You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
1 - KLINISK BETYDELSE<br />
Etiologisk agens för förvärvat immunbristsyndrom (AIDS) är ett retrovirus som benämns humant immunbristvirus (<strong>HIV</strong>).<br />
<strong>HIV</strong> har isolerats från patienter med AIDS och från friska personer som löper hög risk för att drabbas av AIDS.( 1,2 )<br />
Det är känt att smitta överförs genom intim sexuell kontakt, genom användning av smittade nålar, genom transfusion<br />
av smittade blodprodukter och perinatalt från infekterad moder till fetus eller barn.( 1,8 )<br />
Bevis på föregående exponering för <strong>HIV</strong> påvisas genom närvaro av virusspecifik antikropp i en persons serum eller<br />
plasma efter virusexponering. Innan antikroppar kan påvisas, förekommer en tidig tidsperiod när fria virusantigen<br />
cirkulerar i blodet. En av dessa virusantigen är virusets främsta kärnprotein, p24. <strong>HIV</strong>-antigentester kan användas för<br />
att påvisa förekomst av virusantigen, och därmed <strong>HIV</strong>-infektion, före serokonversion. Antigenemiperioden, innan <strong>HIV</strong>antikroppar<br />
visar sig, varierar och kan vara i dagar eller veckor hos infekterade personer. Vid serokonversion hos en<br />
person förenas virusspecifika antikroppar med cirkulerande antigen så att nivåerna fria antigen i blodet faller eller<br />
försvinner helt.( 9,11 ) Antigenemi kan senare åter utvecklas efter hand som sjukdomen fortskrider.( 12 )<br />
Genetic Systems <strong>HIV</strong>-1 Antigen <strong>EIA</strong> är avsett att användas för screening av blod- och plasmaprodukter och som ett<br />
hjälpmedel vid diagnos och prognos i samband med <strong>HIV</strong>-1-infektion.<br />
2- PRINCIP FÖR <strong>GENETIC</strong> SYSTEM TM <strong>HIV</strong>-1 ANTIGEN <strong>EIA</strong><br />
Genetic Systems <strong>HIV</strong>-1 Antigen <strong>EIA</strong> är en enzymatisk immunoanalys för detektion av <strong>HIV</strong>-1 kärnantigen (p24) i<br />
humana serum- och plasmaprover. Genetic Systems <strong>HIV</strong>-1 Antigen konfirmations-test (kod 71121) är ett tilläggstest<br />
som används tillsammans med <strong>HIV</strong>-1 Antigen <strong>EIA</strong> för att konfirmera närvaro av <strong>HIV</strong> p24 antigen i upprepat reaktiva<br />
prover.<br />
Genetic Systems <strong>HIV</strong>-1 Antigen <strong>EIA</strong> grundar sig på användning av en fast fas som preparerats med monoklonal<br />
antikropp (mus) mot <strong>HIV</strong>-1-antigen, ett första konjugat som preparerats med biotinylerad anti-p24 antikropp (får) och<br />
ett andra konjugat som preparerats med avidin bundet till pepparrotsperoxidas.<br />
Testutförandet omfattar följande reaktionssteg:<br />
1. Spädningsvätska tillsätts varje brunn. De prover som ska testas och kontrollserum fördelas till respektive brunnar.<br />
Om <strong>HIV</strong>-1 <strong>Ag</strong> förekommer i provet, binder det till antikroppar, som brunnen är klädd med. Eventuellt <strong>HIV</strong>-1 <strong>Ag</strong> som<br />
bundit till brunnen stannar kvar under efterföljande tvätt.<br />
Färgen på spädningsvätskan ändras från grönt till blått, vilket bekräftar prov-/kontroll-tillsats i brunnen.<br />
2. Konjugat 1 tillsätts därefter till varje brunn och plattan inkuberas. Den biotinylerade anti-p24 antikroppen (får) i<br />
konjugat 1 binder till eventuell <strong>HIV</strong>-1 <strong>Ag</strong> som är bunden till brunnen. Antigen-antikropps-komplexet stannar kvar<br />
under efterföljande tvättsteg.<br />
3. Konjugat 2 fördelas därefter till brunnarna och inkuberas. Avidin i konjugat 2 binder specifikt till antikropps-<strong>HIV</strong>-1<br />
<strong>Ag</strong>-komplexen bundna till brunnarnas väggar. Eventuellt obundet konjugat avlägsnas genom tvätt.<br />
4. TMB-arbetslösning tillsätts till plattan och inkuberas. En blå eller blågrön färg utvecklas i förhållande till mängden<br />
<strong>HIV</strong>-1 <strong>Ag</strong> som förekommer i provet. Framkallningen stoppas genom tillsats av syra som ändrar den blågröna färgen<br />
till gult. Provernas och kontrollernas optiska absorbans bestäms med spektrofotometri vid en våglängd på 450/<br />
620–700 nm.<br />
77
Change language