GENETIC SYSTEMS™ HIV-1 Ag EIA

6 - PRECAUÇÕES
A qualidade dos resultados está dependente do cumprimento das seguintes boas práticas de laboratório:
• Não utilizar reagentes após o termo do respectivo prazo de validade.
• Não modificar o modo de funcionamento.
• Reconstituir cuidadosamente os reagentes, evitando qualquer contaminação.
• Não misturar reagentes de lotes diferentes no decorrer de um mesmo ensaio.
Nota : É possível utilizar outros lotes de solução de lavagem (R2, identificado como 10 x a azul na etiqueta), de
tampão substracto (R8, identificado como TMB buf. a azul), de cromogénio (R9, identificado como TMB 11x . a
roxo) e de solução de paragem (R10, identificado como 1N a vermelho), para além dos fornecidos no dispositivo,
desde que se utilize apenas um único destes lotes no decorrer de um mesmo ensaio. Estes reagentes podem ser
utilizados com outros produtos da nossa empresa. Para obter informações detalhadas é favor consultar os nossos
serviços técnicosAntes de utilizar, aguardar 30 minutos para que os reagentes estabilizem à temperatura do
laboratório (18-30°C).
• Não efectuar o teste em presença de vapores reactivos (ácidos, alcalinos, aldeídos) ou de poeiras que possam
alterar a actividade enzimática dos conjugados.
• Utilizar recipientes em vidro perfeitamente lavados e enxaguados com água destilada ou, de preferência, utilizar
material descartável.
• Não deixar que a microplaca seque entre o final da lavagem e o princípio da distribuição dos reagentes.
• Verificar se as pipetas são exactas e precisas e se os aparelhos utilizados se encontram em bom estado de
funcionamento.
• Lavagem: é indispensável respeitar escrupulosamente os procedimentos de lavagem a fim de obter os melhores
desempenhos do teste.
• Nunca utilizar o mesmo recipiente para distribuir o conjugado e a solução de revelação.
• A reacção enzimática é muito sensível a todos os metais ou iões metálicos. Consequentemente, nenhum elemento
metálico deverá entrar em contacto com as diferentes soluções que contêm conjugados ou o substracto.
• A solução de revelação (tampão substracto + cromogénio) deve ser de cor rosa. O aparecimento de qualquer
outra coloração nos minutos que se seguem à reconstituição indica que o reagente não pode ser utilizado e deve
ser substituído.
Para esta preparação utilizar, de preferência, recipientes e material de distribuição em plástico descartável ou
recipientes em vidro previamente lavados com ácido clorídrico 1N, enxaguados com água destilada e
devidamente limpos. Conservar esta solução ao abrigo da luz.
7 - AMOSTRAS
Recolher uma amostra de sangue de acordo com a prática habitual.
As amostras que podem ser utilizadas são: soro, plasma ou amostras de cultura celular. Os anticoagulantes EDTA,
heparina, citrato de sódio, CPDA-1 e ACD foram estudados e são considerados como utilizáveis. As amostras
recolhidas por meio de tubos anticoagulantes devem encher o tubo até ao nível indicado, a fim de evitar qualquer
diluição incorrecta.
Extrair o soro ou o plasma do coágulo ou dos glóbulos vermelhos, o mais rapidamente possível a fim de evitar
qualquer hemólise. Uma hemólise muito pronunciada pode afectar o desempenho do teste. As partículas ou
agregados de fibrina em suspensão podem dar origem a resultados falsamente positivos.
As amostras de cultura de células que requerem uma diluição antes da utilização podem ser diluídas com um meio
de cultura celular equivalente ao meio utilizado para a cultura.
NÃO UTILIZAR AMOSTRAS INACTIVADAS POR ACÇÃO DO CALOR.
As amostras devem ser conservadas a + 2-8°C, se o teste de detecção for efectuado no prazo de 7 dias, ou
conservadas congeladas a -20°C. Os plasmas devem ser submetidos a uma descongelação rápida por
aquecimento durante alguns minutos a 40°C (para limitar a precipitação de fibrina).
Dada a instabilidade da Ag HIV ao calor, não poderão utilizar-se temperaturas superiores a 40°C. Não utilizar
amostras que tenham sido congeladas e descongeladas mais de 3 vezes.
Se for necessário transportar as amostras, estas deverão ser acondicionadas em cumprimento da regulamentação
em vigor relativa ao transporte de agentes etiológicos.
Extrair o soro ou o plasma do coágulo ou dos glóbulos vermelhos o mais rapidamente possível a fim de evitar
qualquer hemólise.
NÃO UTILIZAR SOROS OU PLASMAS CONTAMINADOS, HIPERLIPÉMICOS OU HIPER-HEMOLIZADOS.
Nota : Não se observou qualquer interferência em amostras contendo 80 mg/l de bilirrubina, 36 mg/l de
imunoglobulina M ou G, bem como em amostras lipémicas contendo até 5 g/l de lípidos e em amostras
hemolizadas contendo até 5 g/l de hemoglobina.
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