GENETIC SYSTEMS™ HIV-1 Ag EIA

• Utför ej testet i närvaro av reaktiva ångor (syraångor, alkaliska ångor, aldehydångor) eller damm som skulle
kunna ändra konjugatets enzymatiska aktivitet.
• Använd glasvaror som har tvättats grundligt och sköljts i destillerat vatten eller använd helst engångsmaterial.
• Se till att mikroplattan inte hinner torka mellan tvättprocedur och reagenstillsats.
• Använd en ny pipettspets för varje prov.
• Kontrollera exakthet, precision och funktion av använda pipetter och instrument.
• Tvätt: Följ noggrant det beskrivna tvättförfarandet för bästa möjliga testresultat.
• Använd aldrig samma behållare för fördelning av konjugat- och framkallningslösning.
• Den enzymatiska reaktionen är mycket känslig för metalljoner. Därför får ingen metall komma i kontakt med de
olika konjugat- eller substratlösningarna.
• Framkallningslösningen (substratbuffert och kromogen) måste vara rosafärgad. Om den rosa färgen förändras
några minuter efter rekonstitueringen är detta en indikation på att reagenset inte kan användas och måste ersättas.
Framkallningslösningen kan beredas i rena engångstråg av plast eller i glasbehållare som först har förtvättats med
1N HCl och därefter sköljts noggrant med destillerat vatten och torkats. Detta reagens måste förvaras i mörker.
7 - PROVTAGNING OCH PROVHANTERING
Tag blodprov enligt sedvanlig praxis.
Serum-, plasma- och cellodlingsprover kan användas. Följande antikoagulantia har utvärderats och befunnits
acceptabla: EDTA, heparin, natriumcitrat, CPDA-1 och ACD. Prover som tagits i rör med antikoagulantia ska fyllas
helt upp till markeringen för att undvika spädningsfel.
Avlägsna serum eller plasma från koagel eller röda blodkroppar så fort som möjligt för att undvika hemolys. En
utpräglad hemolys kan inverka på testets prestanda. Prover med synliga partiklar ska renas genom centrifugering
före analys. Suspenderade fibrinaggregat eller fibrinpartiklar kan ge falskt positiva resultat.
Cellodlingsprover som kräver spädning före analys kan spädas med cellodlingsmedium som motsvarar det som
användes vid odling av cellerna.
ANVÄND EJ VÄRMEINAKTIVERADE PROVER.
Proverna bör förvaras vid +2-8°C om screeningen utförs inom 7 dagar, eller djupfrysas vid –20°C. Plasma ska tinas
snabbt genom uppvärmning några minuter i vattenbad i 40°C (för att undvika fibrinutfällning).
På grund av instabilitet hos HIV Ag får temperaturer över 40°C inte användas.
Prover som har fryst/tinats fler än 3 gånger får inte användas.
Om proverna ska transporteras, skall de förpackas enligt regler för transport av etiologiska ämnen.
ANVÄND EJ KONTAMINERADE, HYPERLIPEMISKA ELLER HYPERHEMOLYSERADE SERUM- ELLER PLASMAPROVER.
Kommentar : Prover som innehåller upp till 80 mg/l bilirubin, 36 mg/l Ig M eller IgG, lipemiska prover som
innehåller upp till motsvarande 5 g/l lipider och hemolyserade prover som innehåller upp till 5 g/l hemoglobin
påverkar inte resultaten.
8 - REKONSTITUTION AV REAGENS
Obs! Låt reagens anta rumstemperatur (18–30°C) före användning med undantag för konjugatkoncentrat 1 och 2
(R4 och R5).
1) Reagens färdiga att använda
Reagens R1 : Mikroplatta
Varje bricka innehållande 12 remsor är förpackad i en försluten foliebelagd påse. Klipp upp påsen med sax eller
skär upp den med skalpell 0,5–1 cm ovanför markeringen. Öppna påsen och ta ut brickan. Lägg tillbaka remsor
som inte används i påsen. Återförslut påsen och förvara den vid +2–8 °C.
Reagens R3 : Spädningsvätska
Reagens C0 : Negativt kontrollserum
Reagens C1 : Positivt kontrollserum
Reagens R10 : Stopplösning
2) Reagens att späda
Tvättlösning (X10) (R2)
Späd tvättlösningen R2 1:10 med destillerat vatten. Homogenisera.
OBS ! Genetic Systems EIA tvättlösningskoncentrat (30X), som ingår i andra Genetic Systems testkit, kan även
användas i denna analys. Späd 1 del koncentrat med 29 delar vatten.
Konjugatarbetslösning 1 (R4 + R6) och konjugatarbetslösning 2 (R5 + R6)
Konjugat 1 (R4) och 2 (R5) levereras som 100X koncentrat. Bered separat konjugatarbetslösning 1 och konjugatarbetslösning
2 genom att späda varje konjugat 1:101 i konjugatspädningsvätska (R6). Bered i rena plastbehållare.
Anteckna konjugatkoncentratets partinummer, datum och klockslag för beredning samt datum och klockslag för sista
80