GENETIC SYSTEMS™ HIV-1 Ag EIA

förbrukning (24 timmar efter beredning) på behållaren. Blanda arbetslösningen försiktigt före användning. Efter
blandning är konjugatarbetslösning 1 gul och konjugatarbetslösning 2 grön.
Beredning av konjugatarbetslösning 1 eller 2 per remsa
Antal remsor 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12* 24**
som ska användas
Mängd konjugat 20 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 240
koncentrat (µl)
Mängd konjugat 2 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 24
spädningsvätska (ml)
* En hel platta; **Två hela plattor
Enzym framkallningslösning (R8 + R9)
Späd kromogen (R9) 1:11 i substratbuffert (R8). (t.ex.: 1 mL reagens R9 +10 mL reagens R8). 10 mL krävs och är
tillräckligt för 1 till 12 remsor. Homogenisera.
9 - FÖRVARINGSFÖRHÅLLANDEN - HÅLLBARHET
Testet bör förvaras vid +2-8°C. Varje reagens som ingår i Genetic Systems HIV-1 Ag EIA test kan användas efter
första öppnandet till det sista förbrukningsdatum som anges på förpackningen med undantag för nedanstående
särskilda anvisningar :
R1 : Efter att den vakuumförslutna påsen har öppnats är mikrobrunnsremsorna stabila i 1 månad om de förvaras vid
+2-8°C i väl återförsluten påse.
R2 : Spädd tvättlösning är stabil i 14 dagar i plastbehållare vid förvaring i +2-8°C.
R8 + R9 : Efter rekonstituering är reagenset stabilt i 6 timmar, vid mörk förvaring i rumstemperatur (18-30°C).
R4 - R5 : Efter rekonstituering är konjugatarbetslösningarna stabila i 24 timmar i rumstemperatur (18-30°C).
10 - TESTFÖRFARANDE
Nedan beskrivs två förfaranden för detektion av HIV-1 p24 antigen i humant serum-, plasma- eller cellodlingsprov :
Förfarande Inkubering Inkubering av Inkubering av Färgav
prov konjugat 1 konjugat 2 framkallning
37°C Statisk inkubering Statisk inkubering Statisk inkubering Statisk inkubering
inkubering 37±1°C, 37±1°C, 37±1°C, 18 till 30°C
torr värme torr värme torr värme i mörker
60 ± 5 min. 30 ± 5 min. 30 ± 5 min. 30 ± 5 min.
40°C IStatisk inkubering Statisk inkubering Statisk inkubering Statisk inkubering
inkubering 40 ± 1°C, 40 ± 1°C, 40 ± 1°C, 30 ± 1 min.
torr värme torr värme torr värme torr värme
60 ± 5 min. 30 ± 5 min. 30 ± 5 min. 30 ± 5 min.
För prover som ursprungligen analyserats vid antingen 37°C eller 40°C ska eventuell upprepad analys eller
konfirmation utföras med samma förfarande.
Den förväntade analystiden för detta test är ungefär 3,5–4 timmar från start av den första inkubationen. Varje
omgång av analysen måste utföras till slut utan avbrott sedan den väl startats.
Två positiva kontroller och tre negativa kontroller ska analyseras på varje platta.
Tre cellodlingsmediumkontroller behövs i stället för förpackningens negativa kontroll (C0) om cellodlingsprover
testas.Gränsvärdet för patientprover fastställs med kontrollerna på varje separat platta.
Undvik att utsätta plattorna för ljus under det sista inkuberingssteget (efter tillsats av TMB-arbetslösning).
Följ föreslaget förfarande noga och följ god laboratoriesed enligt nedan :
1. Definiera noga provfördelnings- och identifieringsprotokoll.
2. Bered tvättlösningen.
3. Ta ut bricka och remsor (R1) ur skyddsförpackningen.
4. Applicera direkt, utan föregående tvätt av plattan, i tur och ordning:
4.1 50 µl spädningsvätska i varje brunn.
4.2 150 µl negativt kontrollserum (C0) i brunn A1- B1 - C1.
4.3 150 µl positivt kontrollserum (C1) i brunn D1- E1.
4.4 150 µl prov i brunn G1, etc.
Tre cellodlingsmediumkontroller behövs i stället för förpackningens negativa kontroll om cellodlingsprover
analyseras. Kontrollera att spädningsvätskan blandas väl med provet (eller kontrollen).
81