Info - Leica Biosystems

•
•
•
•
PA0171 Rev A
Page 17
Ο χειρισμός των δειγμάτων, πριν και μετά τη μονιμοποίηση και όλων των υλικών που εκτίθενται σε αυτά, θα πρέπει να γίνεται
σαν να ήταν ικανά να μεταδώσουν μόλυνση και θα πρέπει να απορρίπτονται λαμβάνοντας κατάλληλες προφυλάξεις2 . Μην κάνετε
ποτέ αναρρόφηση αντιδραστηρίων με πιπέτα με το στόμα και αποφύγετε να έρθει σε επαφή το δέρμα και οι βλεννογόνοι με τα
αντιδραστήρια ή τα δείγματα. Αν αντιδραστήρια ή δείγματα έρθουν σε επαφή με ευαίσθητες περιοχές, πλύνετε με άφθονο νερό.
Ζητήστε ιατρική συμβουλή.
Συμβουλευτείτε τους ομοσπονδιακούς, πολιτειακούς ή τοπικούς κανονισμούς για απόρριψη τυχόν δυνητικώς τοξικών συστατικών.
Ελαχιστοποιήστε τη μικροβιακή μόλυνση των αντιδραστηρίων, διαφορετικά μπορεί να υπάρξει αύξηση σε μη ειδική χρώση.
Ανάκτηση, χρόνοι επώασης ή θερμοκρασίες διαφορετικές από τις καθορισμένες, μπορεί να οδηγήσουν σε εσφαλμένα
αποτελέσματα. Οποιαδήποτε τέτοια αλλαγή πρέπει να επικυρώνεται από τον χρήστη.
Οδηγίες Χρήσης
Το πρωτογενές αντίσωμα CD21 (2G9) αναπτύχθηκε για χρήση στο αυτοματοποιημένο σύστημα Bond σε συνδυασμό με το Bond
Polymer Refine Detection. Το συνιστώμενο πρωτόκολλο χρώσης για το πρωτογενές αντίσωμα CD21 (2G9) είναι το IHC Protocol F.
Συνιστάται ανάκτηση επιτόπου επαγόμενη με θερμότητα χρησιμοποιώντας το Bond Epitope Retrieval Solution 2 για 20 λεπτά.
Αναμενόμενα Αποτελέσματα
Φυσιολογικοί Ιστοί
Ο κλώνος 2G9 έχρωσε την πρωτεΐνη CD21 σε θυλακιώδη δενδριτικά κύτταρα (FDCs) του λεμφοειδούς ιστού και ώριμα B-κύτταρα.
Ισχυρή σήμανση των FDC παρατηρήθηκε σε 29/29 περιπτώσεις της αμυγδαλής, με πυκνά διαπλεγμένο δίκτυο FDC στην ανοιχτόχρωμη
ζώνη και με πιο ασαφή διάταξη, ασθενέστερη μορφή χρώσης στη σκοτεινόχρωμη ζώνη. Η χρώση της ζώνης του μανδύα B-κυττάρων
ήταν ασθενής και πολύ λιγότερο συνεπής. Παρατηρήθηκε επίσης χρώση του δικτύου FDC σε 5/5 περιπτώσεις της σπλήνας. Εμφανής
ήταν επίσης και η χρώση του FDC σε 2/4 περιπτώσεις του θυρεοειδή αδένα, 2/2 περιπτώσεις του τραχήλου, 3/4 περιπτώσεις του
στομάχου και 3/4 περιπτώσεις του παχέος εντέρου. Το σποραδικό μονοπυρηνικό κύτταρο σημάνθηκε σε άλλους φυσιολογικούς ιστούς
που εξετάστηκαν. Υπήρξε κάποια ασθενής χρώση κυττάρων Leydig στους όρχεις, αλλά δεν παρατηρήθηκε καμία πρόσθετη χρώση σε
περιπτώσεις της μήτρας, του παλκούντα, του προστάτη, των ωοθηκών, του παγκρέατος, των πνευμόνων, του συκωτιού, του δέρματος,
του μαστού, της καρδιάς, του λεπτού εντέρου, του εγκεφάλου, της υπόφυσης και των επινεφριδίων (n=200).
Νεοπλασματικοί Ιστοί
Με τον κλώνο 2G9, σε θυλακιώδες λέμφωμα (n = 3) οι άτρητοι θύλακες έδειξαν ισχυρό, σαφώς καθορισμένο δίκτυο FDC. Στους
μεγάλους, μη φυσιολογικούς θύλακες, παρατηρήθηκε πιο διάχυτη και λιγότερο έντονη χρώση των FDC. Δεν παρατηρήθηκε καμία
έκφραση του CD21 στα νεοπλαστικά κύτταρα του λεμφώματος T-κυττάρου (n = 6) εκτός από λίγους κατάλοιπους θύλακες που έδειξαν
ισχυρή χρώση FDC. Δεν παρατηρήθηκε καμία χρώση σε νεοπλαστικά κύτταρα του λεμφώματος B-κυττάρου μη Hodgkin (n = 14),
λεμφοβλαστικό λέμφωμα (n = 2), νόσο Hodgkin (n = 4) και μια ποικιλία πρόσθετων όγκων (n = 26).
Το CD21 (2G9) συνιστάται για την ανοσοανίχνευση φυσιολογικής και μη φυσιολογικής κυτταρικής έκφρασης CD21 σε θυλακιώδη
δενδριτικά κύτταρα.
Ειδικοί Περιορισμοί Του Π+ροϊόντος
Το CD21 (2G9) έχει βελτιστοποιηθεί στη Leica Biosystems για χρήση με το Bond Polymer Refine Detection και βοηθητικά αντιδραστήρια.
Οι χρήστες που παρεκκλίνουν από τις συνιστώμενες διαδικασίες εξέτασης, πρέπει να αναλάβουν την ευθύνη για την ερμηνεία των
αποτελεσμάτων των ασθενών υπό αυτές τις συνθήκες. Οι χρόνοι του πρωτοκόλλου μπορεί να διαφέρουν λόγω της διαφοροποίησης
στη μονιμοποίηση του ιστού και την αποτελεσματικότητα της ενίσχυσης του αντιγόνου και συνεπώς πρέπει να προσδιορίζονται
εμπειρικά. Για τη βελτιστοποίηση των συνθηκών ανάκτησης και των χρόνων του πρωτοκόλλου θα πρέπει να χρησιμοποιούνται δείγματα
αντιδραστηρίου αρνητικού ελέγχου.
Αντιμετώπιση Προβλημάτων
Ανατρέξτε στην παραπομπή 3 για τις διορθωτικές ενέργειες.
Επικοινωνήστε με τον αντιπρόσωπο ή το περιφερειακό γραφείο της Leica Biosystems για να αναφέρετε ασυνήθιστη χρώση.
Πρόσθετες Πληροφορίες
Μπορείτε να βρείτε περισσότερες πληροφορίες σχετικά με την ανοσοχρώση με αντιδραστήρια Bond, υπό τους τίτλους “Αρχή της
διαδικασίας”, “Απαιτούμενα υλικά”, “Προετοιμασία δείγματος”, “Ποιοτικός έλεγχος”, “Επαλήθευση προσδιορισμού”, “Ερμηνεία της
χρώσης”, “Υπόμνημα για τα σύμβολα στις ετικέτες” και “Γενικοί περιορισμοί” στην ενότητα “Χρήση αντιδραστηρίων Bond” στο υλικό
τεκμηρίωσης χρήσης της Bond.
Bιβλιογραφία
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2.
3.
4.
5.
6.
Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
Kojima M, Nakamura S, Shimizu K, et al. Classical Hodgkin lymphoma occurring in clusters of nodal marginal zone
B-lymphocytes in association with progressive transformation of germinal center. Pathology Research and Practice. 2003;
199:547–550.
Kojima M, Nakamura S, Motoori T, et al. Primary marginal zone B-cell lymphoma of the lymph node resembling plasmacytoma
arising from a plasma cell variant of Castleman’s disease. A clinicopathological and immunohistochemical study of seven patients.
Acta Pathologica, Microbiologica et Immunologica Scandinavica (APMIS). 2002; 110:875–880.
Dupin N, Fisher C, Kellam P et al. Distribution of human herpesvirus-8 latently infected cells in Kaposi’s sarcoma, multicentric
Castleman’s disease, and primary effusion lymphoma. Proceedings of the National Academy of Sciences USA. 1999;
96(8):4546–4551.
Το ProClin 950 είναι εμπορικό σήμα της Supelco, τμήμα της Sigma-Aldrich Corporation.
Ημερομηνία Έκδοσης
17 Απρίλιος 2008