Novocastratm Lyophilized Mouse Monoclonal Antibody Dysferlin
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Novocastra TM Anticorps <strong>Monoclonal</strong> Lyophilisé de Souris<br />
<strong>Dysferlin</strong><br />
Référence du Produit: NCL-Hamlet<br />
Utilisation Prévue<br />
Diagnostic in vitro.<br />
Le NCL-Hamlet est destiné à l’identification qualitative par microscopie optique de la molécules <strong>Dysferlin</strong> sur des coupes en paraffine<br />
et des coupes congelées. L’interprétation clinique de tout marquage, ou absence de marquage, doit être complétée par des études<br />
morphologiques utilisant des contrôles appropriés et doit être évaluée par un pathologiste qualifié à la lumière des antécédents cliniques<br />
du patient et d’autres analyses diagnostiques.<br />
Principe de la Procédure<br />
Les techniques de marquage immunohistochimique (IHC) permettent la visualisation des antigènes via l’application séquentielle<br />
d’un anticorps spécifique sur un antigène (anticorps primaire), d’un anticorps secondaire sur l’anticorps primaire et d’un complexe<br />
enzymatique comportant un substrat chromogène, avec des étapes de lavage intercalées. L’activation enzymatique du chromogène<br />
se traduit par la présence d’un produit de réaction visible au niveau du site de l’antigène. Le spécimen peut ensuite faire l’objet d’une<br />
coloration de contraste et être placé sous une lamelle. Les résultats sont interprétés à l’aide d’un microscope optique et participent au<br />
diagnostic différentiel des processus physiopathologiques, susceptibles, ou non, d’être associés à un antigène particulier.<br />
Clone<br />
Ham1/7B6<br />
Immunogène<br />
Peptide synthétique contenant les acides aminés 1999-2016 de la molécule de dysferline humaine.<br />
Spécificité<br />
Réactif avec la molécule de dysferline dans les muscles squelettiques humains. Egalement présent dans de nombreux tissus non<br />
musculaires.<br />
Composition du Réactif<br />
Le NCL-Hamlet est un surnageant de culture tissulaire lyophilisé contenant une solution d’azide de sodium 15 mM comme conservateur.<br />
L’utilisateur doit reconstituer le contenu du flacon avec un volume correct d’eau distillée stérile comme indiqué sur l’étiquette du flacon.<br />
Classe d’Ig<br />
IgG1<br />
Total Protein<br />
Concentration Totale en Protéines<br />
1,0–8,0 g/l. La concentration totale en protéines, spécifique du lot, figure sur l’étiquette du flacon.<br />
Concentration en Anticorps<br />
Supérieure ou égale à 324,9 mg/l, déterminée par la méthode ELISA. La concentration totale en Ig, spécifique du lot, figure sur<br />
l’étiquette du flacon.<br />
Recommandations d’utilisation<br />
Immunohistochimie (voir D. Méthodologie) sur des coupes congelées. Dilution préconisée : 1:20–1:40 pendant 60 minutes à 25 oC. Ceci n’est donné qu’à titre indicatif et les utilisateurs doivent déterminer leurs propres dilutions de travail optimales. Le NCL-Hamlet<br />
nécessite que les coupes soient fixées dans un mélange 1:1 d’acétone et de méthanol pendant 4 minutes à 25 oC avant incubation avec<br />
l’anticorps primaire.<br />
Immunohistochimie (voir D. Méthodologie) sur des coupes en paraffine. Dilution préconisée : 1:20–1:40 pendant 60 minutes à 25 oC. L’emploi d’une solution de citrate 0,01 M (pH 6,0) pour la restauration des antigènes à haute température est recommandé. Ceci n’est<br />
donné qu’à titre indicatif et les utilisateurs doivent déterminer leurs propres dilutions de travail optimales.<br />
Conservation et Stabilité<br />
Conserver l’anticorps non ouvert à 2–8 o C. Dans ces conditions il n’y a pas de perte de performance significative du produit jusqu’à la<br />
date de péremption qui figure sur l’étiquette du flacon. Ne pas utiliser après la date de péremption indiquée sur l’étiquette du récipient.<br />
L’anticorps reconstitué est stable pendant au moins deux mois s’il a été conservé à 2–8 o C. Pour une conservation à long terme,<br />
il est recommandé de congeler les aliquotes d’anticorps à -20 o C (l’utilisation de congélateurs à dégivrage automatique n’est pas<br />
conseillée). Ne pas congeler et décongeler de façon répétée. Préparer les dilutions de travail le jour même de leur utilisation. Remettre<br />
immédiatement à 2–8 o C après utilisation. Les conditions de conservation autres que celles qui sont spécifiées ci-dessus doivent faire<br />
l’objet d’une vérification par l’utilisateur.<br />
Préparation des Spécimens<br />
Le fixateur recommandé est le formol à 10%, tamponné, neutre, pour coupes tissulaires incluses en paraffine. Congeler les blocs<br />
tissulaires dans de l’isopentane refroidi dans de l’azote liquide (voir Mises en garde et précautions). Les spécimensne nécessitent pas<br />
d’autre fixation mais doivent être inclus dans le composé OCT (Sakura, réf. produit Tissue-Tek 4583).<br />
Mises en Garde et Précautions<br />
Ce réactif a été préparé à partir du surnageant d’une culture cellulaire. Du fait de sa nature de produit biologique, sa manipulation doit<br />
faire l’objet du plus grand soin.<br />
NCL-Hamlet<br />
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