor da bexiga confirmado por biopsia. A idade média dos
doentes situava-se nos 68 anos, 79% dos quais homens. A fase e grau do tumor, bem como
a sua detecção pelo teste de BTA, são apresentados na tabela seguinte. Não foi possível
determinar uma fase ou um grau para 3 (a) e 12 (b) amostras respectivamente.
Sensibilidade do teste de BTA por fase e grau do tumor
Fase do tumor (a) Número de amostras Sensibilidade clínica em %
(95% de intervalo de confiança)
Ta 111 51 (42 – 61)
Tis 18 61 (36 – 83)
T1 38 89 (75 – 97)
T2-T4 50 88 (76 – 95)
Grau do tumor (b) Número de amostras Sensibilidade clínica em %
(95% de intervalo de confiança)
1 57 42 (29 – 56)
2 56 66 (52 – 78)
3 95 83 (73 – 89)
131 das 220 amostras de urina foram simultaneamente examinadas utilizando métodos citológicos
da urina (citologia urinária). A sensibilidade clínica dos dois métodos e/ou a sensibilidade de
ambos os métodos combinados, são resumidas na tabela seguinte:
410591

RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
TR
FR
Sensibilidade do teste de BTA por fase do tumor
Fase do tumor
Número de
amostras
Teste de
BTA
Sensibilidade clínica em %
(95% de intervalo de confiança)
Citologia urinária
(VUC)
Teste de BTA +VUC
Ta 73 45 (34 – 57) 7 (2 – 15) 49 (37 – 61)
Tis 15 53 (27 – 79) 60 (32 – 84) 80 (52 – 96)
T1 27 85 (66 – 96) 41 (22 – 61) 85 (66 – 96)
T2-T4 16 75 (48 – 93) 38 (15 – 65) 81 (54 – 96)
Os dados indicam que, em particular nas fases iniciais do tumor, o teste de BTA apresenta
uma sensibilidade distintamente superior à citologia urinária. A detecção de tumores Tis
(Tumor in situ) é ligeiramente inferior.
Comportamento funcional analítico
Intervalo de medição do teste bioNexia® BTA
O limite de detecção inferior do teste é aprox. 22,4 U/ml. Até uma concentração de 12
400 U/ml, não se observa reacção de prozona (efeito gancho de concentração elevada). Não
ocorreram concentrações mais elevadas nas amostras testadas.
Repetibilidade
Foram testadas quatro amostras com níveis diferentes de antigénio (2 U/ml, 32 U/ml,
67 U/ml, 292 U/ml) cinquenta vezes (10 testes x 5 replicados) no mesmo dia.
A repetibilidade do ensaio foi avaliada em dois locais. A concordância (consistência) entre
o resultado do teste observado e o resultado esperado, com base na concentração de
antigénio conhecida, foi 100% nos dois locais.
Reprodutibilidade
Precisão inter-ensaios e lote-a-lote foram avaliadas num local. Quatro amostras com níveis
diferentes de antigénio foram testadas dez vezes por dia num total de cinco dias sucessivos
com dois lotes.
A concordância (consistência) entre o resultado do teste observado e o resultado esperado,
com base na concentração de antigénio conhecida, foi apresentada na tabela abaixo.
O consenso foi determinado pelo resultado obtido por pelo menos 2 de 3 leitores.
Amostra Lote Número de
Resultado
consistente
Amostra
Percentagem
de resultados
consistentes
Reprodutibilidade analítica
em % (95% de limite de
confiança)
Dev3 50 100 92,9 – 100,0
(2 U/ml)
Dev4 50 100 92,9 – 100,0
bioNexia® BTA
77

Amostra
(32 U/ml)
Amostra
(67 U/ml)
Amostra
(292 U/ml)
Dev3 50 100 92,9 – 100,0
Dev4 50 100 92,9 – 100,0
Dev3 50 100 92,9 – 100,0
Dev4 50 100 92,9 – 100,0
Dev3 50 100 92,9 – 100,0
Dev4 50 100 92,9 – 100,0
Resultou uma consistência de 100% entre ensaios.
SUBSTÂNCIAS INTERFERENTES
Impacto de substâncias endógenas e exógenas
Para determinar a ocorrência de alguma interferência no teste, foram misturados pools de
urina positivos e negativos para BTA, com as substâncias listadas na tabela seguinte.
O resultado do teste não sofreu impacto com as concentrações seguintes.
Substância
Concentração
Possíveis constituintes da urina (substâncias endógenas)
Hemoglobina
1 mg/ml
Leucócitos
Eritrócitos
Albumina
Bilirrubina (não conjugada) a
IgG
Cloreto de sódio a
Ácido úrico
Ácido ascórbico
Ingredientes farmacêuticos terapêuticos activos
Ampicilina
Doxorrubicina-HCI
Mitomicina C
Nitrofurantoína
Fenazopiridina-HCl a
Tiotepa
106 leucócitos/ml
106 eritrócitos/ml
10 mg/ml
4 μg/ml
100 μg/ml
3,65mg/ml
2,5 mg/ml
50 mg/ml
6 mg/ml
100 μg/ml
100 μg/ml
500 μg/ml
800 μg/ml
100 μg/ml
78
410591

FR
Trimetoprima
Bacillus Calmette Guerin
Finasterida
Flutamida
Ioversol,
1%
74% (meio de contraste para procedimentos imagiológicos) a
Urised b
500 μg/ml
200 μg/ml
25 μg/ml
1 mg/ml
175 μg/ml
a: com concentrações maiores, a intensidade da linha de resultado do teste pode ser
reduzida.
b: devido à coloração intrínseca, a leitura das linhas é impedida em concentrações superiores.
ELIMINAÇÃO DE RESÍDUOS
Proceder à eliminação dos reagentes utilizados ou não utilizados, bem como de quaisquer
outros materiais descartáveis contaminados seguindo os procedimentos para produtos
infecciosos ou potencialmente infecciosos.
É da responsabilidade de cada laboratório gerir os resíduos e os efluentes produzidos
de acordo com a sua natureza e com o grau de perigosidade, e proceder ao tratamento
e eliminação dos mesmos (ou contratar uma entidade para proceder ao seu tratamento e
eliminação) em conformidade com quaisquer normas aplicáveis.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. Robert Koch Institut : Cancer in Germany. 2005/2006. Incidence and Trends. 7th ed. 2010.
p.84-87 HYPERLINK “http://www.rki.de/cln_160/nn_1219822/EN/Content/Health__Reporting/
GBEDownloadsB/KID2010,templateId=raw,property=publicationFile.pdf/KID2010.pdf” http://
www.rki.de/cln_160/nn_1219822/EN/Content/Health__Reporting/GBEDownloadsB/KID2010,
templateId=raw,property=publicationFile.pdf/KID2010.pdf (Accessed Dec 2010)
2. Umiker W.: Accuracy of Cytologic Diagnosis of Cancer of the Urinary Tract. Symposium on
Diagnostic Accuracy of Cytologic Technics 8:186-193,1964.
3. Badalament R.A., Hermansen D.K., et al : The Sensitivity of Bladder Wash Flow Cytometry,
Bladder Wash Cytology, and Voided Cytology in the Detection of Bladder Carcinoma. Cancer
60:1423-1427, 1987.
4. Grossmann H.B.: Markers for Bladder Cancer.
5. Kinders R., Jones T., et al: Complement Factor H or a Related Protein Is a Marker for Transitional
Cell Carcinoma of the Bladder. Clinical Cancer Research 4:2511-2520, 1998.
6. Corey M., Kinders R., et al: Factor H Related Proteins Are Upregulated In Bladder Cancer.
Proceedings of the American Association for Cancer Research 39: 263, 1998.
7. Austyn J. M., Wood K. J.: Principles of Cellular and Molecular Immunology. Oxford University
Press p. 522-554, 1993.
8. Corey M.J., Kinders R.J., et al: Enhancement of Complement-Mediated Lysis of Cancer Cells By
Anti-Factor H Antibodies. Proceedings of the American Association for Cancer Research 39: 304,
1998.
TR RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
bioNexia® BTA
79

9. Sarosdy M.F., Hudson M.A., et al: Improved Detection of Recurrent Bladder Cancer Using the
Bard BTA stat Test. Urology 50(3):349 - 353,1997.
10. Raitanen M.-P., Marttila T., et al: The Bard BTA stat Test in Monitoring of Bladder Cancer. The
Journal of Urology 157: 28, 1997.
QUADRO DE SÍMBOLOS
Símbolo Significado Símbolo Significado
Referência de catálogo
Dispositivo médico
para diagnóstico in vitro
Fabricante
Limites de temperatura
Prazo de validade
Código do lote
Consultar as instruções de
utilização
Não voltar a utilizar
Manter afastado da luz solar
Conteúdo suficiente para “n”
ensaios
80
410591

FR
BIOMERIEUX, o logótipo azul, bioNexia são marcas comerciais utilizadas, pendentes
e/ou registadas, propriedade exclusiva da bioMérieux SA ou de uma das suas filiais.
CLSI é uma marca comercial registada de Clinical and Laboratory Standards Institute Inc.
Qualquer outro nome ou marca comercial é propriedade do respectivo proprietário.
RU
EN
PT
PL
CS
IT
ES
DE
bioMérieux SA
69280 Marcy-l‘Etoile-France
Tel: 33 (0) 478 87 20 00
Fax: 33 (0) 478 87 20 90
www.biomerieux.com/bionexia
RCS LYON 673 620 399
SV
16359 A - 2010/12
TR
bioNexia® BTA
81

82
410591

DE
TR RU PL CS SV PT
IT
ES
EN
FR
AVSEDD ANVÄNDNING
bioNexia® BTA är ett snabbtest för kvalitativ detektion av tumör-associerat antigen i
urinblåsan (Bladder Tumor-associated Antigen, BTA) i humana urinprover. Detta test är
avsett att användas som en hjälp vid screening av högriskpopulationer och monitorering
av patienter med urinblåsecancer. Detta test är endast avsett för professionell in vitrodiagnostisk
användning.
SAMMANFATTNING OCH FÖRKLARING
Incidens
Karcinom i urinblåsan utgör omkring 2 – 3 % av alla maligna tumörer hos människan.
Efter prostatakarcinom är urinblåsekarcinom den näst vanligaste tumörsjukdomen i det
urogenitala systemet.
Etiologi
Faktorer som ökar risken för urinblåsekarcinom är rökning, kronisk cystit, exponering för
aromatiska aminer i yrkeslivet (som t.ex. frisörer, kemisk industri, läder- och färgindustri,
skadedjursbekämpning och annat) (1), strålbehandling av lilla bäckenet, schistosoma
(bilharzia/snäckfeber), balkan-nefropati, kronisk interstitiell nefrit likväl som långvarig
användning av vissa läkemedel (klornafazin, fenacetin, cyklofosfamid), av vilka vissa har
dragits tillbaka från marknaden.
Kliniska symptom
Mikroskopisk eller makroskopisk hematuri uppträder hos omkring 80 % av patienterna, men
detektion av båda formerna uppträder ofta endast intermittent. Andra ofta förekommande
symptom som indikerar urinblåsekarcinom är dysuri och miktionsbesvär, framför allt i fall där
ingen förbättring uppnås med antibiotika. I framskridna stadier kan smärta, urinretention
och vidhängande problem förekomma.
Stadieindelning och differentieringsgrad
I allmänhet görs en differentiering mellan superficiella och infiltrativa tumörer. De olika
stadierna sammanfattas i tabellen nedan; ytterligare underklassificering i a och b kan också
göras (ej med i tabellen). När en diagnos ställs uppvisar omkring 75 – 85 % av patienterna
ett superficiellt, icke-invasivt urinblåsekarcinom (övergångscellskarcinom TCC = Transitional
Cell Carcinoma). För dessa patienter är återfallsrisken 75 %, så de måste kontrolleras
regelbundet för nya utbrott av sjukdomen i efterkontroller.
bioNexia® BTA
83

Stadieindelning
Tx
Primärtumören ej bedömbar
T0
Ingen påvisbar primärtumör
Ta
Icke-invasivt karcinom i mukosa
Tis
Karcinoma in situ: ”flat tumör”
T1
Tumören infiltrerar subepitelet
T2
Tumören infiltrerar muskeln
T3
Tumören infiltrerar perivesikulär vävnad
T4
Tumören infiltrerar intilliggande genitalorgan: prostata, uterus, vagina,
bäcken- eller bukvägg.
En annan viktig gradering för prognos är differentieringsgraden:
Differentieringsgrad
G1
Högt differentierad
G2
Medelhögt differentierad
G3
Lågt differentierad
G4
Anaplastisk
Diagnos
De två mest använda procedurerna för att detektera ett karcinom i urinblåsan är urincytologi
och cystoskopi. Vid urincytologi undersöks urinsediment noggrant för cancerceller eftersom
antalet cancerceller oftast är jämförelsevis lågt. Dessutom påverkar miljön i urinen cellerna,
med den konsekvensen att viktiga karaktäristiska egenskaper för diagnostik kan skymmas.
Ofta finns inga standardprocedurer för insamling och förvaring av prover. Procedurer för
kontrollerad tömning av blåsan tycks ge bäst resultat (2). Ett stor begränsning av denna
diagnostiska procedur är emellertid att klinisk sensitivitet är föremål för avsevärda
fluktuationer och att tumörer i tidiga stadier ofta förbises (2,3).
På grund av klinisk sensitivitet och specificitet anses cystoskopi som diagnostisk
standardprocedur (vid sidan om biopsi). Nackdelen med denna invasiva intervention
är att den är påfrestande för patienten och att endast synliga tumörer identifieras.
Baserat på nackdelarna med ovannämnda diagnostiska procedurer skedde en
intensiv sökning efter tumörmarkörer som kan vara till hjälp vid diagnostisering av
urinblåsekarcinom (4). Med tumör-associerat antigen i urinblåsan (Bladder Tumor-associated
Antigen, BTA) upptäcktes ett protein vars förekomst ofta är förhöjt hos patienter med
urinblåsekarcinom. BTA isolerades endast från flera urinblåsecarcinoma cellinjer och inte
från normala epitelceller. Biokemiskt är BTA ett protein som är nära besläktat med human
84
410591

RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
TR
FR
komplementfaktor H (human komplementfaktor H-relaterat protein, hCFHrp) (5,6). Båda
proteinerna detekteras av de monoklonala antikropparna i testet. Human komplementfaktor
H spelar en viktig hämmande roll vid bildandet av membranattackkomplexet, vilket är det
slutliga steget i komplementkaskaden (7). Det kunde påvisas in vitro att BTA även hämmar
bildandet av membranattackkomplexet. Det var möjligt att stoppa inhiberingen genom att
tillsätta monoklonala antikroppar mot hCFHrp (8). Det är tänkbart att cancerceller undgår
kroppens försvarssystem på det här sättet.
BioNexia® BTA-testkassetten möjliggör detektion av BTA i urin genom specifik antigenantikroppreaktion.
Denna icke-invasiva metod karaktäriseras av en avsevärt högre klinisk
sensitivitet än urincytologi, framför allt för karcinom i de tidigare stadierna.
Vid icke-fastställda fall av mikroskopisk eller makroskopisk hematuri kan en kombination
av båda metoderna öka detektionsfrekvensen. Vid monitorering av patienter med tumör i
urinblåsan stöder testet dessutom bedömning av återfallsrisk och kan hjälpa till att reducera
antalet onödiga cystoskopier och biopsier.
BTA:s användbarhet som en tumörmarkör har bekräftats i flera studier (9,10). Testet är enkelt
att utföra med patientens urin och möjliggör visuell utvärdering av resultatet inom ett par
minuter.
PRINCIP
bioNexia® BTA-testet är en kvalitativ immunokromatografisk analys för detektion av tumörassocierat
antigen i urinblåsan (Bladder Tumor-associated Antigen, BTA) i human urin.
Testet är baserat på två specifika monoklonala antikroppar riktade mot olika BTA-epitoper.
Membranet är överdraget med en monoklonal antikropp vid testlinjen (T) (som visas i
bilden till höger). Den andra antikroppen är färgmärkt.
Om urinprovet innehåller BTA bildas ett
komplex med den färgmärkta antikroppen. När
vätskan rinner över membranet fångas detta
komplex av antikroppen som sitter på mebranet
och en röd linje framträder i testregionen (T).
Om urinprovet inte innehåller BTA kan inte den
Kontrollinje (C)
färgmärkta antikroppen bilda ett komplex och
Synlig i alla giltiga resultat
ingen testlinje framträder i testregionen (T).
Testlinje (T)
Dessutom finns det en kontrollinje för
Synlig i alla positiva prover
testproceduren i kontrollregionen (C).
Denna kontrollinje framträder, oavsett om
BTA förekommer eller ej. Den färgmärkta
antikroppen fångas direkt av get-anti-mus-
Provbrunn (S)
För tillsats av provmaterial
IgG som sitter i kontrollregionen. Kontrollinjen
framträder vid varje giltigt test vilket indikerar
Patient- eller prov-ID
För identifieringssyften
att testmigrationen har utförts korrekt.
bioNexia® BTA
85

KITETS INNEHÅLL (10 TESTER)
10 testkassetter I separat förseglade påsar med en engångspipett för prover
och ett torkmedel. Testkassettens membran är överdraget med
monoklonala musantikroppar riktade mot olika BTA-epitoper.
1 snabbguide tryckt på förpackningen
1 bipacksedel
NÖDVÄNDIGT MATERIAL (SOM INTE MEDFÖLJER)
• Urinprovbehållare
• Använd inte pappers- eller styrofoamkoppar (polystyrenskum).
• Timer
FÖRSIKTIGHETSÅTGÄRDER
• Endast för in vitro-diagnostisk.
• Endast för professionell användning.
• Detta kit innehåller produkter av animaliskt ursprung. Certifierade data angående
ursprunget och/eller hälsotillståndet hos djuren garanterar inte total frånvaro av
överförbara patogena agens. Det rekommenderas därför att dessa produkter behandlas
som potentiellt infektiösa och att de handhas med sedvanliga försiktighetsåtgärder.
• Använd inga reagens efter det utgångsdatum som anges på förpackningen.
• Testkassetten ska förvaras i den förseglade påsen med torkmedel tills den används.
• Testkassetten är för engångsbruk; den ska inte återanvändas.
• Alla prover ska anses infektiösa och behandlas enligt rekommenderade försiktighetsåtgärder
(CLSI® M29-A, Protection of Laboratory Workers from Instrument Biohazards and Infectious
Disease Transmitted by Blood, Body Fluids, and Tissue; Approved Guideline (Skydd av
laboratoriepersonal från biologiskt farliga ämnen och smittsamma sjukdomar överförda via
blod, kroppsvätskor och vävnad; Godkända riktlinjer) – aktuell revidering). För ytterligare
information angående försiktighetsåtgärder vid hantering, se ”Biosafety in Microbiological
and Biomedical Laboratories (Biosäkerhet i mikrobiologiska och biomedicinska laboratorier)
– CDC/NIH – senaste upplagan”, eller de f.n. gällande bestämmelserna i det aktuella landet.
• Använd inte testet om folieförpackningen är skadad.
FÖRVARING OCH STABILITET
• Förvara kitet vid 2 – 30 °C.
• FRYS INTE.
• Vid förvaring enligt rekommendationerna är alla komponenter stabila fram till det
utgångsdatum som anges på förpackningen. Använd inte efter detta datum.
• Testkassetten ska förvaras i påsen tills den används.
PROVTAGNING OCH BEREDNING
1. Prov
Testet utförs med human urin eller urin från en kateteriserad patient.
86
410591

FR
2. Beredning
Ingen speciell beredning av urinproven krävs. Låt proven anta rumstemperatur före analys.
Efter längre tids förvaring, eller om tinade prover används, ska urinen blandas ordentligt före
analys. Om urinen ska användas för andra undersökningar också, samla upp en alikvot om
ungefär 2 ml till BTA-testet först, för att säkerställa att urinprovet inte kontamineras.
3. Förvaring
Urinprover kan förvaras vid rumstemperatur i upp till 4 dagar efter provtagning. Om urinprovet
inte testas direkt ska det förvaras i kylskåp vid 2 – 8 °C i upp till 8 dagar. Ett fruset urinprov som
förvaras vid -19 °C till -31 °C är stabilt i 24 veckor inklusive upp till 3 infrysningar/upptiningar.
Anmärkningar
• Läs igenom följande före provtagning.
• Använd inte pappers- eller styrofoamkoppar (polystyrenskum) för urinprovtagning.
• Använd en ny behållare för varje prov för att undvika korskontaminering.
• Märk urinbehållaren på ett adekvat sätt för att säkerställa korrekt providentifiering.
• Cytologiprover, serum, plasma, helblod eller urin från blåssköljning lämpar sig inte för
testet.
• Ta inte urinprov under menstruationen eller under de följande två dagarna.
• Om intravesikala läkemedel har administrerats, t.ex. BCG (Bacillus Calmette-Guérin),
mitomycin C, tiotepa, bropiramin (i forskningssyfte) eller interferon (i forskningssyfte),
ska ett test utföras enligt läkarens bedömning.
• BTA-tester ska inte utföras efter kirurgiska ingrepp, biopsi eller annan invasiv
undersökning av urinblåsan eller urinvägarna. Låt tillräckligt med tid förflyta efter
sådana interventioner för återhämtning. Läs även avsnitten ”Metodens begränsningar”
eller ”PRESTANDA”.
BRUKSANVISNING
1. Den förseglade påsen med testkassetterna och patientprovet måste anta
rumstemperatur innan testet utförs. Öppna inte den kylda påsen för att undvika
kondens från luftfuktigheten på testmembranet.
2. Öppna påsen, ta ut testkassetten och pipetten. Kasta påsen med torkmedel.
3. Snurra försiktigt patientens urinprov. Fyll den medföljande provpipetten med patientens
urinprov och håll den upprätt ovanför provbrunnen (enligt bilden i snabbguiden på
förpackningen) och överför tre fulla droppar till provbrunnen (S).
4. Starta timern så fort provet har tillsatts.
5. När timern visar 5 minuter, avläs resultatet inom 1 minut. Testresultatet är inte giltigt
om det avläses efter mer än 6 minuter.
RESULTAT OCH TOLKNING
NEGATIVT resultat
En röd linje visas i kontrollregionen (C).
Ingen röd linje visas i testregionen (T).
POSITIVT resultat
Två tydliga röda linjer visas.
TR RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
bioNexia® BTA
87

En linje visas i kontrollregionen (C) och en annan linje visas i testregionen (T). En svag röd
testlinje (T) ska betraktas som positiv.
OGILTIGT resultat
Kontrollinjen (C) visas inte. Avsaknad av röd linje i kontrollregionen (C) betyder att
testmigrationen inte har utförts korrekt och testresultatet är ogiltigt. Granska proceduren
och upprepa testet med en ny testkassett. Om problem kvarstår, upphör genast att använda
testkitet och kontakta din lokala distributör.
Avläs efter 5 minuter
och inte senare än efter
6 minuter. Testresultat
är inte giltigt om det
avläses efter 6 minuter
3 droppar urin
Negativt Negative Positive Positivt Ogiltigt Invalid Ogiltigt Invalid
-
+
x
x
KVALITETSKONTROLL
Testet inkluderar en intern procedurmässig kontroll och en färgad linje (C) anger att
testmigration har utförts korrekt. Om kontrollinjen inte visas är testet ogiltigt.
Det är användarens ansvar att utföra kvalitetskontroll i enlighet med lokala tillämpliga
förhållningsregler.
METODENS BEGRÄNSNINGAR
• Testresultatet ska inte utgöra det enda underlaget för diagnos utan utvärderas av en
läkare tillsammans med andra kliniska observationer och undersökningsdata samt vid
behov bekräftas med ytterligare diagnostiska procedurer.
• Resultatet ska inte tolkas som absolut bevis på närvaro eller frånvaro av
urinblåsekarcinom. Förhöjda BTA-koncentrationer har även detekteras hos patienter
med benigna sjukdomar t.ex. urinvägsinfektioner, njursten, nefrit eller skador på
urinblåsan eller urinvägarna.
Vidare kan karcinom i njurarna och/eller TCC (övergångscellskarcinom) i de övre urinvägarna
också orsaka ökade BTA-nivåer i urin.
• BTA-testets kliniska sensitivitet beror på urinblåsekarcinomets stadium. Läs även
avsnittet ”PRESTANDA”.
• Effekterna av strålbehandling eller systemisk kemoterapi på resultaten från BTA-tester är
okända, liksom påverkan från experimentella läkemedel.
• Vissa benigna sjukdomar t.ex. njursten, nefrit, infektioner i urinvägarna och en del
veneriska sjukdomar, kan öka antalet positiva testresultat.
• Cancer i njurarna eller urotelialt karcinom i de övre urinvägarna kan också orsaka
förhöjda BTA-nivåer.
88
410591

FR
PRESTANDA
Klinisk prestanda
Specificitet
555 urinprover från patienter utan urinblåsekarcinom testades för att verifiera bioNexia®
BTA-testkassettens kliniska specificitet. Den genomsnittliga patientåldern var 55 år, 48 % var
män. Förutom 167 friska individer undersöktes 388 patienter med olika kliniska tillstånd. De
grupperades i olika kategorier. Resultaten från denna undersökning sammanfattas i följande
tabell.
Patientgrupp Kliniska tillstånd Antal Klinisk specificitet i %
(95 % konfidensintervall)
Friska individer 167 95
(90 – 98)
Icke-urogenitala sjukdomar och typer av cancer
Icke-urogenitala
sjukdomar
Icke-urogenitala typer
av cancer
Diabetes, artrit, lupus, andra
kollagena degenerativa
sjukdomar
Karcinom i bröst, lungor,
mage, tarmar, leukemier,
lymfom
52 98
(89 – 100)
53 89
(77 – 95)
Icke-urogenitala kliniska
tillstånd totalt
105 93
(87 – 97)
Benigna urogenitala sjukdomar
Benign prostatahyperplasi 26 88
(71 – 98)
Benigna
njursjukdomar
Njursjukdomar
njursten, nefrit
och andra
32 50
(32 – 68)
Olika urogenitala
sjukdomar
Totalt antal urogenitala
sjukdomar
Prostatit, uretrit,
urinvägsinfektioner,
inkontinens, venerisk
sjukdom
94 76
(65 – 84)
152 72
(65 – 79)
Urogenitala typer av cancer
Prostatakarcinom 45 78
(63 – 89)
Njurcancer 7 29
(4 – 71)
Andra typer av cancer
Urogenitala typer av
cancer totalt
Endometrialkarcinom,
ovariekarcinom och andra
typer av karcinom
25 76
(55 – 91)
77 73
(61 – 82)
TR RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
Urogenitala trauma 54 33
(21 – 47)
bioNexia® BTA
89

Specificiteten för bioNexia® BTA-testet hos 107 patienter med tidigare urinblåsecancer och
inga tecken på sjukdomen var 70 % (95 % CI: 60 – 79).
Sensitivitet
bioNexia® BTA-testets kliniska sensitivitet fastställdes med 220 urinprover från patienter som
fått tumör i urinblåsan bekräftad med biopsi. Den genomsnittliga patientåldern var 68 år, 79 %
var män. Tumörstadium och grad, samt detektion med BTA-testet, presenteras i följande tabell.
Det var inte möjligt att fastställa ett stadium eller en grad för 3 (a) respektive 12 (b) prover.
BTA-testets sensitivitet efter tumörstadium och grad
Tumörstadium (a) Antal prover Klinisk sensitivitet i %
(95 % konfidensintervall)
Ta 111 51 (42 – 61)
Tis 18 61 (36 – 83)
T1 38 89 (75 – 97)
T2-T4 50 88 (76 – 95)
Tumörgrad (b) Antal prover Klinisk sensitivitet i %
(95 % konfidensintervall)
1 57 42 (29 – 56)
2 56 66 (52 – 78)
3 95 83 (73 – 89)
131 av de 220 urinproverna undersöktes samtidigt med urincytologiska metoder (urintest
med urincytologi). De båda metodernas kliniska sensitivitet och/eller sensitiviteten för båda
metoderna kombinerat, sammanfattas i följande tabell.
BTA-testets sensitivitet efter tumörstadium
Klinisk sensitivitet i %
(95 % konfidensintervall)
Tumörstadium Antal prover BTA-test Urintest med
BTA-test + VUC
urincytologi (VUC)
Ta 73 45 (34 – 57) 7 (2 – 15) 49 (37 – 61)
Tis 15 53 (27 – 79) 60 (32 – 84) 80 (52 – 96)
T1 27 85 (66 – 96) 41 (22 – 61) 85 (66 – 96)
T2-T4 16 75 (48 – 93) 38 (15 – 65) 81 (54 – 96)
Informationen visar att BTA-testet, framför allt i de tidigare tumörstadierna, har en påtagligt
högre sensitivitet än urintest med urincytologi. Detektion av Tis-tumörer (tumör in situ) är
något lägre.
90
410591

FR
Analysens prestanda
Mätområde för bioNexia® BTA-testet
Testets nedre detektionsgräns är omkring 22,4 U/ml. Upp till en koncentration på 12 400 U/ml
observeras ingen prozonreaktion (High Dose Hook-effekt). Högre koncentrationer förekom inte
i de testade proverna.
Repeterbarhet
Fyra prover med tillsats av olika nivåer av antigen (2 U/ml, 32 U/ml, 67 U/ml, 292 U/ml)
testades femtio gånger (10 tester x 5 replikat) samma dag.
Analysens repeterbarhet utvärderades vid två laboratorier. Överensstämmelsen
(konsekvensen) mellan det observerade testresultatet och det förväntade resultatet, baserat
på den kända antigenkoncentrationen, var 100 % vid de båda laboratorierna.
Reproducerbarhet
Precision mellan analyser och mellan lot utvärderades vid ett laboratorium. Fyra prover med
tillsats av olika nivåer av antigen analyserades tio gånger varje dag i totalt fem på varandra
följande dagar med två lot.
Överensstämmelsen (konsekvensen) mellan det observerade testresultatet och det
förväntade resultatet, baserat på den kända antigenkoncentrationen listas i tabellen nedan.
Konsensus fastställdes med det resultat som erhölls från minst 2 av de 3 läsarna.
IT
ES DE EN
Prov Lot Antal konsekventa
resultat
Procentandel
konsekventa
resultat
Analysens reproducerbarhet
i % (95 % konfidensgräns)
PT
Prov
Dev3 50 100 92,9 – 100,0
(2 U/ml)
Prov
(32 U/ml)
Prov
(67 U/ml)
Prov
(292 U/ml)
Dev4 50 100 92,9 – 100,0
Dev3 50 100 92,9 – 100,0
Dev4 50 100 92,9 – 100,0
Dev3 50 100 92,9 – 100,0
Dev4 50 100 92,9 – 100,0
Dev3 50 100 92,9 – 100,0
Dev4 50 100 92,9 – 100,0
SV
CS
PL
Det var 100 % överensstämmelse mellan analyserna.
INTERFERERANDE SUBSTANSER
Påverkan av endogena och exogena substanser
För att fastställa om någon testinterferens inträffade blandades BTA-positiva och -negativa
urinpooler med substanserna listade i tabellen nedan.
RU
TR
bioNexia® BTA
91

Testresultatet påverkades inte vid följande koncentrationer.
Substans
Möjliga beståndsdelar i urinen (endogena substanser)
Hemoglobin
Leukocyter
Erytrocyter
Albumin
Bilirubin (okonjugerat) a
IgG
Natriumklorid a
Urinsyra
Askorbinsyra
Terapeutiska aktiva farmaceutiska innehållsämnen
Ampicillin
Doxorubicin-HCl
Mitomycin C
Nitrofurantoin
Fenazopyridin-HCl a
Tiotepa
Trimetoprim
Bacillus Calmette-Guérin
Finasterid
Flutamid
Koncentration
1 mg/ml
106 celler/ml
106 celler/ml
10 mg/ml
4 μg/ml
100 μg/ml
3,65mg/ml
2,5 mg/ml
50 mg/ml
6 mg/ml
100 μg/ml
100 μg/ml
500 μg/ml
800 μg/ml
100 μg/ml
500 μg/ml
200 μg/ml
25 μg/ml
1 mg/ml
Joversol,
74 % (kontrastmedel för avbildningsprocedurer) a 1 %
Urised b
175 μg/ml
a: med förhöjda koncentrationer kan testresultatlinjens intensitet reduceras.
b: på grund av den intrinsiska färgningen hindras avläsningen av linjer för högre
koncentrationer.
AVFALLSHANTERING
Avfallshantering för använda eller oanvända reagenser, liksom för andra kontaminerade
engångsmaterial, ska ske i enlighet med procedurer för infektiösa eller potentiellt infektiösa
produkter.
Det är varje laboratoriums ansvar att handha avfalls- och avloppsprodukter enligt typ och
farlighetsgrad och behandla och avlägsna dem (eller få dem behandlade och avlägsnade) i
enlighet med alla tillämpliga föreskrifter.
92
410591

FR
REFERENSLITTERATUR
1. Robert Koch Institut : Cancer in Germany. 2005/2006. Incidence and Trends. 7th ed. 2010.
p.84-87 HYPERLINK “http://www.rki.de/cln_160/nn_1219822/EN/Content/Health__Reporting/
GBEDownloadsB/KID2010,templateId=raw,property=publicationFile.pdf/KID2010.pdf” http://
www.rki.de/cln_160/nn_1219822/EN/Content/Health__Reporting/GBEDownloadsB/KID2010,
templateId=raw,property=publicationFile.pdf/KID2010.pdf (Accessed Dec 2010)
2. Umiker W.: Accuracy of Cytologic Diagnosis of Cancer of the Urinary Tract. Symposium on
Diagnostic Accuracy of Cytologic Technics 8:186-193,1964.
3. Badalament R.A., Hermansen D.K., et al : The Sensitivity of Bladder Wash Flow Cytometry,
Bladder Wash Cytology, and Voided Cytology in the Detection of Bladder Carcinoma. Cancer
60:1423-1427, 1987.
4. Grossmann H.B.: Markers for Bladder Cancer.
5. Kinders R., Jones T., et al: Complement Factor H or a Related Protein Is a Marker for Transitional
Cell Carcinoma of the Bladder. Clinical Cancer Research 4:2511-2520, 1998.
6. Corey M., Kinders R., et al: Factor H Related Proteins Are Upregulated In Bladder Cancer.
Proceedings of the American Association for Cancer Research 39: 263, 1998.
7. Austyn J. M., Wood K. J.: Principles of Cellular and Molecular Immunology. Oxford University
Press p. 522-554, 1993.
8. Corey M.J., Kinders R.J., et al: Enhancement of Complement-Mediated Lysis of Cancer Cells By
Anti-Factor H Antibodies. Proceedings of the American Association for Cancer Research 39: 304,
1998.
9. Sarosdy M.F., Hudson M.A., et al: Improved Detection of Recurrent Bladder Cancer Using the
Bard BTA stat Test. Urology 50(3):349 - 353,1997.
10. Raitanen M.-P., Marttila T., et al: The Bard BTA stat Test in Monitoring of Bladder Cancer. The
Journal of Urology 157: 28, 1997.
SYMBOLER
SV PT
IT
ES DE EN
Symbol Betydelse Symbol Betydelse
Katalognummer
Medicintekniska produkter
för in vitro-diagnostik
Lotnummer
Se handhavandebeskrivningen
CS
PL
Tillverkare
Återanvänd ej
Temperaturbegränsning
Förvara inte i direkt solljus
RU
Använd före
Räcker till ”n” antal tester
TR
bioNexia® BTA
93

BIOMERIEUX, den blå logotypen och bioNexia är patentsökta och/eller registrerade
varumärken som tillhör och används av bioMérieux SA eller något av dess
dotterbolag.
CLSI är ett registrerat varumärke som tillhör Clinical and Laboratory Standards
Institute Inc.
Alla andra namn eller varumärken tillhör respektive ägare.
bioMérieux SA
69280 Marcy-l‘Etoile-France
Tel: 33 (0) 478 87 20 00
Fax: 33 (0) 478 87 20 90
www.biomerieux.com/bionexia
RCS LYON 673 620 399
16359 A - 2010/12
94
410591

DE
TR RU PL CS SV PT
IT
ES
EN
FR
ÚČEL POUŽITÍ
bioNexia® BTA je rychlý test ke kvalitativnímu stanovení antigenu specifického pro nádory
močového měchýře (BTA) ve vzorcích lidské moči. Tento test je indikován jako pomůcka
pro screening vysoce rizikových populací a ke sledování pacientů s karcinomem močového
měchýře. Test je určen pouze pro profesionální diagnostiku in vitro.
SOUHRN A VYSVĚTLENÍ
Četnost výskytu
Karcinomy močového měchýře představují cca 2 – 3 % z celkového počtu maligních
tumorů v lidské populaci. Karcinom močového měchýře je po karcinomu prostaty druhým
nejčastějším nádorovým onemocněním urogenitální soustavy.
Etiologie
K faktorům zvyšujícím riziko karcinomu močového měchýře patří kouření, chronická
cystitida, vystavení vlivům aromatických aminů v pracovním prostředí (např. kadeřnice,
v chemickém, kožedělném a barvářském průmyslu, při hubení škůdců atd.) (1), radiační
terapie malé pánve, bilharzióza, balkánská nefropatie, chronická intersticiální nefritida
a dlouhodobé užívání některých léků (chlornafazin, fenacetin, cyklofosfamid), z nichž
některé byly staženy z trhu.
Klinické symptomy
Mikro nebo makrohematurie se objevuje u cca 80 % pacientů, ačkoliv ke zjištění obou
forem dochází jen zřídka. K dalším častým symptomům indikujícím karcinom močového
měchýře patří mikční obtíže v rámci dysurie, zejména v případech, kdy antibiotika
nevedou k žádnému zlepšení. V pokročilých fázích se mohou objevit bolesti, retence moči
a doprovodné problémy.
Stádia a stupně diferenciace
Obecně rozlišujeme povrchové a infiltrující nádory. Různá stádia jsou shrnuta v tabulce
níže; je možná i dílčí klasifikace na a a b (neuvedeno). Při stanovení diagnózy má cca
75 – 85 % pacientů povrchový, neinvazivní karcinom močového měchýře (TCC = karcinom
přechodního epitelu). U těchto pacientů existuje 75% riziko recidivy, takže je nutné při
následných vyšetřeních pravidelně kontrolovat, zda nedošlo k relapsu onemocnění.
bioNexia® BTA
95

Stádia onemocnění
Tx
Primární nádor, nelze hodnotit
T0
Bez známek primárního nádoru
Ta
Neinvazivní papilární karcinom
Tis
Karcinom in situ („plochý nádor“)
T1
Nádor se šíří do subepiteliální pojivové tkáně
T2
Nádor se šíří do svalové vrstvy
T3
Nádor se šíří do perivezikální tkáně
T4
Nádor se šíří do okolních orgánů: prostaty, dělohy, pochvy, stěny
pánevní nebo stěny břišní.
Ke stanovení prognózy je důležitý stupeň diferenciace (tzv. grading):
Stupeň diferenciace
G1
Dobře diferencovaný
G2
Středně diferencovaný
G3
Špatně diferencovaný
G4
Anaplastický karcinom
Diagnostika
Ke zjištění karcinomu močového měchýře se nejčastěji používá cytologické vyšetření moči
a cytoskopie. Při cytologickém vyšetření moči se v sedimentech moči zjišťují rakovinné
buňky. Celkový počet buněk je však mnohdy relativně nízký. Tyto buňky se kromě toho
v agresivním prostředí moči rozpadají, a důležité diagnostické charakteristiky tak mohou
být zkreslené. Mnohdy nejsou zavedeny standardní postupy pro odběr a skladování
vzorků. Nejlepších výsledků se zjevně dosahuje při řízeném vyprazdňování měchýře (2).
K významným omezením tohoto diagnostického postupu však patří to, že klinická senzitivita
podléhá značným výkyvům a že nádory v raných stádiích se často přehlédnou (2,3).
Cytoskopie je díky své klinické senzitivitě a specificitě považována za standardní
diagnostický postup (kromě biopsie). Nevýhodou tohoto invazivního zákroku je to, že je
vyčerpávající pro pacienta a že odhalí jen viditelné nádory.
Vzhledem k nevýhodám výše uvedených diagnostických postupů proběhlo intenzivní
pátrání po markerech nádorů, které by mohly usnadnit diagnostiku karcinomu močového
měchýře (4). Společně s antigenem specifickým pro nádory močového měchýře (BTA) byl
objeven protein, jehož výskyt je u pacientů s karcinomem močového měchýře často zvýšený.
Byl izolován z několika buněčných linií karcinomu měchýře, ale ne z běžných epitelových
buněk. Biochemicky je BTA protein, který je úzce příbuzný s lidským komplement faktorem
96
410591

FR
TR RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
H (protein příbuzný s lidským komplement faktorem H, hCFHrp) (5,6). Oba proteiny
jsou v testu zjišťovány pomocí monoklonálních protilátek. Lidský komplement faktor H
hraje důležitou inhibiční roli při tvorbě membranolytického komplexu, což je kaskáda
komplementů, která způsobuje lýzu degenerovaných buněk. Testem in vitro by bylo možné
prokázat, že BTA rovněž inhibuje tvorbu membranolytického komplexu. Inhibici bylo možné
zastavit přidáním monoklonálních protilátek proti hCFHrp (8). Je možné, že rakovinné buňky
takto unikají před obranným systémem organismu.
Kazeta s testem bioNexia® BTA umožňuje detekci BTA v moči pomocí specifické reakce
antigenu na protilátku. Pro tuto neinvazivní metodu je charakteristická podstatně vyšší
klinická citlivost, než je tomu u cytologického vyšetření moči, zejména u karcinomů v raném
stádiu.
U neobjasněných případů mikro a makrohematurie může kombinace obou metod zvýšit
detekční míru. Při sledování pacientů s nádorem měchýře test rovněž napomáhá zhodnocení
rizika relapsu a může pomoci omezit zbytečné cytoskopické nebo bioptické zákroky.
Vhodnost BTA jakožto nádorového markeru byla potvrzena v několika studiích (9,10). Test
se jednoduše provádí pomocí moči pacienta a umožňuje vizuální vyhodnocení výsledku
v řádu několika minut.
PRINCIP
Test bioNexia® BTA je imunochromatografické kvalitativní stanovení ke zjištění antigenu
specifického pro nádory močového měchýře (BTA) v lidské moči.
Test je založen na dvou specifických monoklonálních protilátkách proti různým epitopům
BTA. Na membránu v zóně výsledku testu (T) je předem nanesena monoklonální protilátka
(viz obrázek vpravo). Druhá protilátka je barevně označena.
Když vzorek moči obsahuje BTA, vytvoří
komplex s barevně označenou protilátkou. Když
tekutina teče po membráně, tento komplex
bude zachycen protilátkou imobilizovanou na
membráně a v zóně T se objeví červená linie.
Pokud vzorek moči neobsahuje BTA, barevně
Kontrolní linie (C)
Viditelná u všech platných
označená protilátka nebude schopna vytvořit
výsledků
komplex a v zóně s výsledkem testu (T) se
Linie výsledku testu (T)
neobjeví žádná linie.
Viditelná u všech pozitivních
vzorků
Test dále obsahuje linii pro kontrolu postupu
v kontrolní zóně (C). Tato kontrolní linie se
vytvoří bez ohledu na přítomnost BTA. Barevně
označená protilátka je přímo zachycena
Jamka na vzorek (S)
Pro vložení materiálu vzorku
reagencií (kozí-anti-myší IgG) imobilizovanou
v kontrolní zóně. Kontrolní linie se objeví
Id. č. pacienta nebo vzorku
u každého platného testu a označuje, že při testu
Pro účely identifikace
správně proběhla migrace.
bioNexia® BTA
97

OBSAH SOUPRAVY (10 TESTŮ)
10 kazet s testem V jednotlivých uzavřených pouzdrech s jednorázovou pipetou na
vzorky a vysoušecím prostředkem. Membrána testu v kazetě je pokryta
vrstvou myších monoklonálních protilátek proti různým epitopům BTA.
1 stručný návod pro uživatele vytištěný na krabičce
1 příbalový leták
MATERIÁL, KTERÝ SE VYŽADUJE, AVŠAK NEPOSKYTUJE
• Nádobka na vzorek moči
• Nepoužívejte papírové ani polystyrénové kelímky (z pěnového polystyrénu).
• Časovač
VAROVÁNÍ A BEZPEČNOSTNÍ OPATŘENÍ
• Pouze pro diagnostiku in vitro.
• Pouze pro profesionální použití.
• Souprava obsahuje produkty živočišného původu. Ověřená znalost původu
a/nebo zdravotního stavu živočichů není úplnou zárukou nepřítomnosti přenosných
patogenních agens. Doporučuje se proto, aby se s těmito produkty zacházelo jako
s potenciálně infekčními a při manipulaci se dbalo na běžná bezpečnostní opatření.
• Nepoužívejte reagencie po uplynutí data použitelnosti vyznačeného na obalu.
• Testovací zařízení by se mělo před použitím uchovávat v uzavřeném pouzdře
obsahujícím vysoušecí prostředek.
• Testovací zařízení je na jedno použití, nemělo by se používat opakovaně.
• Všechny vzorky je nutno považovat za infekční a je třeba s nimi zacházet podle
doporučených preventivních opatření (CLSI® M29-A, Protection of Laboratory Workers
from Instrument Biohazards and Infectious Disease Transmitted by Blood, Body Fluids,
and Tissue; Approved Guideline (Ochrana laboratorních pracovníků před nástroji
s biologickými riziky a přenosem infekčních chorob krví, tělními tekutinami a tkáněmi;
schválená směrnice) – aktuální revize). Další informace o bezpečnostních opatřeních
při manipulaci naleznete v publikaci Biosafety in Microbiological and Biomedical
Laboratories (Biologická bezpečnost v mikrobiologických a biomedicínských
laboratořích) – CDC/NIH – poslední vydání, nebo v současných předpisech v zemi použití.
• Je-li fólie obalu poškozená, test nepoužívejte.
SKLADOVÁNÍ A STABILITA
• Soupravu skladujte při teplotě 2 – 30 °C.
• NEZMRAZUJTE.
• Jsou-li všechny složky skladovány za doporučených podmínek, jsou stabilní, a to až do
data uplynutí použitelnosti vyznačeného na obalu. Materiál nepoužívejte po uplynutí
data jeho použitelnosti.
• Testovací zařízení by mělo před použitím zůstat v pouzdře.
98
410591

FR
ODBĚR A PŘÍPRAVA VZORKŮ
1. Vzorek
Test se provádí z lidské moči nebo moči od katetrizovaného pacienta.
TR RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
2. Příprava
Žádná zvláštní příprava vzorků moči není nutná. Vzorky musí mít před testováním
pokojovou teplotu. Po dlouhodobém skladování nebo v případě rozmrazených vzorků je
nutné moč před testováním důkladně promíchat. Má-li být moč použita i pro jiná vyšetření,
nejdříve odeberte alikvotní množství cca 2 ml pro BTA test, aby bylo zajištěno, že nedojde
ke kontaminaci vzorku moči.
3. Skladování
Vzorky moči lze skladovat při pokojové teplotě až 4 dny po odběru. Nebude-li vzorek moči
testován okamžitě, je nutno jej uložit v chladu při teplotě 2 – 8 °C na dobu maximálně
8 dnů. Zmrazený vzorek moči uložený při teplotě -19 °C až -31 °C je stabilní po dobu
24 týdnů a maximálně 3 cyklů zmrazení a rozmrazení.
Poznámky
• Před odběrem vzorku si prosím přečtěte tyto poznámky.
• Pro odběr vzorků moči nepoužívejte papírové ani polystyrénové kelímky (z pěnového
polystyrénu).
• Pro každý vzorek použijte novou nádobku, aby nedošlo ke křížové kontaminaci.
• Nádobku s močí vhodně označte, aby byla zajištěna správná identifikace vzorku.
• Vzorky pro cytologické vyšetření, sérum, plazma, plná krev ani výplachy močového
měchýře nejsou pro test vhodné.
• Moč neodebírejte v době menstruace ani dva dny poté.
• Jestliže byly léky podávány intravezikálně, např. BCG (Bacillus Calmette-Guérin),
mitomycin C, thiotepa, bropiramin (pro účely výzkumu) nebo interferon (pro účely
výzkumu), test by měl být proveden podle uvážení lékaře.
• BTA testy není vhodné provádět po chirurgickém zákroku, biopsii nebo jiném invazivním
vyšetření měchýře nebo močového traktu. Po těchto zákrocích je nutné vyčkat
dostatečně dlouhou dobu, aby se rána zahojila. Přečtěte si prosím také části „Omezení
metody“ nebo „CHARAKTERISTIKY“.
NÁVOD K POUŽITÍ
1. Uzavřené pouzdro obsahující kazety s testem a vzorek od pacienta musí mít před
provedením testu pokojovou teplotu. Chlazené pouzdro neotvírejte, aby nedošlo ke
kondenzaci vzdušné vlhkosti na membráně testu.
2. Otevřete pouzdro, vyjměte kazetu s testem a pipetu. Sáček s vysoušecím prostředkem vyhoďte.
3. Vzorkem moči od pacienta jemně zakružte. Do dodané pipety nasajte vzorek moči
pacienta a držte ji svisle nad jamkou na vzorek (podle obrázku ve stručném návodu na
krabičce) a do jamky na vzorek (S) vložte tři celé kapky.
4. Ihned po vložení vzorku spusťte časovač.
5. Po uplynutí 5 minut na časovači odečtěte výsledek, a to do 1 minuty. Výsledek testu
odečtený po době delší než 6 minut není platný.
bioNexia® BTA
99

INTERPRETACE VÝSLEDKŮ
NEGATIVNÍ výsledek
V kontrolní zóně (C) se objeví jedna červená linie.
V zóně výsledku testu (T) se neobjeví červená linie.
POZITIVNÍ výsledek
Objeví se dvě zřetelné červené linie.
Jedna linie se objeví v kontrolní zóně (C) a druhá linie se objeví v zóně s výsledkem testu (T).
Slabá červená linie testu (T) označuje pozitivní výsledek.
NEPLATNÝ výsledek
Kontrolní linie (C) se neobjeví. Pokud se v kontrolní zóně (C) neobjeví červená linie,
znamená to, že migrace neproběhla správně a výsledek testu je neplatný. Zkontrolujte
postup a test zopakujte s novou kazetou. Pokud problém přetrvává, testovací soupravu
ihned přestaňte používat a kontaktujte místního distributora.
Výsledek odečíst za
5 minut, ale nejpozději
za 6 minut. Výsledek
testu není platný, je-li
odečten déle než po
6 minutách.
3 kapky moči
Negativní Negative Pozitivní Positive Neplatný Invalid Neplatný Invalid
-
+
x
x
KONTROLA KVALITY
Test obsahuje vnitřní kontrolu postupu a barevná linie (C) označuje, že migrace při testu
proběhla správně. Pokud se kontrolní linie neobjeví, test je neplatný.
Uživatel nese odpovědnost za provádění kontroly kvality v souladu se všemi platnými
místními předpisy.
OMEZENÍ METODY
• Diagnóza by neměla být stanovena pouze na základě výsledku testu. Lékař musí
výsledek testu zhodnotit společně s dalšími klinickými nálezy a údaji z vyšetření a podle
potřeby jej potvrdit doplňujícími diagnostickými postupy.
• Výsledek nesmí být interpretován jako absolutní důkaz existence nebo neexistence
karcinomu močového měchýře. Zvýšené koncentrace BTA byly rovněž zjištěny
u pacientů s benigními onemocněními, např. infekcemi močových cest, ledvinovými
kameny, nefritidou nebo traumatem měchýře či močových cest.
Karcinomy ledvin nebo TCC (karcinom přechodního epitelu) horních močových cest mohou
také způsobovat zvýšené hladiny BTA v moči.
• Klinická citlivost BTA testu závisí na stádiu karcinomu měchýře. Přečtěte si prosím také
část „CHARAKTERISTIKY“.
• Vlivy radiační terapie nebo systémové chemoterapie na výsledek BTA testu nejsou
známy, stejně jako vliv experimentálních léčiv.
100
410591

FR
• Počet pozitivních výsledků testu mohou zvýšit některá benigní onemocnění, například
ledvinové kameny, nefritida, infekce močových cest nebo některé venerické choroby.
• Zvýšené hladiny BTA může také zvýšit karcinom ledvin nebo uroteliální karcinom horních
močových cest.
CHARAKTERISTIKY
Klinické charakteristiky
Specificita
K ověření klinické specificity kazety s testem bioNexia® BTA bylo testováno 555 vzorků moči od
pacientů bez karcinomu močového měchýře. Průměrné stáří pacientů bylo 55 let, 48 % tvořili
muži. Kromě 167 zdravých subjektů bylo vyšetřeno 388 pacientů s různými klinickými obrazy.
Ti byli zařazeni do různých kategorií. Výsledky této studie jsou shrnuty v následující tabulce.
Skupina pacientů
Charakteristika nebo
klinický obraz
Počet Klinická specificita v %
(95% interval spolehlivosti)
Zdravé subjekty 167 95
(90 – 98)
Jiná než urogenitální onemocnění a formy rakoviny
Jiná než urogenitální
onemocnění
Jiné než urogenitální
formy rakoviny
Jiné než urogenitální
klinické obrazy celkem
Benigní urogenitální onemocnění
Diabetes, artritida, lupus,
jiná kolagenová degenerativní
onemocnění
Karcinomy prsu, plic, žaludku,
střev, leukémie, lymfomy
52 98
(89 – 100)
53 89
(77 – 95)
105 93
(87 – 97)
PT
IT
ES DE EN
Benigní onemocnění
ledvin
Různá urogenitální
onemocnění
Urogenitální onemocnění
celkem
bioNexia® BTA
Benigní prostatická
hyperplazie
Onemocnění ledvin
ledvinové kameny, nefritida
a jiné
Prostatitida, uretritida,
infekce močových cest,
inkontinence, venerické
onemocnění
26 88
(71 – 98)
32 50
(32 – 68)
94 76
(65 – 84)
152 72
(65 – 79)
Urogenitální formy rakoviny
Karcinom prostaty 45 78
(63 – 89)
Rakovina ledvin 7 29
(4 – 71)
Jiné typy rakoviny Karcinom endometria, vaječníků
a jiné formy karcinomu
25 76
(55 – 91)
Urogenitální formy
rakoviny celkem
77 73
(61 – 82)
Urogenitální trauma 54 33
(21 – 47)
TR RU PL CS SV
101

Specificita testu bioNexia® BTA u 107 pacientů s rakovinou měchýře v anamnéze, u kterých
toto onemocnění nebylo prokázáno, byla 70 % (95 % Cl: 60 – 79).
Citlivost
Klinická citlivost testu bioNexia® BTA byla stanovena pomocí 220 vzorků moči od pacientů,
u kterých byl nádor měchýře potvrzen biopsií. Průměrné stáří pacientů bylo 68 let,
79 % tvořili muži. Stádium a stupeň nádoru a jeho stanovení BTA testem jsou uvedeny
v následující tabulce. U 3 (a), respektive 12 (b) vzorků nebylo možné stanovit stádium nebo
stupeň diferenciace.
Citlivost BTA testu podle stádia a stupně diferenciace nádoru
Stádium nádoru (a) Počet vzorků Klinická citlivost v %
(95 % interval spolehlivosti)
Ta 111 51 (42 – 61)
Tis 18 61 (36 – 83)
T1 38 89 (75 – 97)
T2-T4 50 88 (76 – 95)
Stupeň diferenciace
nádoru (a)
Počet vzorků Klinická citlivost v %
(95 % interval spolehlivosti)
1 57 42 (29 – 56)
2 56 66 (52 – 78)
3 95 83 (73 – 89)
131 z 220 vzorků moči bylo simultánně vyšetřeno cytologickými metodami (cytologické
vyšetření moči z vyprázdněného měchýře). Klinická citlivost těchto dvou metod, případně
citlivost kombinace obou metod, je uvedena v následující tabulce.
Citlivost BTA testu podle stádia nádoru
Klinická citlivost v %
(95 % interval spolehlivosti)
Stádium
nádoru
Počet vzorků BTA test Cytologické vyšetření
moči z vyprázdněného
měchýře (Voided Urine
Cytology – VUC)
BTA test + VUC
Ta 73 45 (34 – 57) 7 (2 – 15) 49 (37 – 61)
Tis 15 53 (27 – 79) 60 (32 – 84) 80 (52 – 96)
T1 27 85 (66 – 96) 41 (22 – 61) 85 (66 – 96)
T2-T4 16 75 (48 – 93) 38 (15 – 65) 81 (54 – 96)
Z údajů vyplývá, že zejména v raných stádiích nádoru má BTA test výrazně vyšší citlivost než
metoda VUC. Detekce nádorů ve stádiu Tis (tumor in situ) je nepatrně nižší.
102
410591

FR
Analytické charakteristiky
Měření rozsahu testu bioNexia® BTA
Spodní mez detekce testu je cca 22,4 U/ml. Až do koncentrace 12 400 U/ml není pozorována
žádná reakce prozóny (tzv. High Dose Hook Effect). Vyšší koncentrace se u testovaných
vzorků neobjevovaly.
Opakovatelnost
V jednom dni byly padesátkrát (10 testů x 5 opakování) testovány čtyři vzorky s různými
hladinami přidaného antigenu (2 U/mL, 32 U/mL, 67 U/mL, 292 U/mL).
Opakovatelnost stanovení byla hodnocena na dvou pracovištích. Na obou pracovištích byla
shoda (konzistence) mezi zjištěným výsledkem testu a očekávaným výsledkem na základě
známé koncentrace antigenu 100 %.
Reprodukovatelnost
Přesnost různých stanovení a různých šarží byla hodnocena na jednom pracovišti. Čtyři vzorky
s různými hladinami přidaného antigenu byly testovány dvěma šaržemi testu desetkrát každý
den po dobu pěti po sobě jdoucích dnů.
Shoda (konzistence) mezi zjištěným výsledkem testu a očekávaným výsledkem na základě
známé koncentrace antigenu byla zapsána do následující tabulky. Shoda byla stanovena
podle výsledku získaného alespoň od 2 ze 3 osob odečítajících výsledky.
IT
ES DE EN
Vzorek Šarže Počet
konzistentních
výsledků
Procento
konzistentních
výsledků
Analytická
reprodukovatelnost v %
(95 % interval spolehlivosti)
PT
Vzorek
Dev3 50 100 92,9 – 100,0
(2 U/ml)
Vzorek
(32 U/ml)
Vzorek
(67 U/ml)
Vzorek
(292 U/ml)
Dev4 50 100 92,9 – 100,0
Dev3 50 100 92,9 – 100,0
Dev4 50 100 92,9 – 100,0
Dev3 50 100 92,9 – 100,0
Dev4 50 100 92,9 – 100,0
Dev3 50 100 92,9 – 100,0
Dev4 50 100 92,9 – 100,0
SV
CS
PL
Konzistence mezi stanoveními byla 100 %.
INTERFERUJÍCÍ LÁTKY
Vliv endogenních a exogenních látek
Ke stanovení, zda došlo k ovlivnění testu, byly směsné vzorky BTA pozitivní a negativní moči
smíchány s látkami uvedenými v následující tabulce.
RU
TR
bioNexia® BTA
103

Výsledek testu nebyl ovlivněn při níže uvedených koncentracích.
Látka
Možné složky moči (endogenní látky)
Hemoglobin
Leukocyty
Erytrocyty
Albumin
Bilirubin (nekonjugovaný) a
IgG
Chlorid sodný a
Kyselina močová
Kyselina askorbová
Terapeuticky aktivní farmaceutické ingredience
Ampicilin
Doxorubicin-HCl
Mitomycin C
Nitrofurantoin
Fenazopyridin-HCl a
Thiotepa
Trimetoprim
Bacillus Calmette-Guérin
Finasterid
Koncentrace
1 mg/ml
106 buněk/ml
106 buněk/ml
10 mg/ml
4 μg/ml
100 μg/ml
3,65 mg/ml
2,5 mg/ml
50 mg/ml
6 mg/ml
100 μg/ml
100 μg/ml
500 μg/ml
800 μg/ml
100 μg/ml
500 μg/ml
200 μg/ml
25 μg/ml
Flutamid
1 mg/ml
Ioversol,
74% (kontrastní látka pro zobrazovací metody) a 1 %
Urised b
175 μg/ml
a: intenzita linie výsledku testu se může snižovat se zvyšujícími se koncentracemi.
b: vzhledem k vlastnímu zbarvení je odečítání linií u vyšších koncentrací ztíženo.
LIKVIDACE ODPADU
Použité a nepoužité reagencie a rovněž další kontaminované jednorázové materiály
zlikvidujte podle postupů pro infekční nebo potenciálně infekční produkty.
Každá laboratoř je zodpovědná za to, aby s odpadem a vypouštěnými látkami nakládala
podle jejich povahy a stupně nebezpečnosti a zacházela s nimi a likvidovala je (nebo je
nechala likvidovat jinými subjekty) v souladu se všemi platnými předpisy.
104
410591

FR
LITERATURA
1. Robert Koch Institut : Cancer in Germany. 2005/2006. Incidence and Trends. 7th ed. 2010.
p.84-87 HYPERLINK “http://www.rki.de/cln_160/nn_1219822/EN/Content/Health__Reporting/
GBEDownloadsB/KID2010,templateId=raw,property=publicationFile.pdf/KID2010.pdf” http://
www.rki.de/cln_160/nn_1219822/EN/Content/Health__Reporting/GBEDownloadsB/KID2010,
templateId=raw,property=publicationFile.pdf/KID2010.pdf (Accessed Dec 2010)
2. Umiker W.: Accuracy of Cytologic Diagnosis of Cancer of the Urinary Tract. Symposium on
Diagnostic Accuracy of Cytologic Technics 8:186-193,1964.
3. Badalament R.A., Hermansen D.K., et al : The Sensitivity of Bladder Wash Flow Cytometry,
Bladder Wash Cytology, and Voided Cytology in the Detection of Bladder Carcinoma. Cancer
60:1423-1427, 1987.
4. Grossmann H.B.: Markers for Bladder Cancer.
5. Kinders R., Jones T., et al: Complement Factor H or a Related Protein Is a Marker for Transitional
Cell Carcinoma of the Bladder. Clinical Cancer Research 4:2511-2520, 1998.
6. Corey M., Kinders R., et al: Factor H Related Proteins Are Upregulated In Bladder Cancer.
Proceedings of the American Association for Cancer Research 39: 263, 1998.
7. Austyn J. M., Wood K. J.: Principles of Cellular and Molecular Immunology. Oxford University
Press p. 522-554, 1993.
8. Corey M.J., Kinders R.J., et al: Enhancement of Complement-Mediated Lysis of Cancer Cells By
Anti-Factor H Antibodies. Proceedings of the American Association for Cancer Research 39: 304,
1998.
9. Sarosdy M.F., Hudson M.A., et al: Improved Detection of Recurrent Bladder Cancer Using the
Bard BTA stat Test. Urology 50(3):349 - 353,1997.
10. Raitanen M.-P., Marttila T., et al: The Bard BTA stat Test in Monitoring of Bladder Cancer. The
Journal of Urology 157: 28, 1997.
VYSVĚTLIVKY K SYMBOLŮM
SV PT
IT
ES DE EN
Symbol Význam Symbol Význam
Katalogové číslo
In vitro diagnostický
zdravotnický prostředek
Číslo šarže
Viz návod k použití
CS
PL
Výrobce
Pro jednorázové použití
Teplotní rozmezí od do
Udržujte mimo přímé sluneční
záření
RU
Použitelné do
Lze použít pro testů
TR
bioNexia® BTA
105

BIOMERIEUX, modré logo a bioNexiaT jsou používané, přihlášené a/nebo
registrované ochranné známky společnosti bioMérieux SA nebo některé z jejích
dceřiných společností.
Jakýkoliv další název nebo zapsaná ochranná známka jsou majetkem jejich
příslušných držitelů.
CLSI je registrovaná ochranná známka institutu Clinical and Laboratory Standards
Institute Inc.
bioMérieux SA
69280 Marcy-l‘Etoile-France
Tel: 33 (0) 478 87 20 00
Fax: 33 (0) 478 87 20 90
www.biomerieux.com/bionexia
RCS LYON 673 620 399
16359 A - 2010/12
106
410591

EN
TR RU PL CS SV PT
IT
ES DE
FR
ZASTOSOWANIE
bioNexia® BTA jest szybkim jakościowym testem przeznaczonym do wykrywania antygenu
powiązanego z nowotworem pęcherza moczowego (Bladder Tumor-associated Antigen; BTA)
w próbkach ludzkiego moczu. Test jest przeznaczony do stosowania jako pomoc w badaniach
przesiewowych populacji wysokiego ryzyka oraz w monitorowaniu pacjentów z rakiem pęcherza.
Test jest przeznaczony wyłącznie do specjalistycznego zastosowania w diagnostyce in vitro.
STRESZCZENIE I OBJAŚNIENIA
Występowanie
Nowotwory złośliwe pęcherza moczowego stanowią ok. 2 – 3% wszystkich guzów
złośliwych występujących u człowieka. Rak pęcherza jest po raku prostaty drugim pod
względem częstości występowania guzem układu moczowo-płciowego.
Etiologia
Wśród czynników zwiększających ryzyko raka pęcherza moczowego wymienia się: palenie
tytoniu, chroniczne zapalenie pęcherza moczowego, ekspozycję na aminy aromatyczne
w środowisku pracy (np. narażeni są fryzjerzy, pracownicy przemysłu chemicznego,
skórzanego, farb i lakierów, osoby pracujące przy zwalczaniu szkodników i inni) (1),
radioterapię w obrębie miednicy mniejszej, bilharcjozę, nefropatię bałkańską, chroniczne
śródmiąższowe zapalenie nerek, jak również długotrwałe przyjmowanie określonych leków
(chlornafazyna, fenacetyna, cyklofosfamid), z których część została wycofana z rynku.
Objawy kliniczne
Mikro– lub makrohematuria występują u ok. 80% pacjentów, chociaż wykrycie obu form
zdarza się niezwykle rzadko. Innymi objawami, które często wskazują na raka pęcherza
moczowego są trudności w oddawaniu moczu, szczególnie w przypadkach, w których
zastosowanie antybiotyków nie przyniosło poprawy. W zaawansowanych stadiach mogą
występować ból i zatrzymanie moczu oraz towarzyszące komplikacje.
Klasyfikacja i stopień zróżnicowania
Ogólnie, rozróżnia się guzy powierzchowne i naciekające. Poniższa tabela opisuje różne
stopnie zaawansowania choroby; możliwy jest również dalszy podział na podklasy
a i b (nie pokazano). W momencie postawienia diagnozy u ok. 75 – 85% pacjentów
stwierdza się obecność powierzchownego, nieinwazyjnego guza pęcherza moczowego
(rak przejściowokomórkowy pęcherza moczowego — Transitional Cell Carcinoma; TCC).
U wymienionych pacjentów występuje 75% ryzyko nawrotu choroby. Z tego powodu muszą
się oni poddawać regularnym badaniom kontrolnym pod tym kątem.
bioNexia® BTA
107

Klasyfikacja
Tx
Nie można ocenić guza pierwotnego
T0
Nie stwierdza się guza pierwotnego
Ta
Nieinwazyjny guz brodawczakowaty
Tis
Rak śródnabłonkowy (in situ): „rak płaski”
T1
Guz nacieka podnabłonkową tkankę łączną
T2
Guz nacieka błonę mięśniową
T3
Guz nacieka tkankę okołopęcherzową
T4
Guz nacieka jeden z następujących organów: gruczoł krokowy, macicę,
pochwę, ścianę miednicy lub ścianę jamy brzusznej.
Innym ważnym czynnikiem prognostycznym jest stopień zróżnicowania:
Stopień zróżnicowania
G1
Dobrze zróżnicowany
G2
Średnio zróżnicowany
G3
Słabo zróżnicowany
G4
Rak anaplastyczny
Diagnoza
Badaniami najczęściej stosowanymi w celu wykrycia raka pęcherza są cytologia moczu
oraz cystoskopia. W badaniu cytologicznym osad moczu jest oceniany pod kątem
obecności komórek nowotworowych. Niestety całkowita zawartość komórek jest często
relatywnie niska. Ponadto warunki panujące w pęcherzu niekorzystnie oddziałują na
komórki, czego konsekwencją może być zniekształcenie informacji diagnostycznej. Często
w miejscu wykonywania badań nie ma opracowanych standardowych procedur pobierania
i przechowywania próbek. Procedury kontrolowanego oddawania moczu pozwalają uzyskać
najlepsze wyniki (2). Jednakże głównym ograniczeniem procedury diagnostycznej są znaczne
fluktuacje czułości klinicznej oraz częsty fakt przeoczenia guza w jego wczesnym stadium (2, 3).
Z uwagi na czułość kliniczną i swoistość, za standardową procedurę diagnostyczną
(poza biopsją) uważa się cystoskopię. Wadą tego inwazyjnego badania jest to, że jest
ono wyczerpujące dla pacjenta i umożliwia identyfikację wyłącznie widocznych guzów.
Ze względu na wady wspomnianych wyżej procedur diagnostycznych przeprowadzono
intensywne poszukiwania markerów nowotworowych, które mogłyby być pomocne
w diagnozowaniu raka pęcherza moczowego (4). Odkryto białko, antygen związany
z nowotworem pęcherza moczowego (BTA), często występujące w podwyższonym
stężeniu u pacjentów chorujących na raka pęcherza. Zostało ono wyizolowane z kilku linii
108
410591

FR
komórkowych raka pęcherza, ale nie z prawidłowych komórek nabłonka. Pod względem
biochemicznym BTA jest białkiem blisko spokrewnionym z ludzkim czynnikiem H dopełniacza
(human complement factor H-related protein; hCFHrp) (5, 6). Oba białka można wykryć za
pomocą testu wykorzystującego przeciwciała monoklonalne. Ludzki czynnik H dopełniacza
odgrywa ważną rolę inhibitora tworzenia się kompleksu atakującego błonę. Kompleks ten
jest elementem kaskady dopełniacza (7) i jest odpowiedzialny za lizę zdegenerowanych
komórek. Udowodniono w warunkach in vitro, że BTA hamuje również tworzenie się kompleksu
atakującego błonę. Proces tworzenia tego kompleksu można ponownie uaktywnić poprzez
dodanie przeciwciał monoklonalnych przeciwko hCFHrp (8). Niewykluczone, że w taki właśnie
sposób komórki nowotworowe wymykają się kontroli układu odpornościowego.
Kaseta z testem bioNexia® BTA umożliwia wykrywanie BTA w moczu dzięki swoistej reakcji
antygen–przeciwciało. To nieinwazyjne podejście charakteryzuje się znacznie wyższą
czułością kliniczną niż cytologia moczu, szczególnie w przypadku nowotworów we
wczesnych stadiach zaawansowania.
Kombinacja obu metod może zwiększyć częstość wykrywania w nierozstrzygniętych
przypadkach mikro– i makrohematurii. Test jest również pomocny w oszacowaniu ryzyka
nawrotu podczas monitorowania pacjentów z guzem pęcherza i może pomóc zredukować
niepotrzebne cystoskopie i biopsje.
Przydatność stosowania BTA jako markera nowotworowego została potwierdzona w kilku
badaniach klinicznych (9, 10). Kaseta z testem napełniana moczem pacjenta umożliwia
ocenę wizualną wyniku w ciągu kilku minut.
ZASADA
bioNexia® BTA jest jakościowym immunochromatograficznym testem przeznaczonym
do wykrywania antygenu powiązanego z nowotworem pecherza moczowego (BTA)
w ludzkim moczu.
Test jest oparty na wykorzystaniu dwóch swoistych przeciwciał monoklonalnych przeciwko
różnym epitopom BTA. Membrana jest
wstępnie pokryta pierwszym przeciwciałem
monoklonalnym w obszarze linii testu (T) (jak
pokazano na rysunku po prawej stronie). Drugie
przeciwciało jest znakowane kolorem.
Linia kontrolna (C)
Jeżeli próbka moczu zawiera BTA, utworzy
Widoczna na wszystkich
ważnych testach
on kompleks z przeciwciałem znakowanym
Linia testu (T)
kolorem. Kiedy mocz przeniknie przez
Widoczna dla wszystkich
membranę, kompleks zostanie związany
próbek o wyniku
pozytywnym
przez przeciwciało pokrywające membranę,
a w obszarze T pojawi się czerwona linia.
Jeżeli próbka moczu nie zawiera BTA,
Studzienka na próbkę (S)
przeciwciało znakowane kolorem nie będzie
Do aplikacji próbki
mogło utworzyć kompleksu i w obszarze
Numer identyfikacyjny
linii testu (T) nie pojawi się żadna linia.
pacjenta lub próbki
TR RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
Do celów identyfikacyjnych
bioNexia® BTA
109

Ponadto test zawiera proceduralną linię kontrolną w obszarze kontrolnym (C). Linia
kontrolna pojawi się niezależnie od obecności BTA w próbce. Przeciwciało znakowane
kolorem jest bezpośrednio wiązane przez odczynnik (kozie przeciwciało IgG przeciwko
mysiemu antygenowi) pokrywający obszar kontrolny. Linia kontrolna pojawi się dla każdego
ważnego testu, oznaczając prawidłową migrację próbki.
ZAWARTOŚĆ ZESTAWU (10 TESTÓW)
10 Kaset z testem Pojedyncze, zapieczętowane woreczki z jednorazową pipetą
do próbek oraz osuszaczem. Membrana kasety z testem jest
pokryta przeciwciałami monoklonalnymi myszy przeciwko różnym
epitopom BTA.
1 Skrócona instrukcja obsługi wydrukowana na pudełku
1 Ulotka informacyjna
MATERIAŁY WYMAGANE, ALE NIE WCHODZĄCE W SKŁAD ZESTAWU
• Pojemnik na próbki moczu
• Nie używać pojemników papierowych ani styropianowych (z pianki polistyrenowej).
• Zegar
OSTRZEŻENIA I ŚRODKI OSTROŻNOŚCI
• Tylko do diagnostyki in vitro.
• Wyłącznie do specjalistycznego zastosowania.
• Zestaw ten zawiera produkty pochodzenia zwierzęcego. Wiedza o pochodzeniu i/lub
o stanie sanitarnym zwierząt nie gwarantują całkowicie braku czynników zakaźnych.
Dlatego zaleca się, aby te produkty były traktowane jako potencjalnie zakaźne.
Posługując się nimi, należy przestrzegać środków ostrożności.
• Nie używać odczynników po upływie terminu ważności wskazanego na opakowaniu.
• Do momentu użycia, urządzenie testujące musi być przechowywane
w zapieczętowanym woreczku zawierającym osuszacz.
• Urządzenie testujące jest jednorazowego użytku.
• Wszystkie odczynniki powinny być traktowane jako potencjalnie zakaźne. Posługując się
nimi, należy przestrzegać środków ostrożności, zgodnie z dokumentem: CLSI® M29-A,
„Protection of Laboratory Workers from Instrument Biohazards and Infectious Disease
Transmitted by Blood, Body Fluids, and Tissue; Approved Guideline — Bieżąca wersja”
(Ochrona pracowników laboratoriów przed zagrożeniem biologicznym związanym
z korzystaniem z urządzeń oraz przed chorobami zakaźnymi przenoszonymi przez krew,
płyny fizjologiczne oraz tkanki; Zatwierdzona wytyczna — Bieżąca wersja). Dodatkowe
środki ostrożności zawarte są w dokumencie „Biosafety in Microbiological and
Biomedical Laboratories – CDC/NIH – Ostatnie wydanie” (Bezpieczeństwo biologiczne
w laboratoriach mikrobiologicznych i biomedycznych – CDC/NIH – Ostatnie wydanie)
lub są regulowane przepisami właściwymi dla poszczególnych państw.
• Nie używać testu, jeżeli opakowanie foliowe jest uszkodzone
110
410591

FR
WARUNKI PRZECHOWYWANIA I STABILNOŚĆ
• Przechowywać zestaw w temperaturze 2 – 30°C.
• NIE ZAMRAŻAĆ.
• Jeśli zestaw przechowywany jest w zalecanych warunkach, wszystkie składniki są
stabilne do upływu terminu ważności wskazanego na opakowaniu. Nie używać po
upływie terminu ważności.
• Urządzenie testujące powinno znajdować się w zapieczętowanych woreczkach do czasu użycia.
POBIERANIE I PRZYGOTOWYWANIE PRÓBEK
1. Próbka
Test wykonuje się na próbce moczu ludzkiego, w tym także pobranego od cewnikowanego
pacjenta.
2. Przygotowanie
Nie jest wymagane specjalne przygotowanie próbek moczu. Przed wykonaniem testu próbki
należy umieścić w temperaturze pokojowej. Po dłuższym okresie przechowywania lub
w przypadku rozmrożonych próbek mocz należy dokładnie zamieszać przed wykonaniem testu.
Jeżeli mocz pobrano również w celu wykonania innych badań, najpierw należy pobrać porcję o
objętości około 2 ml do testu BTA, aby mieć pewność, że próbka moczu nie jest zanieczyszczona.
3. Przechowywanie
Próbki moczu można przechowywać w temperaturze pokojowej do 4 dni po pobraniu.
Jeżeli test nie zostanie wykonany natychmiast, próbkę należy schłodzić do temperatury
2 – 8°C, w której można ją przechowywać do 8 dni. Zamrożone próbki moczu przechowywane
w temperaturze od –19°C do –31°C są stabilne przez okres 24 tygodni (w tym przez 3 cykle
zamrażania/rozmrażania).
Uwagi
• Przed pobraniem próbek moczu należy przeczytać poniższe uwagi.
• Do pobierania próbek nie używać pojemników papierowych ani styropianowych
(z pianki polistyrenowej).
• Aby zapobiec zanieczyszczeniom krzyżowym, należy używać nowego pojemnika dla
każdej próbki.
• Odpowiednio oznaczyć pojemnik z próbką, aby zapewnić jej poprawną identyfikację.
• Próbki do cytologii, surowica, osocze, krew pełna oraz próbki powstałe wskutek płukania
pęcherza nie są odpowiednie dla tego testu.
• Próbek nie należy pobierać w czasie menstruacji ani kolejnych dwóch dni po jej
zakończeniu.
• Jeżeli podano leki dopęcherzowe, takie jak szczepionka BCG (Bacillus Calmette-Guerin),
mitomycyna C, tiotepa, bropirimina (do celów badawczych) lub interferon (do celów
badawczych), decyzję o przeprowadzeniu testu powinien podjąć lekarz.
• Nie wolno przeprowadzać testów BTA po zabiegach chirurgicznych, biopsjach lub innych
inwazyjnych badaniach pęcherza lub dróg moczowych. Należy odczekać odpowiedni
czas w celu odzyskania równowagi pacjenta po stresie pourazowym. Należy również
zapoznać się z sekcjami „Ograniczenia metody” oraz „PRZEDSTAWIENIE WYNIKÓW”.
bioNexia® BTA
TR RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
111

INSTRUKCJA OBSŁUGI
1. Przed wykonaniem testu zapieczętowany woreczek zawierający kasetę z testem, jak
również próbkę pacjenta, należy umieścić w temperaturze pokojowej. Nie otwierać
zimnego woreczka, aby nie dopuścić do skroplenia pary wodnej znajdującej się
w powietrzu na powierzchni membrany testu.
2. Otworzyć woreczek, wyjąć kasetę z testem oraz pipetę. Wyrzucić woreczek z osuszaczem.
3. Delikatnie odwirować próbkę moczu pacjenta. Napełnić pipetę dostarczoną z zestawem
próbką moczu pacjenta. Trzymając ją ku górze nad studzienką (jak pokazano w skróconej
instrukcji obsługi umieszczonej na pudełku), umieścić trzy pełne krople w studzience na
próbki (S).
4. Natychmiast po zakropieniu próbki włączyć zegar.
5. Po upływie 5 minut odczytać wyniki w czasie nieprzekraczającym 1 minuty. Wynik testu
jest ważny, jeżeli zostanie odczytany w czasie do 6 minut po zakropieniu próbki.
INTERPRETACJA WYNIKÓW
Wynik NEGATYWNY
Jedna czerwona linia pojawia się w obszarze linii kontrolnej (C).
Brak linii w obszarze linii testu (T).
Wynik POZYTYWNY
Pojawiają się dwie wyraźne czerwone linie.
Jedna linia pojawia się w obszarze linii kontrolnej (C), a druga — w obszarze linii testu (T).
Niewyraźna czerwona linia testu (T) oznacza wynik pozytywny.
Wynik NIEWAŻNY
Linia w obszarze kontrolnym (C) nie pojawia się. Brak czerwonej linii w obszarze
kontrolnym (C) oznacza nieprawidłową migrację próbki i nieważny wynik. Należy sprawdzić
poprawność wykonanej procedury postępowania oraz powtórzyć oznaczenie za pomocą
nowej kasety z testem. Jeżeli problem nie zostanie usunięty, należy zaprzestać stosowania
zestawu testu i niezwłocznie skontaktować się z lokalnym dystrybutorem.
Odczytać po 5 minutach,
lecz nie później niż do
6 minut. Wynik
odczytany po 6 minutach
jest nieważny.
3 krople moczu
Wynik
negatywny Negative
-
Wynik
pozytywny Positive
+
Nieważny
Invalid
x
Nieważny
Invalid
x
KONTROLA JAKOŚCI
Urządzenie testujące zawiera wewnętrzną procedurę kontrolną — obecność czerwonej
linii w obszarze kontrolnym (C) oznacza prawidłową migrację próbki. Jeżeli linia w obszarze
kontrolnym nie pojawia się, test jest nieważny.
112
410591

FR
Obowiązkiem użytkownika jest przeprowadzenie kontroli jakości zgodnie z lokalnymi
uregulowaniami.
OGRANICZENIA METODY
• Wynik testu nie powinien stanowić jedynej podstawy do postawienia diagnozy, ale powinien
być oceniany przez lekarza w odniesieniu do pozostałych danych klinicznych i wyników badań
oraz potwierdzony przez dodatkowe procedury diagnostyczne (jeżeli jest to konieczne).
• Nie należy interpretować wyników testu jako niepodważalnego dowodu na obecność
(lub jej brak) raka pęcherza moczowego. Podwyższone stężenia BTA wykryto również
u pacjentów z chorobami o charakterze łagodnym, takimi jak zakażenia dróg
moczowych, kamica nerkowa, zapalenie nerek oraz uraz pęcherza lub dróg moczowych.
Ponadto nowotwory złośliwe nerek i/lub rak przejściowokomórkowy (Transitional Cell Carcinoma;
TCC) górnych dróg moczowych mogą również powodować zwiększone stężenia BTA w moczu.
• Czułość kliniczna testu BTA zależy do stopnia zaawansowania raka pęcherza. Aby uzyskać
więcej informacji, należy również zapoznać się z sekcją „PRZEDSTAWIENIE WYNIKÓW”.
• Nie są znane efekty oddziaływania radioterapii lub chemioterapii układowej, jak również
wpływ leków eksperymentalnych, na wynik testu BTA.
• Niektóre choroby o charakterze łagodnym, takie jak kamica nerkowa, zapalenie nerek,
zakażenia dróg moczowych i niektóre choroby weneryczne mogą zwiększać liczbę
pozytywnych wyników testu.
• Rak nerek lub rak przejściowonabłonkowy górnych dróg moczowych mogą również
powodować wzrost stężenia BTA.
PRZEDSTAWIENIE WYNIKÓW
Wyniki kliniczne
Swoistość
Aby zweryfikować swoistość kliniczną kasety z testem bioNexia® BTA oznaczono 555 próbek
moczu pochodzących od pacjentów bez stwierdzonego raka pęcherza. Średni wiek pacjentów
wynosił 55 lat. 48% pacjentów stanowili mężczyźni. 167 pacjentów zdiagnozowano jako
zdrowych, u pozostałych 388 stwierdzono występowanie różnych objawów klinicznych.
Pacjentów pogrupowano na kilka kategorii. Wyniki tego badania klinicznego zostały
przedstawione w poniższej tabeli.
Grupa pacjentów
bioNexia® BTA
Charakterystyka obrazu
klinicznego
Liczebność Swoistość kliniczna (%)
(95% przedział ufności)
Pacjenci zdrowi 167 95
(90 – 98)
Brak chorób układu moczowo-płciowego oraz postaci raka
Brak chorób układu
moczowo-płciowego
Cukrzyca, zapalenie
stawów, toczeń, choroby
zwyrodnieniowe stawów
powiązane z uszkodzeniem
kolagenu
Postacie raka niedotyczące
układu moczo-
żołądka, jelit; białaczka,
Nowotwory: piersi, płuc,
wo-płciowego chłoniaki
Ogólny obraz kliniczny
niedotyczący układu
moczowo-płciowego
52 98
(89 – 100)
53 89
(77 – 95)
105 93
(87 – 97)
TR RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
113

Łagodne choroby układu moczowo-płciowego
Łagodny przerost prostaty 26 88
(71 – 98)
Choroby nerek o przebiegu
łagodnym
Choroby nerek
kamica nerkowa, zapalenie
nerek i inne
32 50
(32 – 68)
Różne choroby układu
moczowo-płciowego
Choroby układu
moczowo-płciowego
ogółem
Zapalenie gruczołu
krokowego, zapalenie cewki
moczowej, zakażenia dróg
moczowych,
nietrzymanie moczu,
choroby weneryczne
94 76
(65 – 84)
152 72
(65 – 79)
Postacie raka dotyczące układu moczowo-płciowego
Rak prostaty 45 78
(63 – 89)
Rak nerki 7 29
(4 – 71)
Inne rodzaje raka Rak macicy, jajnika i inne
postacie raka
Postacie raka dotyczące
układu moczowo-
-płciowego ogółem
Uraz układu moczowo-płciowego
25 76
(55 – 91)
77 73
(61 – 82)
54 33
(21 – 47)
Swoistość testu bioNexia® BTA dla grupy 107 pacjentów z rakiem pęcherza i przy braku
objawów choroby wynosiła 70% (95% Cl: 60 – 79).
Czułość
Czułość kliniczną testu bioNexia® BTA określono na podstawie oznaczenia 220 próbek
moczu pobranych od pacjentów, u których potwierdzono obecność guza pęcherza za
pomocą biopsji. Średni wiek pacjentów wynosił 68 lat. 79% pacjentów stanowili mężczyźni.
Stopień zaawansowania i zróżnicowania guza, jak również liczbę wykrytych przypadków
przedstawiono w poniższej tabeli. Określenie stopnia zaawansowania i zróżnicowania
odpowiednio dla próbek 3 (a) i 12 (b) nie było możliwe.
Czułość testu BTA według stopnia zaawansowania i zróżnicowania guza
Stopień zaawansowania
guza (a)
Liczba przypadków Czułość kliniczna (%)
(95% przedział ufności)
Ta 111 51 (42 – 61)
Tis 18 61 (36 – 83)
T1 38 89 (75 – 97)
114
410591

FR
T2–T4 50 88 (76 – 95)
Stopień zróżnicowania
guza (b)
Liczba przypadków Czułość kliniczna (%)
(95% przedział ufności)
1 57 42 (29 – 56)
2 56 66 (52 – 78)
3 95 83 (73 – 89)
131 z 220 próbek było jednocześnie badanych za pomocą metody cytologii moczu. Czułość
kliniczną każdej z metod i/lub czułość metod połączonych przedstawiono w poniższej tabeli.
Czułość testu BTA według stopnia zróżnicowania guza
Czułość kliniczna (%)
(95% przedział ufności)
Stopień
zaawansowania
guza
Liczba
przypadków
Test BTA
Cytologia moczu
(Voided Urine
Cytology; VUC)
Test BTA oraz VUC
TR RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
Ta 73 45 (34 – 57) 7 (2 – 15) 49 (37 – 61)
Tis 15 53 (27 – 79) 60 (32 – 84) 80 (52 – 96)
T1 27 85 (66 – 96) 41 (22 – 61) 85 (66 – 96)
T2–T4 16 75 (48 – 93) 38 (15 – 65) 81 (54 – 96)
Na podstawie przedstawionych wyników można stwierdzić, że, szczególnie w przypadku
wczesnych stadiów guza, test BTA ma znacznie wyższą czułość niż cytologia moczu.
Efektywność wykrywania guzów Tis (guz in situ) jest nieznacznie mniejsza.
Parametry analityczne
Zakres pomiarowy testu bioNexia® BTA
Dolny limit detekcji testu wynosi ok. 22,4 U/ml. Nie stwierdzono nadmiaru antygenu (efektu
wysokiej dawki) dla stężeń mniejszych niż 12 400 U/ml. Wyższe stężenia nie występowały
w badanych próbkach.
Powtarzalność
Cztery próbki z różnymi stężeniami antygenów (2 U/ml, 32 U/ml, 67 U/ml, 292 U/ml)
oznaczano pięćdziesiąt razy (10 testów x 5 powtórzeń) tego samego dnia.
Powtarzalność oznaczenia oceniano w dwóch placówkach. Poziom zgodności pomiędzy
obserwowanym a oczekiwanym (na podstawie znanego stężenia antygenu) wynikiem testu
wynosił 100% dla obu placówek.
Powtarzalność
Precyzję wewnątrzseryjną oraz pomiędzy seriami oceniano w jednej placówce. Dwie serie
po cztery próbki z różnymi stężeniami antygenów oznaczano dziesięć razy każdego dnia
przez pięć kolejnych dni.
bioNexia® BTA
115

Poziom zgodności pomiędzy obserwowanym a oczekiwanym (na podstawie znanego
stężenia antygenu) wynikiem testu przedstawiono w poniższej tabeli. Poziom zgodności
określono na podstawie wyniku uzyskanego za pomocą przynajmniej 2 z 3 czytników.
Próbka Seria Liczba zgodnych
wyników
Odsetek
zgodnych
wyników
Powtarzalność analityczna
(%) (95% Przedział ufności)
Próbka
(2 U/ml)
Próbka
(32 U/ml)
Próbka
(67 U/ml)
Próbka
(292 U/ml)
Dev3 50 100 92,9 – 100,0
Dev4 50 100 92,9 – 100,0
Dev3 50 100 92,9 – 100,0
Dev4 50 100 92,9 – 100,0
Dev3 50 100 92,9 – 100,0
Dev4 50 100 92,9 – 100,0
Dev3 50 100 92,9 – 100,0
Dev4 50 100 92,9 – 100,0
Poziom zgodności pomiędzy oznaczeniami wynosił 100%.
SUBSTANCJE INTERFERUJĄCE
Wpływ substancji endogennych i egzogennych
Aby określić występowanie interferencji podczas wykonywania oznaczenia, zmieszano pule
moczu BTA–dodatnie i BTA–ujemne z substancjami wymienionymi w poniższej tabeli.
Substancje o podanych stężeniach nie wpływały na wyniki testu.
Substancja
Stężenie
Możliwe składniki moczu (substancje endogenne)
Hemoglobina
1 mg/ml
Leukocyty
Erytrocyty
Albumina
Bilirubina (niesprzężona) a
IgG
Chlorek sodu a
Kwas moczowy
106 komórek/ml
106 komórek/ml
10 mg/ml
4 μg/ml
100 μg/ml
3,65 mg/ml
2,5 mg/ml
116
410591

FR
Kwas askorbinowy
Składniki aktywne leków
Ampicylina
Doksorubicyna HCl
Mitomycyna C
Nitrofurantoina
Fenazopirydyna HCl a
Tiotepa
Trimetoprym
Atenuowane prątki gruźlicy (BCG)
Finasteryd
Flutamid
50 mg/ml
6 mg/ml
100 μg/ml
100 μg/ml
500 μg/ml
800 μg/ml
100 μg/ml
500 μg/ml
200 μg/ml
25 μg/ml
1 mg/ml
Ioversol
74% (środek kontrastowy do obrazowania) a 1%
Urysed b
175 μg/ml
a: przy wyższych stężeniach intensywność koloru linii w obszarze testu może być
zmniejszona.
b: z powodu wewnętrznego zabarwienia odczyt linii jest utrudniony w przypadku wyższych
stężeń.
UTYLIZACJA ODPADÓW
Utylizację wszystkich zużytych i nieużytych składników oraz innych skażonych materiałów
należy przeprowadzać zgodnie z procedurą dotyczącą produktów potencjalnie zakaźnych.
Za odpowiednie obchodzenie się i utylizację wytworzonych odpadów oraz ścieków
odpowiedzialne jest laboratorium, które musi obchodzić się z nimi i utylizować je (lub
powierzyć do utylizacji) stosownie do stopnia ich niebezpieczeństwa oraz zgodnie
z odpowiednimi regulacjami prawnymi.
TR RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
LITERATURA
1. Robert Koch Institut : Cancer in Germany. 2005/2006. Incidence and Trends. 7th ed. 2010.
p.84-87 HYPERLINK “http://www.rki.de/cln_160/nn_1219822/EN/Content/Health__Reporting/
GBEDownloadsB/KID2010,templateId=raw,property=publicationFile.pdf/KID2010.pdf” http://
www.rki.de/cln_160/nn_1219822/EN/Content/Health__Reporting/GBEDownloadsB/KID2010,
templateId=raw,property=publicationFile.pdf/KID2010.pdf (Accessed Dec 2010)
2. Umiker W.: Accuracy of Cytologic Diagnosis of Cancer of the Urinary Tract. Symposium on
Diagnostic Accuracy of Cytologic Technics 8:186-193,1964.
3. Badalament R.A., Hermansen D.K., et al : The Sensitivity of Bladder Wash Flow Cytometry,
Bladder Wash Cytology, and Voided Cytology in the Detection of Bladder Carcinoma. Cancer
60:1423-1427, 1987.
bioNexia® BTA
117

4. Grossmann H.B.: Markers for Bladder Cancer.
5. Kinders R., Jones T., et al: Complement Factor H or a Related Protein Is a Marker for Transitional
Cell Carcinoma of the Bladder. Clinical Cancer Research 4:2511-2520, 1998.
6. Corey M., Kinders R., et al: Factor H Related Proteins Are Upregulated In Bladder Cancer.
Proceedings of the American Association for Cancer Research 39: 263, 1998.
7. Austyn J. M., Wood K. J.: Principles of Cellular and Molecular Immunology. Oxford University
Press p. 522-554, 1993.
8. Corey M.J., Kinders R.J., et al: Enhancement of Complement-Mediated Lysis of Cancer Cells By
Anti-Factor H Antibodies. Proceedings of the American Association for Cancer Research 39: 304,
1998.
9. Sarosdy M.F., Hudson M.A., et al: Improved Detection of Recurrent Bladder Cancer Using the
Bard BTA stat Test. Urology 50(3):349 - 353,1997.
10. Raitanen M.-P., Marttila T., et al: The Bard BTA stat Test in Monitoring of Bladder Cancer. The
Journal of Urology 157: 28, 1997.
INDEKS SYMBOLI
Symbol Znaczenie Symbol Znaczenie
Numer katalogowy
Wyrób medyczny przeznaczony
do diagnostyki
in vitro
Producent
Temperatura przechowywania
Użyć przed
Kod partii
Sprawdź w instrukcji obsługi
Produkt jednorazowego użytku
Przechowywać z dala od
światła słonecznego
Zawartość wystarczy do
oznaczeń
118
410591

FR
BIOMERIEUX, niebieskie logo, bioNexia są używanymi, zgłoszonymi i/lub
zastrzeżonymi znakami towarowymi należącymi do firmy bioMérieux SA lub jednej
z jej filii.
CLSI jest zastrzeżonym znakiem towarowym organizacji Clinical Laboratory and
Standards Institute, Inc.
Wszelkie inne nazwy lub znaki towarowe są własnością odpowiednich właścicieli.
RU
EN
PT
PL
CS
IT
ES
DE
bioMérieux SA
69280 Marcy-l‘Etoile-France
Tel: 33 (0) 478 87 20 00
Fax: 33 (0) 478 87 20 90
www.biomerieux.com/bionexia
RCS LYON 673 620 399
SV
16359 A - 2010/12
TR
bioNexia® BTA
119

120
410591

DE
TR RU PL CS SV PT
IT
ES
EN
FR
НАЗНАЧЕНИЕ
bioNexia® BTA — экспресс-тест для качественного определения антигена опухоли
мочевого пузыря (Bladder Tumor-associated Antigen, BTA) в образцах мочи человека.
Тест предназначен для использования в качестве вспомогательного средства
скрининга в группах высокого риска и мониторинга состояния пациентов с раком
мочевого пузыря. Только для профессиональной диагностики in vitro.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ
Частота возникновения
Карцинома мочевого пузыря составляет около 2—3 % всех случаев возникновения
злокачественных опухолей у человека. Карцинома мочевого пузыря занимает второе
место по частоте возникновения из всех опухолевых заболеваний мочеполовой
системы, после карциномы предстательной железы.
Этиология
В число факторов, повышающих риск возникновения карциномы мочевого пузыря,
входят курение, хронический цистит, воздействие ароматических аминов на рабочем
месте (например, у парикмахеров, рабочих химической, кожевенной и лакокрасочной
промышленности, специалистов по борьбе с вредителями и т. д.) (1), лучевая
терапия органов малого таза, шистозомиаз, балканская нефропатия, хронический
интерстициальный нефрит, а также длительное применение определенных
препаратов (хлорнафазин, фенацетин, циклофосфамид), некоторые из которых сняты
с производства и изъяты из продажи.
Клинические симптомы
Микро- или макрогематурия наблюдается приблизительно у 80 % пациентов, хотя
обе формы гематурии выявляются лишь периодически. Другим часто встречающимся
симптомом карциномы мочевого пузыря является дизурия, особенно в случаях, когда
при использовании антибиотиков не наблюдается улучшения. На более поздних
стадиях могут появляться боль и задержка мочи, а также сопутствующие нарушения.
Стадии и степени дифференциации
Как правило, проводится дифференциация поверхностных и инфильтрирующих
опухолей. Различные стадии перечислены в нижеследующей таблице; возможно
дальнейшее подразделение на стадии с индексами a и b (не показано в таблице). При
bioNexia® BTA
121

постановке диагноза приблизительно у 75—85 % пациентов имеется поверхностная,
неинвазивная карцинома мочевого пузыря (ПКР = переходно-клеточный рак).
У таких пациентов имеется 75 % риск рецидива, поэтому при контрольных осмотрах
необходим регулярный мониторинг для выявления повторного появления опухоли.
Классификация по стадиям
Tx
Первичная опухоль, не выявляется
T0
Отсутствие признаков первичной опухоли
Ta
Неинвазивная карцинома слизистой оболочки
Tis
Карцинома in situ: «поверхностная опухоль»
T1
Опухоль инфильтрирует субэпителиальную соединительную ткань
T2
Опухоль инфильтрирует мышечный слой
T3
Опухоль инфильтрирует перивезикальную ткань
T4
Опухоль инфильтрирует один из следующих органов: предстательная
железа, матка, влагалище, стенка тазовой полости, брюшная стенка.
Другой важной классификацией для прогноза является деление по степеням
дифференциации:
Классификация по степеням дифференциации
G1
Хорошо дифференцирована
G2
Умеренно дифференцирована
G3
Слабо дифференцирована
G4
Анапластическая карцинома
Диагноз
Две наиболее часто применяемые процедуры для выявления карциномы мочевого
пузыря — цитологическое исследование мочи и цистоскопия. При проведении
цитологического исследования мочи проводится исследование осадка мочи на
предмет наличия раковых клеток. К сожалению, общее число клеток, как правило,
сравнительно низко. Кроме того, моча как среда оказывают неблагоприятное
воздействие на клетки, в результате чего могут искажаться их важные диагностические
характеристики. Зачастую отсутствуют стандартные процедуры отбора и хранения
образцов. Лучшие результаты дают процедуры с контролируемым опорожнением
мочевого пузыря (2). Однако, одним из основных ограничений этой диагностической
процедуры является то, что ее клиническая чувствительность подвержена
значительным колебаниям, а также то, что опухоли на ранних стадиях часто остаются
невыявленными (2, 3).
122
410591

FR
Благодаря клинической чувствительности и специфичности цистоскопия
рассматривается как стандартная диагностическая процедура (наряду с биопсией).
Недостатками этого инвазивного вмешательства является то, что оно доставляет
неудобства пациенту, а также то, что таким способом можно выявить только видимые
опухоли. Для преодоления недостатков вышеперечисленных диагностических процедур
был проведен интенсивный поиск маркеров опухоли, которые могли бы помочь
диагностировать карциному мочевого пузыря (4). В результате был обнаружен антиген
опухоли мочевого пузыря (BTA), белок, содержание которого часто является повышенным
у пациентов, страдающих карциномой мочевого пузыря. Этот антиген был выделен
из нескольких клеточных линий карциномы мочевого пузыря, но не обнаруживался
в культурах нормальных эпителиальных клеток. С биохимической точки зрения BTA
представляет собой белок, имеющий большое сходство с фактором комплемента
H человека (human complement factor H-related protein, hCFHrp) (5, 6). Оба белка
выявляются с помощью моноклональных антител, используемых в тесте. Человеческий
фактор комплемента H играет важную ингибирующую роль в процессе формирования
мембраноатакующего комплекса, каскада комплемента (7), который отвечает за лизис
дегенерирующих клеток. Как было показано in vitro, BTA также ингибирует образование
мембраноатакующего комплекса. В экспериментах ингибирование удавалось остановить
путем добавления моноклональных антител к hCFHrp (8). Вероятным представляется,
что таким способом раковые клетки выходят из-под контроля защитной системы
организма. Кассета теста bioNexia® BTA позволяет выявлять BTA в моче с помощью
специфичной реакции антиген-антитело. Этот неинвазивный подход характеризуется
существенно более высокой клинической чувствительностью, в сравнении
с цитологическим исследованием мочи, особенно при карциномах на ранних стадиях.
При неясных случаях микро- и макрогематурии сочетание обоих методов может
повысить степень выявления. При мониторинге пациентов, проходивших лечение
опухолей мочевого пузыря, данный тест способствует оценке риска рецидивов
и может помочь сократить количество ненужных процедур цистоскопии и биопсии.
Полезность BTA как маркера опухоли была подтверждена в нескольких исследованиях
(9, 10). Тест, для проведения которого требуется только образец мочи пациента,
прост в использовании и позволяет провести визуальную оценку результата всего за
несколько минут.
ПРИНЦИП
Тест bioNexia® BTA представляет собой качественный иммунохроматографический
анализ для определения антигена опухоли мочевого пузыря (BTA) в моче человека.
Тест основан на использовании двух специфичных моноклональных антител
к различным BTA-эпитопам. На мембрану предварительно нанесен слой из одного
вида моноклональных антител в зоне тестовой линии (T) (как показано на рисунке
справа). Второй вид антител имеет цветной маркер.
Если образец мочи содержит BTA, антиген образует комплекс с маркированным
антителом. При прохождении жидкости через мембрану этот комплекс захватывается
TR RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
bioNexia® BTA
123

антителами, иммобилизованными на
мембране, и в зоне T появляется красная
полоса. Если в образце мочи не содержится
BTA, антитела с цветным маркером не
образуют комплекса, и в зоне тестовой линии
(T) не появляется красной полосы.
Кроме того, тест включает в себя линию
контроля правильности проведения
процедуры, в контрольной зоне (C). Эта
контрольная линия должна появляться
независимо от присутствия BTA в образце.
Антитела с цветным маркером напрямую
захватываются реактивом (козьи антимышиные
IgG), иммобилизованным
в контрольной зоне. Контрольная линия
проявляется при каждом валидном
тестировании и указывает, что тестовая
миграция была проведена правильно.
СОСТАВ НАБОРА (10 ТЕСТОВ)
10 тестовых
кассет
124
Индивидуальные запечатанные пакеты с одноразовой пипеткой
для образца и влагопоглотителем. На мембрану тестовой
кассеты нанесен слой мышиных моноклональных антител
к различным BTA-эпитопам.
1 краткое руководство пользователя, напечатанное на коробке
1 листок-вкладыш
Контрольная линия (C)
Видима для всех действительных
результатов
Тестовая линия (T)
Видима для всех положительных
образцов
Лунка для образца (S)
Для внесения анализируемого
образца
Идентификатор пациента
или образца
Для целей идентификации
НЕОБХОДИМЫЕ РЕАКТИВЫ И МАТЕРИАЛЫ, НЕ ВКЛЮЧЕННЫЕ В НАБОР
• Контейнер для образца мочи
• Не следует использовать стаканчики из бумаги или пенополистирола
(вспененного полистирена).
• Таймер
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
• Только для профессиональной диагностики in vitro.
• Только для профессионального использования.
• В набор входят продукты животного происхождения. Сертификат, подтверждающий
происхождение и/или санитарный статус животных, не гарантирует полностью
отсутствие инфекционных патогенов. Поэтому рекомендуется обращение
с данными продуктами как с потенциальным источником инфекции, с соблюдением
стандартных мер безопасности.
• Не использовать реактивы после истечения срока годности, указанного на упаковке.
410591

FR
• Набор для тестирования до момента использования следует хранить
в запакованном пакете, содержащем влагопоглотитель.
• Набор для тестирования предназначен для однократного применения; не подлежит
повторному использованию.
• Все образцы должны рассматриваться как потенциальные источники инфекции,
при обращении с ними следует соблюдать следующие рекомендации по мерам
предосторожности (CLSI® M29-A, Protection of Laboratory Workers from Instrument
Biohazards and Infectious Disease Transmitted by Blood, Body Fluids, and Tissue; Approved
Guideline (Защита сотрудников лаборатории от биологически опасных материалов
и инфекционных заболеваний, передаваемых с кровью, жидкостями организма и
тканями; утвержденные рекомендации) — в действующей редакции). Для получения
дополнительной информации о мерах предосторожности при обращении см.
«Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories (Биологическая безопасность
в микробиологических и биомедицинских лабораториях) — CDC/NIH — последняя
редакция» или действующие нормативные документы страны использования.
• Не допускается использование тестов из поврежденных упаковок.
ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ РЕАКТИВОВ
• Хранить набор при температуре 2—30 °C.
• НЕ ЗАМОРАЖИВАТЬ.
• При хранении с соблюдением рекомендованных условий все компоненты являются
стабильными до истечения срока годности, указанного на упаковке.
Не использовать после истечения срока годности.
• Набор для тестирования должен находиться в упаковке до момента использования.
ОБРАЗЦЫ (СБОР И ПОДГОТОВКА)
1. Образец
Тест проводится с использованием мочи человека, полученной при естественном
мочеиспускании или через катетер.
2. Подготовка
Специальной подготовки образцов мочи не требуется. Образцы перед проведением
тестирования должны иметь комнатную температуру. При хранении в течение длительного
периода или в случае использования размороженных образцов перед проведением
тестирования образцы мочи следует тщательно перемешать. Если моча также должна
использоваться для других исследований, необходимо вначале отобрать аликвоту около
2 мл для BTA-теста, чтобы гарантировать отсутствие загрязнения образца.
3. Хранение
Образцы мочи могут храниться при комнатной температуре до 4 дней после сбора.
Если не планируется проведение тестирования сразу после сбора образцов, их
необходимо хранить в холодильнике при 2—8 °C не более 8 дней. Замороженные
образцы мочи, хранящиеся при температуре от -19 до -31 °C, сохраняют стабильность
в течение 24 недель, и выдерживают до 3 циклов замораживания/размораживания.
TR RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
bioNexia® BTA
125

Примечания
• Ознакомьтесь со следующими примечаниями перед началом сбора образцов.
• Не следует использовать для сбора образцов стаканчики из бумаги или
пенополистирола (вспененного полистирена).
• Необходимо использовать новый контейнер для каждого образца, чтобы избежать
перекрестной контаминации.
• Для обеспечения правильной идентификации образца следует адекватным
способом маркировать контейнеры.
• Для данного теста не пригодны цитологические образцы, сыворотка, плазма,
цельная кровь или смывы со стенок мочевого пузыря.
• Не следует брать образцы мочи в период менструации и в течение двух дней после
ее окончания.
• При внутрипузырном введении лекарственных средств, таких как БЦЖ (бацилла
Кальметта–Герена), митомицин C, тиотепа, бропирамин (в исследовательских
целях) или интерферон (в исследовательских целях), тестирование может
выполняться на усмотрение врача.
• BTA-тесты не следует проводить после хирургического вмешательства, проведения
биопсии или другого инвазионного исследования мочевого пузыря или мочевых
путей. После таких вмешательств необходимо выждать достаточное время для
восстановления травматических повреждений. См. также разделы «Ограничения
метода» и «ЭФФЕКТИВНОСТЬ».
ПРИМЕНЕНИЕ
1. Перед проведением тестирования запечатанный пакет, содержащий тестовые
кассеты и образцы, полученные от пациента, необходимо внести в помещение
с комнатной температурой. Не следует открывать пакет, вынутый из холодильника,
для предотвращения конденсации атмосферной влаги на тестовой мембране.
2. Откройте пакет, достаньте тестовую кассету и пипетку. Выбросьте пакетик
с влагопоглотителем.
3. Осторожно перемешайте образец мочи пациента. Наберите образец мочи
пациента в пипетку и, расположив ее непосредственно над лункой для образца (как
показано в кратком руководстве, напечатанном на коробке), внесите три полные
капли образца в лунку (S).
4. Немедленно после внесения образца запустите таймер.
5. По прошествии 5 минут проведите наблюдение результатов в течение 1 минуты.
Результат тестирования является недействительным при его фиксации
позднее, чем через 6 минут после запуска таймера.
УЧЕТ И ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
ОТРИЦАТЕЛЬНЫЙ результат
Появилась одна красная полоса в зоне контрольной линии (C).
В зоне тестовой линии (T) полоса не проявилась.
126
410591

EN
PT
DE
ES
IT
FR
ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЙ результат
Появилось две хорошо заметных красных полосы.
Одна полоса появилась в зоне контрольной линии (C), вторая — в зоне тестовой линии
(T). При появлении едва заметной красной полосы в зоне тестовой линии (T) результат
следует считать положительным.
НЕДЕЙСТВИТЕЛЬНЫЙ результат
Контрольная полоса (C) не появилась. Отсутствие красной полосы в контрольной зоне (C)
означает, что тестовая миграция не была проведена правильно, и результат тестирования
недействителен. Проведите поиск возможной ошибки в процедуре и повторите тест
с использованием новой кассеты. При сохранении проблемы следует немедленно
прекратить использование тестового набора и связаться с местным дистрибьютором.
Оценку результатов проводить
не ранее чем через
5 минут и не позднее чем
через 6 минут. Результат
теста недействителен при
определении позднее чем
через 6 минут.
3 капли мочи
Отрицательный
Negative
-
Положительный
Positive
+
Недействительный
Invalid тельный Invalid
Недействи-
x
x
TR RU PL CS SV
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Тест имеет собственную систему контроля качества процедуры, наличие окрашенной
полосы в зоне (C) указывает на правильность осуществления тестовой миграции. Если
контрольная линия не проявляется, тест является недействительным.
Проведение процедур контроля качества в соответствии с местными нормативными
требованиями находится в сфере ответственности пользователя.
ОГРАНИЧЕНИЯ МЕТОДА
• Результаты теста не должны использоваться как единственное основание для
постановки диагноза, и должны сопоставляться врачом с другими клиническими
признаками и данными исследований, а также при необходимости подтверждаться
в ходе дополнительных диагностических процедур.
• Результаты теста не должны интерпретироваться как абсолютное доказательство
наличия или отсутствия карциномы мочевого пузыря. Повышенные концентрации
BTA выявлялись также у пациентов с доброкачественными заболеваниями, такими
как инфекции мочевых путей, камни в почках, нефрит или травма мочевого пузыря
или мочевыводящих путей.
Кроме того, при карциномах почек и/или ПКР (переходно-клеточном раке) верхних
отделов мочевых путей также может наблюдаться повышение уровня BTA в моче.
• Клиническая чувствительность BTA-теста зависит от стадии карциномы мочевого
пузыря. См. также раздел «ЭФФЕКТИВНОСТЬ».
bioNexia® BTA
127

• Влияние лучевой терапии или системной химиотерапии на результаты BTA-теста не
изучено, так же, как и влияние экспериментальных лекарственных препаратов.
• Некоторые доброкачественные заболевания, такие как камни в почках, нефрит,
инфекции мочевых путей или некоторые венерические заболевания могут
повышать количество положительных результатов тестирования.
• Рак почек или карцинома уротелия верхних отделов мочевых путей также могут
приводить к повышению уровня BTA в моче.
ЭФФЕКТИВНОСТЬ
Клиническая эффективность
Специфичность
Для оценки клинической специфичности тестовых кассет bioNexia® для BTAтестирования
было исследовано 555 образцов мочи, полученной от пациентов, не
страдающих карциномой мочевого пузыря. Средний возраст пациентов составил
55 лет, 48 % пациентов были мужчинами. Помимо 167 здоровых испытуемых были
исследованы 388 пациентов с клинической картиной различных заболеваний.
Пациенты были сгруппированы в различные категории. Результаты данного испытания
представлены в следующей таблице.
Группа пациентов
Здоровые
испытуемые
Характеристики или
клинические картины
Количество Клиническая
специфичность в %
(95%-й доверительный
интервал)
167 95
(90—98)
Заболевания и формы рака, не связанные с мочеполовой системой
Заболевания,
не связанные с
мочеполовой
системой
Диабет, артрит, волчанка,
другие дегенеративные
коллагеновые
заболевания
52 98
(89—100)
Формы рака,
не связанные с
мочеполовой
системой
Общее количество
клинических картин,
не связанных с мочеполовой
системой
Карциномы молочной
железы, легких, желудка,
кишечника, лейкемия,
лимфомы
Доброкачественные заболевания мочеполовой системы
53 89
(77—95)
105 93
(87—97)
Доброкачественные
заболевания почек
Различные
заболевания
мочеполовой
системы
Доброкачественная
гиперплазия простаты
Заболевания почек:
камни в почках, нефрит
и другие
Простатит, уретрит,
инфекции мочевыводящих
путей, недержание
мочи, венерические
заболевания
26 88
(71—98)
32 50
(32—68)
94 76
(65—84)
128
410591

FR
Общее количество
заболеваний мочеполовой
системы
bioNexia® BTA
152 72
(65—79)
Формы рака, связанные с мочеполовой системой
Карцинома простаты 45 78
(63—89)
Рак почек 7 29
(4—71)
Другие типы рака
Общее количество
форм рака, связанных
с мочеполовой
системой
Травма мочеполовых
органов
Карцинома эндометрия,
яичников и другие формы
карциномы
25 76
(55—91)
77 73
(61—82)
54 33
(21—47)
Специфичность теста bioNexia® BTA у 107 пациентов с раком мочевого пузыря
в анамнезе и отсутствием признаков болезни составила 70 % (95 % ДИ: 60—79).
Чувствительность
Клиническая чувствительность теста bioNexia® BTA определялась путем анализа
220 образцов мочи, полученных от пациентов, у которых наличие опухоли мочевого
пузыря было подтверждено с помощью биопсии. Средний возраст пациентов
составил 68 лет, 79 % пациентов были мужчинами. Сведения о стадии развития
и степени дифференциации опухолей, а также об их выявлении с помощью BTA-теста
представлены в следующей таблице. Для 3 (a) и 12 (b) образцов соответственно было
невозможно определить стадию или степень.
Чувствительность теста BTA для различных стадий и степеней опухолей
Стадия развития опухоли (a) Количество образцов Клиническая чувствительность в %
(95%-й доверительный
интервал)
Ta 111 51 (42—61)
Tis 18 61 (36—83)
T1 38 89 (75—97)
T2—T4 50 88 (76—95)
Степень опухоли (b) Количество образцов Клиническая чувствительность в %
(95%-й доверительный
интервал)
1 57 42 (29—56)
2 56 66 (52—78)
3 95 83 (73—89)
TR RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
129

131 из 220 образцов мочи были одновременно проанализированы с помощью
цитологических методов (цитологическое исследование мочи, взятой при
опорожнении мочевого пузыря). Данные о клинической чувствительности двух
отдельных методов и/или чувствительности методов в сочетании приведены
в следующей таблице.
Чувствительность теста BTA для различных стадий развития опухолей
Клиническая чувствительность в %
(95%-й доверительный интервал)
Стадия
опухоли
Количество
образцов
BTA-тест
Цитологическое
исследование мочи
BTA-тест +
цитология
Ta 73 45 (34—57) 7 (2—15) 49 (37—61)
Tis 15 53 (27—79) 60 (32—84) 80 (52—96)
T1 27 85 (66—96) 41 (22—61) 85 (66—96)
T2—T4 16 75 (48—93) 38 (15—65) 81 (54—96)
Данные показывают что, особенно для ранних стадий развития опухоли, BTA-тест
имеет явно более высокую чувствительность в сравнении с методом цитологического
исследования мочи, полученной при опорожнении мочевого пузыря. Частота
выявления Tis-опухолей (опухоль in situ) немного ниже.
Аналитическая эффективность
Диапазон чувствительности теста bioNexia® BTA
Нижний предел выявления теста составляет приблизительно 22,4 Ед/мл. Вплоть
до концентрации 12 400 Ед/мл не наблюдается реакции «прозоны» (эффекта
насыщения реакции при высокой концентрации). Более высокие концентрации среди
протестированных образцов не встречались.
Повторяемость
Было проведено пятьдесят тестирований (10 тестов по 5 повторений) четырех
образцов с различным заранее заданным уровнем антигена (2 Ед/мл, 32 Ед/мл,
67 Ед/мл и 292 Ед/мл) в один и тот же день.
Повторяемость результатов оценивалась в двух испытательных лабораториях.
Согласованность (совпадение) между наблюдаемыми результатами теста
и ожидаемым результатом (на основании известной концентрации антигена) для этих
двух лабораторий составила 100 %.
Воспроизводимость
В одной испытательной лаборатории была проведена оценка погрешности между
различными тестами и погрешности между партиями. Был проведен анализ
четырех образцов с различным заранее заданным уровнем антигена, по десять
тестов в день в течение пяти последовательных дней, с использованием двух
партий тестовых наборов.
130
410591

EN
DE
ES
IT
PT
RU PL CS SV
TR
FR
Согласованность (совпадение) между наблюдаемыми результатами теста и ожидаемым
результатом (на основании известной концентрации антигена) показана в следующей
таблице. Согласованность определялась на основании результатов, полученных как
минимум 2 из 3 испытателей.
Образец Партия Количество
согласующихся
результатов
Образец
(2 Ед/мл)
Процент
согласующихся
результатов
Аналитическая
воспроизводимость в %
(95%-й доверительный
интервал)
Dev3 50 100 92,9—100,0
Dev4 50 100 92,9—100,0
Образец
(32 Ед/мл)
Образец
(67 Ед/мл)
Образец
(292 Ед/мл)
Dev3 50 100 92,9—100,0
Dev4 50 100 92,9—100,0
Dev3 50 100 92,9—100,0
Dev4 50 100 92,9—100,0
Dev3 50 100 92,9—100,0
Dev4 50 100 92,9—100,0
Между различными анализами была установлена 100% согласуемость.
ВЕЩЕСТВА, ИСКАЖАЮЩИЕ РЕЗУЛЬТАТЫ АНАЛИЗА
Влияние эндогенных и экзогенных веществ
Для определения наличия искажения результатов тестирования BTA-положительные
и отрицательные пулы образцов мочи были смешаны с веществами, указанными
в следующей таблице.
Для указанных концентраций не было выявлено влияния на результаты анализа.
Вещество
Концентрация
Возможные составляющие мочи (эндогенные вещества)
Гемоглобин
1 мг/мл
Лейкоциты
106 клеток/мл
Эритроциты
106 клеток/мл
Альбумин
10 мг/мл
Билирубин (несвязанный) a
4 мкг/мл
IgG
100 мкг/мл
bioNexia® BTA
131

Натрия хлорид a
3,65 мг/мл
Мочевая кислота
2,5 мг/мл
Аскорбиновая кислота
50 мг/мл
Терапевтически активные лекарственные вещества
Ампициллин
6 мг/мл
Доксорубицин-HCl
100 мкг/мл
Митомицин C
100 мкг/мл
Нитрофурантоин
500 мкг/мл
Феназопиридин-HCl a
800 мкг/мл
Тиотепа
100 мкг/мл
Триметоприм
500 мкг/мл
Бацилла Кальметта–Герена
200 мкг/мл
Финастерид
25 мкг/мл
Флутамид
1 мг/мл
Йоверсол,
1 %
74 % (контрастное вещество для рентгеновского
исследования) a
Urised b
175 мкг/мл
a: при повышенных концентрациях интенсивность окрашивания тестовой линии
может быть снижена.
b: из-за собственной окраски при высоких концентрациях оценка линий затруднена.
УТИЛИЗАЦИЯ ОТХОДОВ
Использованные и неиспользованные реактивы, а также любые другие загрязненные
материалы однократного применения после процедур следует утилизировать как
инфекционные или потенциально инфекционные продукты.
Хранение, обработка и утилизация твердых и жидких отходов, с учетом их характера
и степени опасности, в соответствии с применимыми нормами находится в сфере
ответственности каждой конкретной лаборатории.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Robert Koch Institut : Cancer in Germany. 2005/2006. Incidence and Trends. 7th ed. 2010.
p.84-87 HYPERLINK “http://www.rki.de/cln_160/nn_1219822/EN/Content/Health__Reporting/
GBEDownloadsB/KID2010,templateId=raw,property=publicationFile.pdf/KID2010.pdf” http://
www.rki.de/cln_160/nn_1219822/EN/Content/Health__Reporting/GBEDownloadsB/KID2010,
templateId=raw,property=publicationFile.pdf/KID2010.pdf (Accessed Dec 2010)
2. Umiker W.: Accuracy of Cytologic Diagnosis of Cancer of the Urinary Tract. Symposium on
Diagnostic Accuracy of Cytologic Technics 8:186-193,1964.
132
410591

FR
3. Badalament R.A., Hermansen D.K., et al : The Sensitivity of Bladder Wash Flow Cytometry,
Bladder Wash Cytology, and Voided Cytology in the Detection of Bladder Carcinoma. Cancer
60:1423-1427, 1987.
4. Grossmann H.B.: Markers for Bladder Cancer.
5. Kinders R., Jones T., et al: Complement Factor H or a Related Protein Is a Marker for Transitional
Cell Carcinoma of the Bladder. Clinical Cancer Research 4:2511-2520, 1998.
6. Corey M., Kinders R., et al: Factor H Related Proteins Are Upregulated In Bladder Cancer.
Proceedings of the American Association for Cancer Research 39: 263, 1998.
7. Austyn J. M., Wood K. J.: Principles of Cellular and Molecular Immunology. Oxford University
Press p. 522-554, 1993.
8. Corey M.J., Kinders R.J., et al: Enhancement of Complement-Mediated Lysis of Cancer Cells By
Anti-Factor H Antibodies. Proceedings of the American Association for Cancer Research 39: 304,
1998.
9. Sarosdy M.F., Hudson M.A., et al: Improved Detection of Recurrent Bladder Cancer Using the
Bard BTA stat Test. Urology 50(3):349 - 353,1997.
10. Raitanen M.-P., Marttila T., et al: The Bard BTA stat Test in Monitoring of Bladder Cancer. The
Journal of Urology 157: 28, 1997.
ТАБЛИЦА СИМВОЛОВ И ОБОЗНАЧЕНИЙ
Символ Обозначение Символ Обозначение
PT
IT
ES DE EN
Номер по каталогу
Номер партии
Для диагностики in vitro
Средство медицинского
назначения
Произведено
Температурные
ограничения
Использовать до
Перед использованием
прочтите инструкцию
Не использовать повторно
Не подвергать воздействию
солнечного света
Содержимого достаточно для
тестов
TR
SV
CS
PL
RU
bioNexia® BTA
133

BIOMERIEUX, синий логотип и bioNexia являются используемыми, поданными
на рассмотрение и/или зарегистрированными торговыми марками,
принадлежащими компании bioMérieux SA или одной из ее дочерних
компаний.
CLSI является зарегистрированной торговой маркой Clinical and Laboratory
Standards Institute Inc.
Другие названия или товарные знаки являются собственностью
соответствующих владельцев.
bioMérieux SA
69280 Marcy-l‘Etoile-France
Tel: 33 (0) 478 87 20 00
Fax: 33 (0) 478 87 20 90
www.biomerieux.com/bionexia
RCS LYON 673 620 399
16359 A - 2010/12
134
410591

DE
TR RU PL CS SV PT
IT
ES
EN
FR
KULLANIM AMACI
bioNexia® BTA, insan idrar numunelerindeki Mesane Tümörü ile İlişkili Antijenin (BTA)
tespitinde kullanılan kalitatif bir hızlı testtir. Testin, yüksek risk taşıyan popülasyonların
taranmasında ve mesane kanseri hastalarının takibinde yardımcı olarak kullanılması
amaçlanmıştır. Test yalnızca profesyonel vücut dışı tanı amaçlı kullanım içindir.
ÖZET VE AÇIKLAMA
İnsidans
İdrar kesesi karsinomları insanlarda görülen tüm malign tümörlerin yaklaşık %2 – 3’ünü
oluşturur. Prostatik karsinomun ardından, mesane karsinomu ürogenital sistemdeki tüm
tümör hastalıklarının insidansında ikinci sırada yer alır.
Etiyoloji
İdrar kesesi karsinomu riskini artıran faktörler arasında, sigara kullanımı, kronik sistit,
işyerinde aromatik aminlere (örneğin, kuaförler, kimya, deri ve boya endüstrisi, haşere
ile mücadele ve benzeri) maruz kalma (1), küçük pelviste radyoterapi, bilharzios, Balkan
nefropatisi, kronik interstisyel nefrit ve ayrıca bir kısmı piyasadan kaldırılmış olan belli
ilaçların (klornafazin, fenasetin, siklofosfamid) uzun süreli kullanımı yer almaktadır.
Klinik Semptomlar
Mikro veya makro hematüri, genelde sadece aralıklı olarak meydana gelse de, hastaların
yaklaşık %80’inde görülür. İdrar kesesi karsinomuna işaret eden diğer yaygın semptomlar
ise özellikle antibiyotik ile iyileşmenin sağlanamadığı vakalarda dizürik miktürasyona bağlı
idrara çıkma zorluklarıdır. İleri evrelerde, ağrı ve idrar retansiyonu ve bunlara eşlik eden
sorunlar meydana gelebilmektedir.
Evreleme ve ayrım derecesi
Genel olarak, yüzeysel ve infiltratif tümörler arasında bir ayrım yapılır. Farklı evreler
aşağıdaki tabloda özetlenmektedir; a ve b şeklinde ek alt sınıflamalar da mümkündür
(gösterilmemiştir). Tanı konulduğunda, hastaların yaklaşık %75 – 85’inde yüzeysel, invaziv
olmayan bir mesane karsinomu görülür (TCC = Transizyonel Hücreli Mesane Karsinomu). Bu
hastalar için %75 relaps riski mevcuttur ve dolayısıyla bu hastalar takip incelemelerinde yeni
hastalık atakları bakımından düzenli olarak izlenmelidir.
bioNexia® BTA
135

Evreleme
Tx
Primer tümör, değerlendirilemez
T0
Primer tümör bulgusu yoktur
Ta
Mukozada non-invaziv karsinom
Tis
Karsinom in situ: “yüzeysel tümör”
T1
Tümör subepitelyal bağdokuyu infiltre etmektedir
T2
Tümör kasları infiltre etmektedir
T3
Tümör perivezikal dokuyu infiltre etmektedir
T4
Tümör şu organlardan birini infiltre etmektedir: prostat bezi, uterus,
vajina, pelvis duvarı, karın duvarı.
Prognoz için bir diğer önemli sınıflandırma da ayrımın derecesidir:
Ayrım sınıfının derecesi
G1
İyi ayırt edilir
G2
Orta derecede ayırt edilir
G3
Düşük derecede ayırt edilir
G4
Anaplastik karsinom
Tanı
Mesane karsinomunu algılamak için en sık kullanılan iki prosedür, idrar sitolojisi ve
sistoskopidir. İdrar sitolojisinde, idrar tortularında kanser hücreleri araştırılır. Ne yazık ki,
toplam hücre sayısı sıklıkla nispeten düşüktür. Ayrıca, idrardaki ortam koşullarının hücreleri
etkilemesiyle önemli tanı verileri gözden kaçabilir. Genelde, numunelerin alınmasına
ve saklanmasına yönelik standart bir prosedür bulunmaz. Kontrollü mesane boşaltma
prosedürlerinin en olumlu sonuçları verdiği görülmektedir (2). Buna karşın, bu diagnostik
prosedürün önemli bir sınırlaması da, klinik hassasiyetin kayda değer ölçüde dalgalanmaya
tabi olması ve erken evrelerdeki tümörlerin genellikle gözden kaçırılmasıdır (2,3).
Klinik hassasiyeti ve özgüllüğünden dolayı, sistoskopi standart diagnostik prosedür
olarak görülmektedir (biyopsinin yanı sıra). Bu invaziv müdahalenin dezavantajı,
hasta için yorucu olması ve yalnızca görünür tümörlerin tespit edilmesidir.
Yukarıda sözü edilen tanı amaçlı prosedürlerin dezavantajlarından hareketle, mesane
karsinomunun teşhis edilmesinde faydalı olabilecek bir tümör belirteci bulmak için
yoğun bir araştırma gerçekleştirilmiştir (4). Mesane Tümörü ile İlişkili Antijen (BTA) ile
yapılan çalışmalarda, mesane karsinomlu hastalarda görülme sıklığı genellikle artan
bir protein keşfedilmiştir. Bu protein mesane karsinomuna ait birkaç hücre dizisinden
izole edilmiş, ancak normal epitelyal hücrelerden izole edilmemiştir. Biyokimyasal
136
410591

FR
açıdan, BTA, insan kompleman faktörü H ile yakından ilişkisi olan bir proteindir
(insan kompleman faktörü H ile ilişkili protein, hCFHrp) (5,6). Her iki protein de testin
monoklonal antikorları ile saptanır. İnsan kompleman faktörü H, dejenere hücrelerin
lizisinden sorumlu kompleman kaskadı (7) olan membran atak kompleksinin oluşumunda
önemli bir inhibe edici rol üstlenir. BTA’nın aynı zamanda membran atak kompleksinin
oluşumunu inhibe ettiği vücut dışı olarak kanıtlanabilmiştir. hCFHrp’ye karşı monoklonal
antikorların ilave edilmesi yoluyla inhibisyonun durdurulması mümkün olmuştur (8).
Bu yolla, kanser hücrelerinin vücudun savunma sisteminden kaçtığı düşünülebilir.
bioNexia® BTA test kaseti, spesifik antijen-antikor reaksiyonu aracılığıyla idrardaki
BTA’nın tespit edilmesini sağlar. Bu invaziv olmayan yaklaşım, özellikle erken evrelerdeki
karsinomlarda idrar sitolojisinden oldukça yüksek bir klinik hassasiyet ile karakterize edilir.
Çözülmemiş mikro ve makro hematüri vakalarında, iki yöntemin birlikte kullanılması tespit
oranını artırabilir. Mesane tümörü hastaları takip edilirken, test aynı zamanda relaps riskinin
değerlendirilmesini de destekler ve gereksiz sistoskopi ya da biyopsilerin azaltılmasına
yardımcı olabilir.
BTA’nın bir tümör belirteci olarak yararlılığı birçok deneyde doğrulanmıştır (9,10). Test,
yalnızca hastanın idrarıyla yapılır ve sonucun birkaç dakika içerisinde görsel olarak
değerlendirilmesine imkan tanır.
PRENSİBİ
bioNexia® BTA testi, insan idrarında Mesane Tümörü ile İlişkili Antijenin (BTA) tespit
edilmesinde kullanılan kalitatif bir immüno kromatografik testtir.
Test, farklı BTA epitoplarına karşı yönlendirilen iki spesifik monoklonal antikora
dayanmaktadır. Membran test çizgisi (T) bölgesindeki bir monoklonal antikor ile önceden
kaplanmıştır (sağdaki şekilde gösterildiği gibi). İkinci antikor ise renk işaretlidir.
İdrar numunesi BTA içerdiğinde, renk işaretli
antikor ile bir kompleks oluşturur. Sıvı membran
üzerinden aktığında, bu kompleks membran
üzerinde immobilize olan antikor tarafından
yakalanır ve T bölgesinde kırmızı bir çizgi belirir.
İdrar numunesi hiç BTA içermiyor ise, renk
işaretli antikor bir kompleks oluşturamaz ve test
Kontrol çizgisi (C)
çizgisi (T) bölgesinde test çizgisi oluşmaz.
Tüm geçerli sonuçlarda
görünür
Test, ayrıca kontrol bölgesinde (C) prosedürel
bir kontrol çizgisini de içerir. Bu kontrol çizgisi
Test çizgisi (T)
Tüm pozitif numunelerde
BTA varlığından bağımsız olarak oluşur. Renk
görünür
işaretli antikor doğrudan kontrol bölgesinde
immobilize olan reaktif (keçi-anti-fare IgG)
tarafından yakalanır. Kontrol çizgisi geçerli her
Numune kuyucuğu (S)
testte belirerek, test migrasyonunun doğru
Numune materyali ekleme
amaçlı
şekilde yapıldığını gösterir.
TR RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
Hasta veya numune ID
İdentifikasyon amaçlı
bioNexia® BTA
137

KİT İÇERİĞİ (10 TEST)
10 Test kaseti Tek kullanımlık numune pipeti ve nem çekici madde içeren tekli kapalı
poşetler içerisinde. Test kasetinin membranı BTA epitoplarına karşı
yönlendirilen fare monoklonal antikorları ile kaplanmıştır.
Kutu üzerine baskılı 1 Kullanıcı hızlı kılavuzu
1 Prospektüs
GEREKLİ ANCAK SAĞLANMAYAN MALZEMELER
• İdrar numune haznesi
• Kağıt veya strafor kaplar (köpüklü polistiren) kullanmayınız.
• Süre ölçer
UYARILAR VE ÖNLEMLER
• Sadece vücut dışı tanı amaçlı kullanım içindir.
• Sadece profesyonel kullanım içindir.
• Bu kit hayvan kaynaklı ürünler içermektedir. Hayvanların kökeni ve/veya sıhhi durumu ile
ilgili onaylanmış bilgiler, bulaşıcı patojenik ajanların yokluğunu tam olarak garanti etmez.
Bu nedenle, bu ürünler potansiyel olarak bulaşıcı kabul edilmeli ve olağan güvenlik
önlemleri alınarak kullanılmalıdır.
• Reaktifleri ambalaj üzerinde belirtilen son kullanma tarihinden sonra kullanmayınız.
• Test cihazı kullanılana kadar nem çekici madde içeren kapalı poşet içinde saklanmalıdır.
• Test cihazı tek kullanımlıktır ve tekrar kullanılmamalıdır.
• Tüm numunelerin bulaşıcı olduğu düşünülmeli ve tavsiye edilen şu önlemlere göre
kullanılmalıdır (CLSI® M29-A Protection of Laboratory Workers from Instrument Biohazards
and Infectious Disease Transmitted by Blood, Body Fluids, and Tissue; Approved Guideline
(Laboratuvar Çalışanlarının Cihaz Biyolojik Tehlikelerinden ve Kan, Vücut Sıvıları ve Doku
yoluyla İletilen Bulaşıcı Hastalıklardan Korunması; Onaylı Kılavuz) – Güncel revizyon).
Önlemlerin uygulanmasına ilişkin ek bilgiler için, “Biosafety in Microbiological and Biomedical
Laboratories (Mikrobiyolojik veya Biyomedikal Laboratuvarlarda Biyolojik Güvenlik) –
CDC/NIH – Son baskı” ya da kullanıldığı ülkede yürürlükteki düzenlemelere başvurunuz.
• Poşet folyo paketi zarar görmüş ise kullanmayınız.
MUHAFAZA VE STABİLİTE
• Kiti 2 – 30°C’de muhafaza ediniz.
• DONDURMAYINIZ.
• Önerilen koşullarda muhafaza edildiği takdirde tüm içerik etiket üzerinde yazılı son
kullanma tarihine kadar stabil kalır. Son kullanma tarihinden sonra kullanmayınız.
• Test cihazı kullanılana kadar poşet içerisinde tutulmalıdır.
138
410591

TR
CS SV PT
IT
ES DE EN
RU
PL
FR
NUMUNE ALIMI VE HAZIRLIĞI
1. Numune
Test insan idrarı veya kateterize hastadan alınan idrar ile yapılır.
2. Hazırlık
İdrar numuneleri için özel bir hazırlık işlemine gerek yoktur. Numunelerin test öncesinde
oda sıcaklığına gelmesi sağlanmalıdır. Uzun muhafaza sürelerinin ardından veya eritilmiş
numunelerin söz konusu olduğu durumlarda, idrar testten önce iyice karıştırılmalıdır. İdrar
başka incelemeler için de kullanılacağı zaman, idrar numunesinin kontamine olmaması için,
lütfen önce BTA testi için yaklaşık 2 mL’lik bir porsiyon alınız.
3. Muhafaza
İdrar örnekleri alındıktan sonra oda sıcaklığında 4 güne kadar saklanabilir. İdrar numunesi
hemen test edilmez ise, 2 – 8°C’de 8 güne kadar soğutucuda saklanmalıdır. -19°C ile -31°C
arasında dondurularak saklanan idrar örneği en fazla 3 kez dondurma/eritme döngüsü
yapılması kaydı ile 24 hafta boyunca stabil kalır.
Notlar
• Lütfen numuneyi almadan önce aşağıdaki notları okuyunuz.
• İdrar numunesi almak için kağıt veya strafor kaplar (köpüklü polistiren) kullanmayınız.
• Çapraz kontaminasyonu önlemek amacıyla her numune için yeni bir kap kullanınız.
• Numune kimlik bilgilerinin doğruluğunu sağlamak amacı ile kabın üzerine gerekli kimlik
bilgilerini yazınız.
• Sitoloji numuneleri, serum, plazma, tam kan veya mesane yıkamaları test için uygun
değildir.
• Menstrüal dönem veya sonrasındaki iki gün içinde idrar almayınız.
• BCG (Bacillus Calmette-Guerin), mitomisin C, tiotepa, bropiramin (araştırma amacıyla)
veya interferon (araştırma amacıyla) gibi intravezikal ilaçların uygulanmış olması
durumunda, testin yapılması hekimin onayına bağlıdır.
• BTA testleri, ameliyat, biyopsi veya mesane veya idrar yollarındaki diğer invaziv
incelemelerin ardından yapılmamalıdır. Bu tür müdahalelerin ardından travmanın
geçmesi için yeterli zaman ayırınız. Ayrıca “YÖNTEM SINIRLAMALARI” veya “PERFORMANS”
başlıklı bölümleri de lütfen okuyunuz.
bioNexia® BTA
139

KULLANIM TALİMATLARI
1. Test gerçekleştirilmeden önce, test kasetleri ve hasta numunelerini içeren kapalı
poşetin oda ısısına gelmesi sağlanmalıdır. Test membranı üzerinde atmosferik nemin
yoğunlaşmasını önlemek için soğutulmuş poşeti açmayınız.
2. Poşeti açınız, test kasetini ve pipeti çıkartınız. Nem önleyiciyi atınız.
3. Hastanın idrar numunesini nazikçe çeviriniz. Verilen pipeti hastanın idrar numunesi ile
doldurunuz ve numune kuyucuğunun üzerinde dik konumda tutunuz (kutudaki hızlı
kılavuzda gösterildiği gibi) ve numune kuyucuğuna (S) üç tam damla ekleyiniz.
4. Numuneyi ekledikten hemen sonra süreölçeri başlatınız.
5. Süreölçer 5 dakikaya ulaştığında, sonuçları 1 dakika içinde okuyunuz. Test sonucu
6 dakikadan daha geç okunursa geçersizdir.
SONUÇLAR VE DEĞERLENDİRME
NEGATİF Sonuç
Kontrol çizgisi bölgesinde (C) bir kırmızı çizgi belirir.
Test çizgisi bölgesinde (T) belirgin bir kırmızı çizgi görülmez.
POZİTİF Sonuç
Birbirinden farklı iki kırmızı çizgi belirir.
Çizgilerden biri kontrol çizgisi bölgesinde (C), diğeri ise test çizgisi bölgesinde (T) belirir. Açık
kırmızı test çizgisi (T) pozitif olarak değerlendirilmelidir.
GEÇERSİZ Sonuç
Kontrol çizgisi (C) belirmez. Kontrol bölgesinde (C) kırmızı çizgi bulunmaması, test
migrasyonunun doğru yapılmadığını ve test sonucunun geçersiz olduğunu gösterir.
Prosedürü gözden geçiriniz ve testi yeni bir test kaseti ile tekrarlayınız. Sorunun devam
etmesi durumunda, test kitinin kullanımını hemen sonlandırınız ve yerel dağıtımcınız ile
iletişim kurunuz.
5. dakikada, ancak en geç
6. dakikada okuyunuz.
Test sonucu 6 dakikadan
sonra okunursa geçerli
değildir
3 Damla idrar
Negative Negatif Positive Pozitif Invalid Geçersiz
-
+ x
Geçersiz Invalid
x
KALİTE KONTROL
Test dahili bir prosedürel kontrol içerir ve renkli çizgi (C) test migrasyonunun doğru
yapıldığını gösterir. Kontrol çizgisi görülmez ise, test geçersizdir.
Yerel uygulanabilir yönetmeliklere uygun olarak Kalite Kontrol çalışmasının yapılması
kullanıcının sorumluluğundadır.
140
410591

PL CS SV PT
IT
ES DE EN
TR
RU
FR
YÖNTEM SINIRLAMALARI
• Test sonucu tanı için tek dayanak noktası olmamalı, ancak bir hekim tarafından diğer
klinik bulgular ve inceleme verileri ile birlikte değerlendirilmeli ve gerekir ise ilave tanı
prosedürleri ile doğrulanmalıdır.
• Elde edilen sonuç, mesane karsinomunun varlığı ya da yokluğu için kesin kanıt olarak
yorumlanmamalıdır. İdrar yolları enfeksiyonları, böbrek taşı, nefrit veya mesane veya
idrar yollarında travma gibi benign rahatsızlıkları olan hastalarda da yüksek BTA
konsantrasyonları tespit edilmiştir.
Ayrıca, böbrek karsinomları ve/veya üst idrar yollarında TCC (Transizyonel Hücreli Karsinom)
de idrarda BTA seviyelerinin yükselmesine neden olabilir.
• BTA testinin klinik hassasiyeti mesane karsinomunun evresine bağlıdır. Ayrıca
“PERFORMANS” başlıklı bölümü de lütfen okuyunuz.
• Radyoterapi veya sistemik kemoterapinin BTA test sonucu üzerindeki etkileri bilinmediği
gibi, deneysel ilaçların da ne gibi bir etki yaptığı tespit edilmemiştir.
• Böbrek taşı, nefrit, idrar yolları enfeksiyonları veya bazı zührevi hastalıklar gibi birtakım
benign hastalıklar da pozitif test sonuçlarının sayısını arttırabilmektedir.
• Böbreklerde kanser veya üst idrar yollarında ürotelyum karsinomu da BTA seviyelerinin
yükselmesine neden olabilir.
PERFORMANS
Klinik performans
Özgüllük
bioNexia® BTA test kasetinin klinik özgüllüğünü doğrulamak amacıyla mesane kanseri
olmayan hastalardan alınan 555 idrar numunesi test edilmiştir. Ortalama hasta yaşı 55 iken,
bunların %48’i erkek idi. 167 sağlıklı deneğin yanı sıra, çeşitli klinik tablolara sahip 388 hasta
da incelenmiştir. Hastalar çeşitli kategorilere ayrılmıştır. Bu deneyin sonuçları aşağıdaki
tabloda özetlenmiştir.
Hasta grubu
Özellikler veya klinik
tablolar
Sayı
% cinsinden klinik özgüllük
(%95 güven aralığı)
Sağlıklı denekler 167 95
(90 – 98)
Ürogenital olmayan hastalıklar ve kanser formları
Ürogenital olmayan
hastalıklar
Ürogenital olmayan
kanser formları
Toplam ürogenital olmayan
klinik tablo sayısı
Diyabet, artrit, lupus,
diğer kolajen dejeneratif
hastalıklar
Meme, akciğer, mide,
bağırsak, lösemi, lenfoma
karsinomları
52 98
(89 – 100)
53 89
(77 – 95)
105 93
(87 – 97)
bioNexia® BTA
141

Benign ürogenital hastalıklar
Benign prostatik hiperplazi 26 88
(71 – 98)
Benign böbrek hastalıkları
Böbrek hastalıkları
böbrek taşı, nefrit
ve diğerleri
32 50
(32 – 68)
Çeşitli ürogenital
hastalıklar
Toplam ürogenital
hastalık sayısı
Prostatit, üretrit, idrar yolu
enfeksiyonları,
inkontinans, zührevi
hastalık
94 76
(65 – 84)
152 72
(65 – 79)
Ürogenital kanser formları
Prostatik karsinom 45 78
(63 – 89)
Böbrek kanseri 7 29
(4 – 71)
Diğer kanser tipleri Endometriyal, yumurtalık
ve diğer karsinom formları
25 76
(55 – 91)
Toplam ürogenital kanser
formlarının sayısı
77 73
(61 – 82)
Ürogenital travma 54 33
(21 – 47)
bioNexia® BTA testinin mesane kanseri öyküsü olup hastalık bulgusu olmayan 107 hastadaki
özgüllüğünün %70 olduğu (%95 Güven Aralığı: 60 – 79) tespit edilmiştir.
Hassasiyet
bioNexia® BTA testinin klinik hassasiyeti, mesane tümörü varlığı biyopsi vasıtasıyla
doğrulanan hastalardan alınan 220 idrar numunesi kullanılarak belirlenmiştir. Ortalama
hasta yaşı 68 iken, bunların %79’u erkek idi. Tümörün evresi ve derecesinin yanı sıra, BTA
testi ile tespiti de aşağıdaki tabloda sunulmaktadır. Sırasıyla 3 (a) ve 12 (b) numuneleri için
bir evre veya derece belirlenmesi mümkün olmamıştır.
142
410591

FR
BTA testinin tümörün evresine ve derecesine göre hassasiyeti
Tümörün evresi (a) Numune sayısı % cinsinden klinik hassasiyet
(%95 Güven aralığı)
Ta 111 51 (42 – 61)
Tis 18 61 (36 – 83)
T1 38 89 (75 – 97)
T2-T4 50 88 (76 – 95)
Tümörün derecesi (b) Numune sayısı % cinsinden klinik hassasiyet
(%95 Güven aralığı)
1 57 42 (29 – 56)
2 56 66 (52 – 78)
3 95 83 (73 – 89)
220 idrar numunesinden 131’i idrar sitolojik yöntemleri (boşaltılmış idrar sitolojisi)
kullanılarak aynı anda incelenmiştir. İki yöntemin klinik hassasiyeti ve/veya her iki yöntemin
kombine hassasiyeti aşağıdaki tabloda özetlenmektedir.
BTA testinin tümörün evresine göre hassasiyeti
% cinsinden klinik hassasiyet
(%95 Güven aralığı)
Tümörün
evresi
bioNexia® BTA
Numune sayısı BTA testi Boşaltılmış İdrar
Sitolojisi (VUC)
BTA testi +VUC
Ta 73 45 (34 – 57) 7 (2 – 15) 49 (37 – 61)
Tis 15 53 (27 – 79) 60 (32 – 84) 80 (52 – 96)
T1 27 85 (66 – 96) 41 (22 – 61) 85 (66 – 96)
T2-T4 16 75 (48 – 93) 38 (15 – 65) 81 (54 – 96)
Elde edilen veriler, özellikle tümörün erken aşamalarında, BTA testinin boşaltılmış idrar
sitolojisine kıyasla oldukça yüksek bir hassasiyete sahip olduğunu göstermektedir. Tis
tümörlerinin (Tümör in situ) tespit seviyesi biraz daha düşüktür.
Analitik performans
bioNexia® BTA testinin ölçüm aralığı
Testin alt tespit sınırı yaklaşık 22,4 U/mL’dir. 12.400 U/mL’lik konsantrasyona kadar, prozon
reaksiyonu (Yüksek Doz Kanca Etkisi) gözlenmez. Test edilen numunelerde daha yüksek
konsantrasyonlar görülmemiştir.
Tekrarlanabilirlik
Farklı katkılı antijen seviyelerindeki dört örnek (2 U/mL, 32 U/mL, 67 U/mL, 292 U/mL) aynı
günde elli kez (10 test x 5 kopya) test edilmiştir.
TR RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
143

Testin tekrarlanabilirliği iki ünitede değerlendirilmiştir. Bilinen antijen konsantrasyonuna
bağlı olarak, gözlemlenen test sonucu ile beklenen test sonucu arasındaki uyuşmanın
(tutarlılık) iki bölgede %100 olduğu tespit edilmiştir.
Tekrar üretilebilirlik
Testler arası ve lotlar arası kesinlik bir unitede değerlendirilmiştir. Farklı katkılı antijen
seviyelerine sahip dört numune, art arda toplam beş gün boyunca iki lot ile her gün on kez
test edilmiştir.
Bilinen antijen konsantrasyonuna bağlı olarak, gözlemlenen test sonucu ile beklenen sonuç
arasındaki uyum (tutarlılık) aşağıdaki tabloda listelenmiştir. Tutarlılık 3 okuyucudan en az
2’siyle elde edilen sonuç ile belirlenmiştir.
Numune Lot Tutarlı Sonuç sayısı Tutarlı sonuç
yüzdesi
Analitik tekrar üretilebilirlik
(%) (%95 Güven Limiti)
Numune
(2 U/mL)
Numune
(32 U/mL)
Numune
(67 U/mL)
Numune
(292 U/mL)
Dev3 50 100 92,9 – 100,0
Dev4 50 100 92,9 – 100,0
Dev3 50 100 92,9 – 100,0
Dev4 50 100 92,9 – 100,0
Dev3 50 100 92,9 – 100,0
Dev4 50 100 92,9 – 100,0
Dev3 50 100 92,9 – 100,0
Dev4 50 100 92,9 – 100,0
Testler arasında %100 tutarlılık tespit edilmiştir.
144
410591

TR
FR
ETKİLEŞEN MADDELER
Endojen ve ekzojen maddelerin etkisi
Herhangi bir test etkileşiminin meydana gelip gelmediğini belirlemek için, BTA yönünden
pozitif ve negatif idrar havuzları aşağıdaki tabloda listelenen maddeler ile karıştırılmıştır.
Test sonucu aşağıdaki konsantrasyonlarda etkilenmemiştir.
Madde
Konsantrasyon
İdrarın olası bileşenleri (endojen maddeler)
Hemoglobin
1 mg/mL
Lökositler
Eritrositler
Albümin
Bilirubin (unkonjuge) a
IgG
Sodyum klorür a
Ürik asit
Askorbik asit
Terapötik etkin farmasötik bileşim maddesi
Ampisilin
Doksorubisin-HCl
Mitomisin C
Nitrofurantoin
Fenazopiridin-HCl a
Tiotepa
Trimetoprim
Bacillus Calmette Guerin
Finasterid
106 hücre/mL
106 hücre/mL
10 mg/mL
4 μg/mL
100 μg/mL
3,65mg/mL
2,5 mg/mL
50 mg/mL
6 mg/mL
100 μg/mL
100 μg/mL
500 μg/mL
800 μg/mL
RU PL CS SV PT
IT
ES DE EN
100 μg/mL
500 μg/mL
200 μg/mL
25 μg/mL
Flutamid
1 mg/mL
Ioversol,
%74 (görüntüleme prosedürleri için kontrast madde) a 1%
Urised b
175 μg/mL
a: yüksek konsantrasyonlarda, test sonucu çizgisinin yoğunluğu azalabilir.
b: entrensek renklenmeden dolayı, yüksek konsantrasyonlarda çizgilerin okunması zorlaşır.
bioNexia® BTA
145

ATIK YÖNETİMİ
Kullanılmış veya kullanılmamış reaktifler ve diğer kontamine olmuş tüm tek kullanımlık
malzemeleri bulaştırıcı veya potansiyel bulaştırıcı ürünlere yönelik prosedürleri takip ederek
atınız.
Her laboratuvar, atıkların ve oluşan atık maddelerin yapılarına ve tehlikelilik derecelerine
göre kullanılmasından ve uygulanabilir düzenlemelere göre işleme tabi tutulup atılmasından
(ya da işleme tabi tutturulup attırılmasından) sorumludur.
LİTERATÜR REFERANSLARI
1. Robert Koch Institut : Cancer in Germany. 2005/2006. Incidence and Trends. 7th ed. 2010.
p.84-87 HYPERLINK “http://www.rki.de/cln_160/nn_1219822/EN/Content/Health__Reporting/
GBEDownloadsB/KID2010,templateId=raw,property=publicationFile.pdf/KID2010.pdf” http://
www.rki.de/cln_160/nn_1219822/EN/Content/Health__Reporting/GBEDownloadsB/KID2010,
templateId=raw,property=publicationFile.pdf/KID2010.pdf (Accessed Dec 2010)
2. Umiker W.: Accuracy of Cytologic Diagnosis of Cancer of the Urinary Tract. Symposium on
Diagnostic Accuracy of Cytologic Technics 8:186-193,1964.
3. Badalament R.A., Hermansen D.K., et al : The Sensitivity of Bladder Wash Flow Cytometry,
Bladder Wash Cytology, and Voided Cytology in the Detection of Bladder Carcinoma. Cancer
60:1423-1427, 1987.
4. Grossmann H.B.: Markers for Bladder Cancer.
5. Kinders R., Jones T., et al: Complement Factor H or a Related Protein Is a Marker for Transitional
Cell Carcinoma of the Bladder. Clinical Cancer Research 4:2511-2520, 1998.
6. Corey M., Kinders R., et al: Factor H Related Proteins Are Upregulated In Bladder Cancer.
Proceedings of the American Association for Cancer Research 39: 263, 1998.
7. Austyn J. M., Wood K. J.: Principles of Cellular and Molecular Immunology. Oxford University
Press p. 522-554, 1993.
8. Corey M.J., Kinders R.J., et al: Enhancement of Complement-Mediated Lysis of Cancer Cells By
Anti-Factor H Antibodies. Proceedings of the American Association for Cancer Research 39: 304,
1998.
9. Sarosdy M.F., Hudson M.A., et al: Improved Detection of Recurrent Bladder Cancer Using the
Bard BTA stat Test. Urology 50(3):349 - 353,1997.
10. Raitanen M.-P., Marttila T., et al: The Bard BTA stat Test in Monitoring of Bladder Cancer. The
Journal of Urology 157: 28, 1997.
146
410591

FR
SEMBOLLERİN ANLAMI
Sembol Anlamı Sembol Anlamı
Ürün katalog numarası
Vücut Dışı Tanı için
Medikal Ürün
Üretici
Muhafaza edilmesi gereken
ısı aralığı
Üretim lot numarası
Kullanım talimatlarına
başvurun
Tekrar kullanmayınız
Güneş ışığından uzak tutunuz
EN
DE
ES
Son kullanma tarihi
Yeterli olduğu test miktarı
TR
RU
PL
CS
SV
PT
IT
bioNexia® BTA
147

BIOMERIEUX, mavi logo ve bioNexia, bioMérieux SA firmasına veya bağlı şirketlerine
ait kullanılan, beklemedeki ve/veya tescilli ticari markalardır.
CLSI, Clinical Laboratory and Standards Institute, Inc. firmasına ait tescilli ticari
markadır.
Diğer tüm ad ya da ticari markalar, ilgili sahiplerinin mülkiyetindedir.
bioMérieux SA
69280 Marcy-l‘Etoile-France
Tel: 33 (0) 478 87 20 00
Fax: 33 (0) 478 87 20 90
www.biomerieux.com/bionexia
RCS LYON 673 620 399
16359 A - 2010/12
148
410591