GENETIC SYSTEMS™ HIV-1 Ag EIA

6 - PRECAUCIONES
La calidad de los resultados depende del respeto de las buenas prácticas de laboratorio siguientes :
• No se utilizarán los reactivos después de la fecha de caducidad.
• No se modificará el modo operatorio.
• Se reconstituirán con sumo cuidado los reactivos y se evitará cualquier contaminación.
• No mezclar en un mismo ensayo reactivos que procedan de lotes diferentes.
Nota: se pueden utilizar otros lotes de solución de lavado (R2, identificada 10 x en azul sobre la etiqueta), de
tampón sustrato (R8, identificado TMB buf. en azul), de cromógeno (R9, identificado TMB 11x. en violeta) y de
solución de parada (R10, identificado 1N en rojo), diferentes a los suministrados en el kit siempre y cuando se
utilice un mismo y único lote durante todo el ensayo. Estos reactivos también pueden utilizarse con otros productos
de nuestro laboratorio; contacte con nuestros servicios técnicos para una información más detallada.
• Antes de la utilización, se esperarán 30 minutos para que los reactivos se equilibren a la temperatura del laboratorio (18-30°C).
• No se llevará a cabo el test en presencia de vapores reactivos (ácidos, alcalinos, aldehídos) o de polvos que
pudieran alterar la actividad enzimática de los conjugados.
• Se utilizarán frascos de vidrio perfectamente lavados y enjuagados con agua destilada o, con preferencia,
material de uso único.
• No se dejará secar la microplaca entre el final del lavado y el principio de la distribución de los reactivos.
• Se verificará la exactitud y la precisión de las pipetas y el buen funcionamiento de los aparatos utilizados.
• Lavado: es indispensable respetar escrupulosamente los procedimientos de lavado con el fin de obtener los
resultados máximos del test.
• No se utilizará jamás el mismo recipiente para distribuir el conjugado y la solución de revelado.
• La reacción enzimática es muy sensible a todo metal o iones metálicos. En consecuencia, ningún elemento
metálico deberá entrar en contacto con las diferentes soluciones que contienen los conjugados o el substrato.
• La solución de revelado (tampón sustrato + cromógeno) debe estar coloreada en rosa. La aparición de otra
coloración en los minutos siguientes a la reconstitución indica que el reactivo es inutilizable y se debe sustituir.
Para esta preparación, utilizar preferentemente recipientes y material de distribución de plástico de uso único o
una cristalería previamente lavada con ácido clorhídrico 1N y perfectamente aclarada con agua destilada y
secada. Conservar esta preparación protegida de la luz.
7 - MUESTRAS
Se obtendrá una muestra de sangre según las prácticas habituales.
Las muestras que se pueden utilizar son: suero, plasma o las muestras de cultivo celular. Los anticoagulantes EDTA,
heparina, citrato sódico, CPDA-1 y ACD han sido evaluados y están considerados como utilizables. La cantidad de
las muestras obtenidas con la ayuda de tubos anticoagulantes deberá llegar hasta la altura del nivel indicado, con
el fin de evitar una mala dilución.
Se extraerá cuanto antes el suero o el plasma del coágulo o de los glóbulos rojos para evitar cualquier hemólisis.
Una hemólisis muy pronunciada puede afectar los resultados del test. Las muestras que tengan agregados han de
ser clarificadas mediante centrifugación antes del test. Las partículas o los agregados de fibrina en suspensión
pueden dar resultados falsamente positivos.
Las muestras de cultivo de células que necesitan una dilución antes de su utilización pueden diluirse con un medio
de cultivo celular equivalente al medio utilizado para el cultivo.
NO SE UTILIZARÁN MUESTRAS INACTIVADAS POR EL CALOR.
Las muestras se conservarán a + 2-8°C si la detección se lleva a cabo durante los 7 días posteriores a su obtención,
o bien se pueden conservar congeladas a – 20°C. Los plasmas se someterán a un descongelado rápido por
calentamiento durante varios minutos a 40°C (para limitar la precipitación de fibrina).
Debido a la inestabilidad del Ag VIH al calor, no se podrán utilizar temperaturas superiores a 40°C. Las muestras
que han sido congeladas y descongeladas más de 3 veces no se deberán utilizar.
Si las muestras deben ser transportadas, habrá que embalarlas según los reglamentos existentes para el transporte
de agentes etiológicos.
Se extraerá cuanto antes el suero o el plasma del coágulo o de los glóbulos rojos para evitar cualquier hemólisis.
NO SE UTILIZARÁN SUEROS O PLASMAS CONTAMINADOS, HYPERLIPÉMICOS O HIPERHEMOLIZADOS.
Observación: no se ha observado interferencia alguna en las muestras que contenían 80 mg / l de bilirrubina,
36mg / l de inmunoglobulina M o G, así como en las muestras lipémicas que contenían hasta 5 g/l de lípidos y
en las muestras hemolizadas que contenían hasta 5 g/l de hemoglobina.
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