respuestas de segunda carpeta

PREGUNTA 12
a) Describa una estrategia de trabajo que le permita identificar y caracterizar la
secuencia de un gen, del cual Ud. conoce la proteína, y dispone de una biblioteca de
ADNc y de una genómica.
Respuesta: Como primer paso puedo explorar la biblioteca de ADN copia, utilizando
como sonda anticuerpos generados a partir de la proteína. Como resultado identifico la
secuencia ADNc del gen, generada a partir del ARN mensajero (por lo tanto es una
secuencia incompleta del gen, sin la región reguladora ni intrones). Esta secuencia
puede ser usada como sonda para explorar la biblioteca genómica. De esta forma puedo
identificar la secuencia completa de mi gen de interés.
b) Una vez identificado el gen, se realizó un estudio comparativo de las secuencia del
gen entre varios individuos de la misma especie. ¿Qué resultados esperaría encontrar?
Respuesta: Al estudiar la secuencia del gen puedo encontrar variantes alélicas a nivel
de la secuencias. Esos cambios pueden acumularse tanto en la región reguladora como
la estructural y puede o no generar cambios en la proteína y el fenotipo final.
c) Mencione tres metodologías que le permitan caracterizar el patrón de expresión de
dicho gen en la planta (tejido, edad, etc).
Respuesta: Northen blot (informa sobre la acumulaciond de ARNm de ese gen),
Western blot (informa sobre la acumulación de las proteinas codificadas por ese gen),
hibridación in situ (utilizando sondas de ADN permite ver en cortes histológicos en que
tipos celulares hay acumulación de ARNm del gen complementario a la sonda)