GENETIC SYSTEMS™ HIV-1 Ag EIA

More documents

Recommendations

Info

OBS ! Provfördelning kan kontrolleras visuellt i detta hanteringssteg. Efter tillsats av prov ändrar spädningsvätskan färg från grönt till blått för att visa att provet eller kontrollen är tillsatt i brunnen. När innehållet i varje brunn blandas väl är färgen enhetlig. Cellodlingsprover uppvisar eventuellt inte någon färgförändring beroende på det cellodlingsmedium som används. (Se punkt 12 angående automatisk verifiering - SPEKTROFOTOMETRISK VERIFIERING AV PROV- OCH REAGENSPIPETTERING) 5. Täck om möjligt mikroplattan med självhäftande film. Tryck fast den ordentligt över plattan så att det blir tätt. 6. Inkubera plattan i 60 ± 5 minuter vid 37 ± 1°C eller 40 ± 1°C i en statisk inkubator med torr värme. 7. Ta bort den självhäftande filmen. Aspirera innehållet i alla brunnar till en behållare för smittförande avfall (innehållande natriumhypoklorit). Fördela minst 0,370 ml tvättlösning till varje brunn. Vänta under en blötningstid på 20 till 60 sekunder. Sug upp igen. Upprepa detta 4 gånger (dvs. totalt minst 5 tvättar). Den återstående volymen måste vara mindre än 10 µL. (Om det behövs kan du torka mikroplattan genom att vända den upp och ned på ett absorberande papper). Om automatisk tvättare används ska samma förfarande följas. 8. Fördela snabbt 100 µL av konjugatarbetslösning 1 till alla brunnar. Konjugatet måste skakas varsamt innan användning. OBS ! Tillsats av konjugatarbetslösning 1 som är färgad gul kan kontrolleras visuellt vid detta steg av analysen. 9. Täck om möjligt mikroplattan med självhäftande folie. Inkubera plattan i 30 ± 5 minuter vid 37 ± 1°C eller 40 ±1°C i en statisk inkubator med torr värme. 10. Ta bort den självhäftande filmen. Aspirera innehållet i alla brunnar i en behållare för smittförande avfall (innehållande natriumhypoklorit). Fördela minst 0,370 ml tvättlösning till varje brunn. Vänta under en blötningstid på 20 till 60 sekunder. Sug upp igen. Upprepa detta 4 gånger (dvs. totalt minst 5 tvättar). Den återstående volymen måste vara mindre än 10 µl. (Om det behövs kan du torka mikroplattan genom att vända den upp och ned på ett absorberande papper.) 11. Fördela snabbt 100 µL av konjugatarbetslösning 2 till alla brunnar. Konjugatet måste skakas varsamt innan användning. Observera : Tillsats av konjugatarbetslösning 2 som är grönfärgad kan kontrolleras visuellt vid detta steg av analysen. 12. Täck om möjligt mikroplattan med självhäftande film. Inkubera plattan i 30 ± 5 minuter vid 37 ± 1°C eller 40 ± 1°C i en statisk inkubator med torr värme. 13. Ta bort den självhäftande filmen, töm alla brunnar genom att suga upp vätskan och tvätta minst 5 gånger enligt ovanstående beskrivning. Den återstående volymen måste vara mindre än 10 µl. (Om det behövs kan du torka remsorna genom att vända dem upp och ned på ett absorberande papper.) 14. Fördela snabbt i varje brunn 100 µl av framkallningslösningen (R8+R9) som beretts strax före användningen. Låt reaktionen fortgå i mörker i 30 ± 5 minuter vid rumstemperatur (18–30°C). Använd ingen självhäftande folie under denna inkubering. Obs ! Fördelningen av framkallningslösningen, som är rosafärgad, kan kontrolleras visuellt i denna fas av hanteringen. Det finns en klar färgskillnad mellan tomma brunnar och brunnar med den rosafärgade substratlösningen. (Se avsnitt 12 om automatisk verifiering : SPEKTROFOTOMETRISK PROV- OCH REAGENSPIPETTERING) 15. Tillsätt 100 µl av stopplösningen (R10). Använd samma ordningsföljd och fördelningshastighet som för substratlösningen. Homogenisera reaktionsblandningen. OBS ! Fördelningen av stopplösningen, som är färglös, kan kontrolleras visuellt i denna fas av hanteringen. Efter tillsats av stopplösningen försvinner substratets rosa färg (för negativa prover) eller ändrar färg från blått till gult (för positiva prover). 16. Torka noggrant av mikroplattans botten. Vänta minst 4 minuter efter tillsatsen av stopplösningen innan avläsning görs. Avläs den optiska densiteten vid 450/620-700 nm med hjälp av mikroplattans avläsare inom 30 minuter efter att reaktionen har avbrutits. 17. Kontrollera alla resultat med avseende på överensstämmelse mellan avläsning och provtillsats- och identifieringsprotokoll för plattan. 11 - BERÄKNING OCH UTVÄRDERING AV RESULTAT 1) Validering av resultat En analysomgång är giltig om följande kriterier uppfylls : • Absorbansvärdet för varje negativ kontroll (NC) (eller cellodlingskontroll, om tillämpligt) är större än 0,000 AU och mindre än eller lika med 0,100 AU. Ett värde för den negativa kontrollen kan kasseras om det faller utanför gränsvärdet. NC-medelvärdet kan beräknas från de två återstående absorbansvärdena. Om två eller fler negativa kontroller ligger utanför gränsen, är plattan ogiltig och testet måste upprepas. • Medelvärdet för de positiva kontrollerna (PCX) måste vara större än eller lika med 0,500 AU och de enskilda absorbansvärdena måste ligga inom intervallet för reproducerbarheten på 0,65 till 1,35 gånger PCX. Inget värde för den positiva kontrollen får uteslutas. 82
2) Beräkning av absorbansmedelvärde Från de validerade kontrollerna kan absorbansmedelvärdet bestämmas för de negativa kontrollerna och de positiva kontrollerna genom att summan av respektive kontroll divideras med antalet godkända kontroller. 3) Gränsvärde Bestäm gränsvärdet genom att addera 0,070 till NC-medelvärdet (NCX) enligt nedanstående exempel : NCX = 0,033 Gränsvärde = 0,070 + 0,033 = 0,103 4) Utvärdering av resultat Förekomst eller frånvaro av <strong>HIV</strong>-1 antigen bestäms genom att provets absorbansvärde jämförs med gränsvärdet. Prover med absorbansvärden
Page 1:
GENETIC SYSTEMS HIV-1 Ag EIA 192 Te
Page 4 and 5:
CONTENTS 1 - CLINICAL VALUE 2 - PRI
Page 6 and 7:
3 - CONTENTS OF THE GENETIC SYSTEM
Page 8 and 9:
Remark : For washing solution (R2,
Page 10 and 11:
10 Strictly follow the proposed pro
Page 12 and 13:
13 - PERFORMANCES Sensitivity • 1
Page 15 and 16:
Page 17 and 18:
1 - INTÉRÊT CLINIQUE L’agent é
Page 19 and 20:
• Dispositif de lavage manuel, se
Page 21 and 22:
1) Réactifs prêts à l’emploi R
Page 23 and 24:
8. Distribuer rapidement 100 µl de
Page 25 and 26:
dilution "Ag VIH SFTS 96" ont tous
Page 27 and 28:
Page 29 and 30:
1 - INTERÉS CLÍNICO El agente eti
Page 31 and 32: • Aparato de lectura para micropl
Page 33 and 34: 8 - RECONSTITUCIÓN DE LOS REACTIVO
Page 35 and 36: ha de agitar antes de su empleo. N.
Page 37 and 38: Sensibilidad analítica El umbral d
Page 39 and 40: GENETIC SYSTEMS HIV-1 Ag EIA 192 Te
Page 41 and 42: 1 - KLINISCHE BEDEUTUNG Erreger des
Page 43 and 44: • Wasserbad oder Trockeninkubator
Page 45 and 46: 8 - REKONSTITUTION DER REAGENZIEN A
Page 47 and 48: 8. 100 µl der Konjugat-Arbeitslös
Page 49 and 50: Diagnostische Spezifität Die diagn
Page 53 and 54: 1 - INTERESSE CLINICO L'agente ezio
Page 55 and 56: • Strip non sensibilizzate qualor
Page 57 and 58: 8 - RICOSTITUZIONE DEI REAGENTI Tut
Page 59 and 60: 8. Distribuire rapidamente 100 µl
Page 61 and 62: Sensibilità analitica La soglia di
Page 65 and 66: 1 - INTERESSE CLÍNICO O agente eti
Page 67 and 68: • Tiras não sensibilizadas para
Page 69 and 70: 8 - RECONSTITUIÇÃO DOS REAGENTES
Page 71 and 72: 8. Distribuir rapidamente 100 µl d
Page 73 and 74: - O painel de diluição "Ag VIH SF
Page 77 and 78: 1 - KLINISK BETYDELSE Etiologisk ag
Page 79 and 80: • Engångshandskar. • Absorbera
Page 81: förbrukning (24 timmar efter bered
Page 87 and 88: 1 - KLINISK VÆRDI Det ætiologisk
Page 89 and 90: • Rene plastikbeholdere (af enten
Page 91 and 92: • Reagenser til rekonstituering S
Page 93 and 94: 11 - BEREGNING OG FORTOLKNING AF RE
Page 95 and 96: • Ved cellekulturprøver må prø
show all

GENETIC SYSTEMS™ HIV-1 Ag EIA

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

Delete template?

Save as template?