GENETIC SYSTEMS™ HIV-1 Ag EIA

4) Interpretation der Ergebnisse
Das Vorliegen oder Nichtvorhandensein von HIV-1-Antigen wird durch den Vergleich der Extinktionen jeder Probe
mit dem Grenzwert ermittelt.
Proben mit Extinktionen größer 0,000 müssen erneut getestet werden. Proben mit Extinktionen, die oberhalb der
Linearitätsgrenze des Photometers liegen, sollten als reaktiv ausgegeben werden.
Proben mit Extinktionen kleiner als der Grenzwert gelten als nicht reaktiv im Genetic Systems HIV-1 Antigen EIA
und können als negativ für HIV-1-Antigen betrachtet werden. Diese Proben müssen nicht weiter getestet werden.
Proben mit Extinktionen größer oder gleich dem Grenzwert gelten als initial reaktiv im Genetic Systems HIV-1
Antigen EIA. Jede initial reaktive Probe muss in Doppelbestimmung erneut getestet werden, damit diese
Testergebnisse validiert werden können. Liegen die Extinktionen beider Doppelbestimmungen nach der
Testwiederholung unterhalb des Grenzwertes, wird die Probe als nicht wiederholt reaktiv und somit negativ für HIV-
1-Antigen bewertet. Aus folgenden Gründen kann es zu nicht wiederholt reaktiven Proben kommen:
• nicht korrekt durchgeführte Waschschritte der Mikrotiterplatten
• Kreuzkontamination nicht reaktiver Proben mit HIV-1 Ag aus einer Probe mit hoher Reaktivität Kontamination des
Substratpuffers durch Oxidationsmittel (Bleichlauge, Metallionen, etc.)
• Kontamination der Stopplösung
Ist die Extinktion einer der beiden Doppelbestimmungen nach der Testwiederholung größer oder gleich dem
Grenzwert, ist das anfängliche Ergebnis reproduzierbar und die Probe muss gemäß den nachfolgend aufgeführten
Grenzen des Tests als reaktiv im Genetic Systems HIV-1 Antigen EIA bewertet werden. Proben, die im Genetic
Systems HIV-1 Antigen EIA wiederholt reaktiv waren, können mit dem Genetic Systems HIV-1 Antigen
Bestätigungstest (Artikel-Nr. 71121) überprüft werden. Die Probe kann nur dann als positiv für HIV-1 Antigen
betrachtet werden, wenn das HIV-1 Antigen im Bestätigungstest neutralisiert werden kann.
12 - SPEKTROPHOTOMETRISCHE ÜBERPRÜFUNG DER PROBEN-
UND REAGENZPIPETTIERUNG
Spektrophotometrischz überprüfung der proben
Nach Zugabe des Probenverdünnungsmittels (R3) und der Proben kann das Vorhandensein von zu testenden Proben
in den Vertiefungen durch eine spektrophotometrische Messung bei 620 nm überprüft werden: Bei einer Vertiefung
mit Probe liegt die optische Dichte größer 0,250 (eine niedrigere OD weist auf eine schlechte Pipettierung der Probe hin).
Anmerkung : Zellkulturproben zeigen je nach verwendetem Zellkulturmedium keine Farbveränderung an. In diesem
Fall kann keine automatische Überprüfung durchgeführt werden.
Überprüfung der Pipettierung der Entwicklungslösung
Das Vorhandensein von pinkfarbener Entwicklungslösung in den Vertiefungen kann durch automatisches Ablesen bei
490 nm überprüft werden: Bei einer Vertiefung mit Entwicklungslösung muss die optische Dichte über 0,100 liegen
(eine niedrigere OD weist auf eine schlechte Pipettierung der Entwicklungslösung hin).
13 - LEISTUNGSFÄHIGKEIT DES TESTS
Sensitivität
• 138 HIV-infizierte Patienten in unterschiedlichen Stadien (u. a. AIDS, ARC) wurden getestet und waren im Genetic
Systems HIV-1 Antigen EIA positiv.
• 20 gut dokumentierte Serokonversionspanels wurden untersucht. Die erzielten Ergebnisse sind mit denen eines
anderen HIV Ag-Assays vergleichbar.
• 55 HIV-1-Zellkulturüberstande (53 der Gruppe M und 2 der Gruppe O) und das Verdünnungspanel « Ag VIH SFTS
96 » waren im Genetic Systems HIV-1 Antigen EIA-Test positiv, außer 2 Verdünnungen der Zellkulturüberstände
der Gruppe O.
- Die 53 Zellkulturüberstände der HIV-1-Gruppe M bestanden aus den folgenden Genotypen: 10 Genotypen A,
10 B, 9 C, 5 D, 11 E, 2 F, 2 G, 1 H, 2 J und 1 N.
- Das Verdünnungspanel « Ag VIH SFTS 96 » bestand aus folgenden Genotypen: Genotypen A, B, C, D, E, F, G,
H der Gruppe M und 1 der Gruppe O.
Analytische Sensitivität
Die Sensitivitätsgrenze des Tests wurde mit mehreren Verdünnungen, die aus dem französischen Standard
(gereinigtes Viruslysat des Genotypen B, verdünnt mit negativem citriertem Plasma) und dem BBI-Panel (PRA 801)
hergestellt wurden, evaluiert. Die Sensitivitätsgrenze lag bei beiden Protokollen bei 8 pg/ml HIV Ag.
Die Kalibrierungskurve des HIV-1 Ag Standards (Code 72217) ist zwischen 0 und 100 pg/ml linear.
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