GENETIC SYSTEMS™ HIV-1 Ag EIA

Esempio :
CNX = 0,033
Valore-soglia = 0,070 + 0,033 = 0,103
4 - Interpretazione dei risultati
La presenza o assenza degli antigeni HIV-1 è determinata confrontando, per ciascun campione, l'assorbanza
registrata con quella del valore-soglia calcolato.
I campioni con valori di assorbanza inferiori a 0,000 devono essere sottoposti a un nuovo test. I campioni con valori
di assorbanza superiori ai limiti di linearità del lettore sono considerati reattivi.
I campioni con valori di assorbanza inferiori al valore-soglia sono considerati non reattivi al test Genetic Systems
HIV-1 Antigen EIA e possono essere considerati negativi per l'antigene HIV-1. In tal caso, non è necessario effettuare
un altro test.
I campioni con valori di assorbanza superiori o uguali al valore-soglia sono considerati inizialmente reattivi al test
Genetic Systems HIV-1 Antigen EIA. Al fine di validare i risultati del test iniziale, si consiglia di ripetere due volte il
test per quei campioni risultati inizialmente reattivi. Se, in seguito a questi ulteriori test, i due nuovi valori di
assorbanza ottenuti risultano inferiori al valore-soglia, il risultato iniziale è considerato non riproducibile e il
campione di origine viene dichiarato negativo per l'antigene HIV-1 secondo il test “Genetic Systems HIV-1
Antigen”. L'origine delle reazioni non riproducibili è spesso correlata alle seguenti cause :
• lavaggio insufficiente delle micropiastre,
• contaminazione crociata di campioni non reattivi da parte di un campione ad alto titolo di antigene HIV-1.
• contaminazione puntuale della soluzione di rivelazione da parte di agenti chimici ossidanti (candeggina, ioni
metallici, ecc.)
• contaminazione puntuale della soluzione di arresto.
Se, in seguito alla ripetizione del dosaggio, il valore di assorbanza misurato per uno dei due doppietti risulta
superiore o uguale al valore-soglia, il risultato iniziale è considerato riproducibile e il campione viene dichiarato
reattivo secondo il test Genetic Systems HIV-1 Antigen, conformemente ai limiti descritti di seguito. I campioni la
cui reattività è stata ripetuta con il test Genetic Systems HIV-1 Antigen – EIA devono essere confermati con il test
Genetic Systems HIV-1 Antigen Confirmatory Assay (codice: 71121). Il campione può essere considerato positivo
per l'antigene HIV-1 soltanto se l'antigene HIV-1 viene neutralizzato nel corso della procedura di conferma.
12 - VERIFICA SPETTROFOTOMETRICA DELLA DISTRIBUZIONE DEI CAMPIONI
VERIFICA SPETTROFOTOMETRICA DEL DEPOSITO DEI CAMPIONI E DEI REAGENTI
Dopo aver proceduto alla distribuzione del diluente per i campioni (R3) e successivamente a quella dei campioni
stessi, è possibile verificare la presenza dei campioni da testare nei pozzetti mediante una lettura spettrofotometrica
a 620 nm: la densità ottica di un pozzetto contenente un campione dovrà essere superiore a 0,250 (una DO
inferiore indica una cattiva distribuzione di quest'ultimo).
Nota: i campioni di coltura cellulare possono non cambiare colore in funzione del terreno di coltura impiegato. In
tal caso la presente verifica automatica non deve essere eseguita.
VERIFICA DEL DEPOSITO DELLA SOLUZIONE DI RIVELAZIONE
È possibile verificare la presenza della soluzione di rivelazione rosa mediante lettura automatica a 490 nm : un
pozzetto contenente la soluzione di rivelazione deve avere una densità ottica superiore a 0,100 (una DO inferiore
indica una cattiva distribuzione della soluzione di rivelazione).
Vi è una differenza evidente tra la colorazione di un pozzetto vuoto e quella di un pozzetto contenente la soluzione
di rivelazione rosa.
13 - PRESTAZIONI
Sensibilità diagnostica
• 138 campioni di pazienti affetti da HIV a diversi stadi di infezione (AIDS, ARC, altri) sono stati sottoposti a test
e risultati positivi con il test Genetic Systems HIV-1 Antigen EIA.
• Sono stati esaminati 20 panel di sieroconversione ben documentati. I risultati ottenuti sono paragonabili ai risultati
ottenuti con altri test di dosaggio dell'antigene HIV.
• 55 surnatanti di colture cellulari di HIV-1 (di cui 53 del gruppo M e 2 del gruppo O) come pure il panel di
diluizione “Ag VIH SFTS 96” sono risultati tutti positivi con il test Genetic Systems HIV-1 Antigen EIA ad eccezione
di 2 diluizioni di un surnatante di coltura cellulare di gruppo O.
- I 53 surnatanti di colture cellulari di HIV-1 del gruppo M sono composti dai seguenti genotipi: 10 di genotipo
A, 10 di B, 9 di C, 5 di D, 11 di E, 2 di F, 2 di G, 1 di H, 2 di J e 1 di N.
- Il panel di diluizione “Ag VIH SFTS 96” comprende i seguenti genotipi: A, B, C, D, E, F, G, H del gruppo M e
1 genotipo del gruppo O.
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