Info - Leica Biosystems

•
•
•
PA0171 Rev A
Page 15
Angående avfallshantering av potentiellt toxiska material hänvisar vi till gällande europeiska, nationella och lokala bestämmelser
och förordningar.
Minimera mikrobiologisk kontamination av reagenser, annars kan en ökad icke-specifik infärgning bli resultatet.
Retrieval, inkubationstider eller temperaturer som avviker mot dem angivna kan ge felaktiga resultat. Varje sådan förändring
måste valideras av användaren.
Bruksanvisning
Den primära antikroppen CD21 (2G9) har utvecklats för användning på det automatiserade systemet Bond i kombination med
Bond Polymer Refine Detection. Det rekommenderade färgningsprotokollet för CD21 (2G9) primära antikroppar är IHC Protocol F.
Värmeinducerad epitopåtervinning rekommenderas med användande av Bond Epitope Retrieval Solution 2 i 20 minuter.
Förväntade Resultat
Normala Vävnader
Clone 2G9 färgade protein i follikulära dendritiska celler (FDCs) av lymfvävnad och mogna B-celler. Det märkte starkt FDCs i 29/29 fall
av tonsill, med ett tätt spunnet FDC-nät i den ljusa zonen och ett mer löst arrangerat, svagare färgningsmönster i den mörka zonen.
Färgningen av mantel-B-celler var klen och inte alls lika konsekvent. Färgningen av FDC-nätet noterades även i 5/5 fall av mjälte.
FDC-färgningen blev också tydlig i 2/4 fall av sköldkörtel, 2/2 fall av livmoderhals, 3/4 fall av mage och 3/4 fall av tarm. Den ibland
förekommande mononukleära cellen blev markerad i andra normala vävnader som testades. Viss svag färgning av Leydigceller i testikel;
ingen ytterligare färgning observerades i fall av livmoder, moderkaka, prostata, äggstock, pankreas, lunga, lever, hud, bröst, hjärta,
tunntarm, hjärna, hypofys och binjure (n = 200).
Tumörvävnader
Med klon 2G9 uppvisade de atretiska folliklarna, i follikulära lymfom (n = 3), kraftiga, väldefinierade FDC-nätformationer. I större
abnorma folliklar observerades en mer diffus och mindre intensiv färgning av FDCs. Inget uttryck av CD21 observerades i neoplastiska
celler av T-cellslymfom (n = 6) förutom några residuala folliklar som uppvisade kraftig FDC-färgning. Ingen färgning av neoplastiska
celler observerades i icke-Hodgkins B-cellslymfom (n = 14), lymfoblastiskt lymfom (n = 2), Hodgkins sjukdom (n = 4) eller ett antal
ytterligare tumörer (n = 26).
CD21 (2G9) rekommenderas för immunodetektering av normalt och abnormt cellulärt uttryck av CD21 i follikulära dendritiska celler.
Produktspecifika Begränsningar
CD21 (2G9) har optimerats vid Leica Biosystems för användning med Bond Polymer Refine Detection och Bond hjälpreagenser.
Användare som inte följer rekommenderade testprotokoll måste ta på sig ansvaret för att korrekt tolka patientresultat under dessa
förhållanden. Som följd av variationer i vävnadsfixering och effektivitet hos antigenförstärkningen kan protokollets tider variera och de
måste fastställas empiriskt. Negativa reagenskontroller bör användas när du optimerar återvinningsbetingelser och protokolltider.
Felsökning
Se referens 3 för förslag till åtgärder.
Kontakta en lokal distributör eller Leica Biosystems regionkontor för att rapportera onormal infärgning.
Mer Information
Mer information om immunfärgning med Bond-reagens finns under rubrikerna Bakgrund till metoden, Nödvändig materiel, Förbereda
provet, Kvalitetskontroll, Verifiering av assayer, Tolka infärgningsresultat, Symbolförklaring för etiketter och Allmänna begränsningar i
“Använda Bond-reagens” i Bonds användardokumentation.
Litteraturförteckning
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2.
3.
4.
5.
6.
Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
Kojima M, Nakamura S, Shimizu K, et al. Classical Hodgkin lymphoma occurring in clusters of nodal marginal zone
B-lymphocytes in association with progressive transformation of germinal center. Pathology Research and Practice. 2003;
199:547–550.
Kojima M, Nakamura S, Motoori T, et al. Primary marginal zone B-cell lymphoma of the lymph node resembling plasmacytoma
arising from a plasma cell variant of Castleman’s disease. A clinicopathological and immunohistochemical study of seven patients.
Acta Pathologica, Microbiologica et Immunologica Scandinavica (APMIS). 2002; 110:875–880.
Dupin N, Fisher C, Kellam P et al. Distribution of human herpesvirus-8 latently infected cells in Kaposi’s sarcoma, multicentric
Castleman’s disease, and primary effusion lymphoma. Proceedings of the National Academy of Sciences USA. 1999;
96(8):4546–4551.
ProClin 950 är ett varumärke tillhörande Supelco som ingår i Sigma-Aldrich Corporation.
Utgivningsdatum
17 april 2008