Info - Leica Biosystems
Info - Leica Biosystems
Info - Leica Biosystems
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
•<br />
•<br />
•<br />
•<br />
PA0171 Rev A<br />
Page 17<br />
Ο χειρισμός των δειγμάτων, πριν και μετά τη μονιμοποίηση και όλων των υλικών που εκτίθενται σε αυτά, θα πρέπει να γίνεται<br />
σαν να ήταν ικανά να μεταδώσουν μόλυνση και θα πρέπει να απορρίπτονται λαμβάνοντας κατάλληλες προφυλάξεις2 . Μην κάνετε<br />
ποτέ αναρρόφηση αντιδραστηρίων με πιπέτα με το στόμα και αποφύγετε να έρθει σε επαφή το δέρμα και οι βλεννογόνοι με τα<br />
αντιδραστήρια ή τα δείγματα. Αν αντιδραστήρια ή δείγματα έρθουν σε επαφή με ευαίσθητες περιοχές, πλύνετε με άφθονο νερό.<br />
Ζητήστε ιατρική συμβουλή.<br />
Συμβουλευτείτε τους ομοσπονδιακούς, πολιτειακούς ή τοπικούς κανονισμούς για απόρριψη τυχόν δυνητικώς τοξικών συστατικών.<br />
Ελαχιστοποιήστε τη μικροβιακή μόλυνση των αντιδραστηρίων, διαφορετικά μπορεί να υπάρξει αύξηση σε μη ειδική χρώση.<br />
Ανάκτηση, χρόνοι επώασης ή θερμοκρασίες διαφορετικές από τις καθορισμένες, μπορεί να οδηγήσουν σε εσφαλμένα<br />
αποτελέσματα. Οποιαδήποτε τέτοια αλλαγή πρέπει να επικυρώνεται από τον χρήστη.<br />
Οδηγίες Χρήσης<br />
Το πρωτογενές αντίσωμα CD21 (2G9) αναπτύχθηκε για χρήση στο αυτοματοποιημένο σύστημα Bond σε συνδυασμό με το Bond<br />
Polymer Refine Detection. Το συνιστώμενο πρωτόκολλο χρώσης για το πρωτογενές αντίσωμα CD21 (2G9) είναι το IHC Protocol F.<br />
Συνιστάται ανάκτηση επιτόπου επαγόμενη με θερμότητα χρησιμοποιώντας το Bond Epitope Retrieval Solution 2 για 20 λεπτά.<br />
Αναμενόμενα Αποτελέσματα<br />
Φυσιολογικοί Ιστοί<br />
Ο κλώνος 2G9 έχρωσε την πρωτεΐνη CD21 σε θυλακιώδη δενδριτικά κύτταρα (FDCs) του λεμφοειδούς ιστού και ώριμα B-κύτταρα.<br />
Ισχυρή σήμανση των FDC παρατηρήθηκε σε 29/29 περιπτώσεις της αμυγδαλής, με πυκνά διαπλεγμένο δίκτυο FDC στην ανοιχτόχρωμη<br />
ζώνη και με πιο ασαφή διάταξη, ασθενέστερη μορφή χρώσης στη σκοτεινόχρωμη ζώνη. Η χρώση της ζώνης του μανδύα B-κυττάρων<br />
ήταν ασθενής και πολύ λιγότερο συνεπής. Παρατηρήθηκε επίσης χρώση του δικτύου FDC σε 5/5 περιπτώσεις της σπλήνας. Εμφανής<br />
ήταν επίσης και η χρώση του FDC σε 2/4 περιπτώσεις του θυρεοειδή αδένα, 2/2 περιπτώσεις του τραχήλου, 3/4 περιπτώσεις του<br />
στομάχου και 3/4 περιπτώσεις του παχέος εντέρου. Το σποραδικό μονοπυρηνικό κύτταρο σημάνθηκε σε άλλους φυσιολογικούς ιστούς<br />
που εξετάστηκαν. Υπήρξε κάποια ασθενής χρώση κυττάρων Leydig στους όρχεις, αλλά δεν παρατηρήθηκε καμία πρόσθετη χρώση σε<br />
περιπτώσεις της μήτρας, του παλκούντα, του προστάτη, των ωοθηκών, του παγκρέατος, των πνευμόνων, του συκωτιού, του δέρματος,<br />
του μαστού, της καρδιάς, του λεπτού εντέρου, του εγκεφάλου, της υπόφυσης και των επινεφριδίων (n=200).<br />
Νεοπλασματικοί Ιστοί<br />
Με τον κλώνο 2G9, σε θυλακιώδες λέμφωμα (n = 3) οι άτρητοι θύλακες έδειξαν ισχυρό, σαφώς καθορισμένο δίκτυο FDC. Στους<br />
μεγάλους, μη φυσιολογικούς θύλακες, παρατηρήθηκε πιο διάχυτη και λιγότερο έντονη χρώση των FDC. Δεν παρατηρήθηκε καμία<br />
έκφραση του CD21 στα νεοπλαστικά κύτταρα του λεμφώματος T-κυττάρου (n = 6) εκτός από λίγους κατάλοιπους θύλακες που έδειξαν<br />
ισχυρή χρώση FDC. Δεν παρατηρήθηκε καμία χρώση σε νεοπλαστικά κύτταρα του λεμφώματος B-κυττάρου μη Hodgkin (n = 14),<br />
λεμφοβλαστικό λέμφωμα (n = 2), νόσο Hodgkin (n = 4) και μια ποικιλία πρόσθετων όγκων (n = 26).<br />
Το CD21 (2G9) συνιστάται για την ανοσοανίχνευση φυσιολογικής και μη φυσιολογικής κυτταρικής έκφρασης CD21 σε θυλακιώδη<br />
δενδριτικά κύτταρα.<br />
Ειδικοί Περιορισμοί Του Π+ροϊόντος<br />
Το CD21 (2G9) έχει βελτιστοποιηθεί στη <strong>Leica</strong> <strong>Biosystems</strong> για χρήση με το Bond Polymer Refine Detection και βοηθητικά αντιδραστήρια.<br />
Οι χρήστες που παρεκκλίνουν από τις συνιστώμενες διαδικασίες εξέτασης, πρέπει να αναλάβουν την ευθύνη για την ερμηνεία των<br />
αποτελεσμάτων των ασθενών υπό αυτές τις συνθήκες. Οι χρόνοι του πρωτοκόλλου μπορεί να διαφέρουν λόγω της διαφοροποίησης<br />
στη μονιμοποίηση του ιστού και την αποτελεσματικότητα της ενίσχυσης του αντιγόνου και συνεπώς πρέπει να προσδιορίζονται<br />
εμπειρικά. Για τη βελτιστοποίηση των συνθηκών ανάκτησης και των χρόνων του πρωτοκόλλου θα πρέπει να χρησιμοποιούνται δείγματα<br />
αντιδραστηρίου αρνητικού ελέγχου.<br />
Αντιμετώπιση Προβλημάτων<br />
Ανατρέξτε στην παραπομπή 3 για τις διορθωτικές ενέργειες.<br />
Επικοινωνήστε με τον αντιπρόσωπο ή το περιφερειακό γραφείο της <strong>Leica</strong> <strong>Biosystems</strong> για να αναφέρετε ασυνήθιστη χρώση.<br />
Πρόσθετες Πληροφορίες<br />
Μπορείτε να βρείτε περισσότερες πληροφορίες σχετικά με την ανοσοχρώση με αντιδραστήρια Bond, υπό τους τίτλους “Αρχή της<br />
διαδικασίας”, “Απαιτούμενα υλικά”, “Προετοιμασία δείγματος”, “Ποιοτικός έλεγχος”, “Επαλήθευση προσδιορισμού”, “Ερμηνεία της<br />
χρώσης”, “Υπόμνημα για τα σύμβολα στις ετικέτες” και “Γενικοί περιορισμοί” στην ενότητα “Χρήση αντιδραστηρίων Bond” στο υλικό<br />
τεκμηρίωσης χρήσης της Bond.<br />
Bιβλιογραφία<br />
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.<br />
2.<br />
3.<br />
4.<br />
5.<br />
6.<br />
Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious<br />
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.<br />
Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.<br />
Kojima M, Nakamura S, Shimizu K, et al. Classical Hodgkin lymphoma occurring in clusters of nodal marginal zone<br />
B-lymphocytes in association with progressive transformation of germinal center. Pathology Research and Practice. 2003;<br />
199:547–550.<br />
Kojima M, Nakamura S, Motoori T, et al. Primary marginal zone B-cell lymphoma of the lymph node resembling plasmacytoma<br />
arising from a plasma cell variant of Castleman’s disease. A clinicopathological and immunohistochemical study of seven patients.<br />
Acta Pathologica, Microbiologica et Immunologica Scandinavica (APMIS). 2002; 110:875–880.<br />
Dupin N, Fisher C, Kellam P et al. Distribution of human herpesvirus-8 latently infected cells in Kaposi’s sarcoma, multicentric<br />
Castleman’s disease, and primary effusion lymphoma. Proceedings of the National Academy of Sciences USA. 1999;<br />
96(8):4546–4551.<br />
Το ProClin 950 είναι εμπορικό σήμα της Supelco, τμήμα της Sigma-Aldrich Corporation.<br />
Ημερομηνία Έκδοσης<br />
17 Απρίλιος 2008