Info - Leica Biosystems

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PA0171 Rev A
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Les échantillons, avant et après fixation, et tous les matériels ayant été en contact avec eux, doivent être manipulés comme s’ils
étaient à risque infectieux et éliminés avec les précautions adéquates2 . Ne jamais pipeter les réactifs à la bouche et éviter le
contact de la peau et des muqueuses avec les réactifs ou les échantillons. Si des réactifs ou des échantillons entrent en contact
avec des zones sensibles, rincer abondamment à l’eau. Consultez un médecin.
Renseignez-vous sur les réglementations fédérales, nationales et locales concernant l’élimination des composés potentiellement
toxiques.
Éviter une contamination microbienne des réactifs, qui peut favoriser un marquage non spécifique.
Des durées ou des températures de démasquage ou d’incubation autres que celles spécifiées peuvent entraîner des résultats
erronés. Tout changement doit être validé par l’utilisateur.
Mode d’Emploi
L’anticorps primaire CD21 (2G9) a été conçu pour être utilisé sur l’automate Bond conjointement avec Bond Polymer Refine Detection.
Le protocole de marquage recommandé pour l’anticorps primaire CD21 (2G9) est IHC Protocol F. Un démasquage d’épitope par la
chaleur est recommandé avec Bond Epitope Retrieval Solution 2 durant 20 minutes.
Résultats Attendus
Tissus Sains
Le clone 2G9 a marqué la protéine CD21 dans les cellules dendritiques folliculaires (FDC) du tissu lymphoïde et des cellules B matures.
Il a fortement marqué les FDC des amygdales (29 cas sur 29), en produisant un réseau maillé dense de FDC marquées dans la zone
claire et un profil de marquage plus faible et désorganisé dans la zone sombre. Le marquage des cellules B dans la zone du manteau
était à peine visible et beaucoup moins constant. Le marquage du réseau de FDC a également été observé dans la rate (5 cas sur 5).
Un marquage des FDC était également manifeste dans les cas suivants : thyroïde (2/4), col de l’utérus (2/2), estomac (3/4) et côlon
(3/4). Quelques rares cellules mononucléées étaient marquées dans d’autres tissus sains testés. Un marquage de faible intensité a
parfois été relevé dans les cellules de Leydig des testicules ; aucun marquage supplémentaire n’a été observé dans les cas suivants :
utérus, placenta, prostate, ovaires, pancréas, poumons, foie, peau, seins, coeur, intestin grêle, cerveau, hypophyse et surrénales
(n = 200).
Tissus Tumoraux
Avec le clone 2G9, dans le lymphome folliculaire (n = 3), les follicules involués ont présenté des réseaux de FDC bien définis et
fortement marqués. Un marquage plus diffus et moins intense des FDC a été observé dans les follicules anormaux de plus grande
taille. Aucune expression de CD21 n’a été relevée dans les cellules néoplasiques des lymphomes à cellules T (n = 6), à l’exception de
quelques follicules résiduels montrant un marquage important des FDC. Aucun marquage de cellules néoplasiques n’a été observé dans
les cas suivants : lymphome à cellules B non hodgkinien (n = 14), lymphosarcome lymphoblastique (n = 2), maladie de Hodgkin (n = 4)
et un éventail d’autres tumeurs (n = 26).
CD21 (2G9) est recommandé pour la détection immunologique de l’expression cellulaire normale et anormale de CD21 dans les cellules
dendritiques folliculaires.
Limites Spécifiques du Produit
CD21 (2G9) a été optimisé chez Leica Biosystems pour une utilisation avec Bond Polymer Refine Detection et les réactifs auxiliaires
Bond. Les utilisateurs qui ne respectent pas les procédures de test recommandées prennent la responsabilité de l’interprétation des
résultats des patients dans ces conditions. Les durées du protocole peuvent varier, en raison des variations de fixation des tissus et de
l’efficacité de la facilitation de l’antigène, et doivent être déterminées empiriquement. Des contrôles réactif négatifs devraient être testés
lors de l’optimisation des conditions de démasquage et des durées du protocole.
Identification des Problèmes
Voir la référence 3 pour connaître les mesures correctives.
Prenez contact avec votre distributeur local ou avec le bureau régional de Leica Biosystems pour signaler tout marquage inattendu.
Informations Complémentaires
Des informations complémentaires sur l’immunomarquage avec les réactifs Bond, les principes de la méthode, le matériel nécessaire, la
préparation des échantillons, le contrôle de la qualité, les vérifications du test, l’interprétation du marquage, les légendes et symboles sur
les étiquettes et les limites générales, peuvent être obtenues dans “Utilisation des réactifs Bondw” dans votre manuel d’utilisation Bond.
Bibliographie
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ProClin 950 est une marque commerciale de Supelco, membre du groupe Sigma-Aldrich Corporation.
Date de Publication
17 avril 2008