respuestas de segunda carpeta

PREGUNTA 8
A continuación de la obtención de las plantas transgénicas To y T1 se realizan sobre las
mismas varios ensayos de evaluación.
a) aclare en qué consisten los ensayos que apuntan a caracterizar:
i) el evento de transformación presente;
Respuesta: se denomina a un evento de transformación a cada una de las variantes de la
integración del transgen encontradas en plantas regeneradas de un mismo experimento
de transformación. Lo que se busca es caracterizar cada uno de esos eventos en el
número de copias del transgen integradas al genoma, el nivel de integridad del transgen
y los diferentes sitios de localización del transgen en el genoma (cromosoma, brazo,
etc). Para ello se utilizan técnicas de hibridación molecular como el Southern blot
ii) la estabilidad de la integración del transgen;
Respuesta: el estudio de estabilidad del transgén involucra el análisis de la presencia
del transgén en el ADN genómico desde la generación To hasta la T4.
iii) la estabilidad de la expresión del transgén.
Respuesta: el estudio de la estabilidad de la expresión del transgén involucra las etapas
de detección de ADN transgen en ADN genómico, utilizando por ejemplo técnicas de
hibridación molecular; la detección de ARNm del transgen utilizando por ejemplo la
técnica de Northern Blot, y la presencia de la proteína mediante técnicas de Western
Blot y/o actividad enzimática. Finalmente incluye el estudio del fenotipo final, por
ejemplo resistencia a herbicidas. Los estudios de expresión se realizan en varia
generaciones.
b) explique por qué es importante realizarlos durante varias generaciones.
Respuesta: es necesario verificar que la inserción es estable, y que en varias
generaciones el gen tiene un comportamiento de tipo mendeliano asi como que
mantenga su nivel de expresión, es decir no esté sometido a silenciamiento. Aún en el
caso que el transgen esté presente, el genoma puede sufrir cambios que alteren la
expresión del nuevo gen. Esto ocurre en algunos eventos mientras que en otros no se
observa.