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Info - Leica Biosystems

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Metodologia de imunohistoquímica para utilização de anticorpos<br />

Novocastra TM em tecidos envolvidos em parafina através da técnica de<br />

recuperação de epítopos por indução térmica.<br />

A. Reagentes necessários mas não fornecidos<br />

1. Solventes comuns utilizados em imunohistoquímica.<br />

2. Solução salina a 50 mM com tampão Tris (TBS) pH 7,6.<br />

3. Solução de recuperação de epítopos (ver a secção C Soluções de recuperação de epítopos).<br />

4. Diluente de anticorpos, NovocastraTM IHC Diluent RE7133.<br />

5. Sistema de visualização, NovolinkTM Polymer Detection Systems, RE7280-K (1250 tests), RE7150-K (500 tests), RE7140-K<br />

(250 tests) ou RE7290-K (50 tests).<br />

6. Meio de montagem – usar conforme recomendado pelo fabricante.<br />

B. Equipamento necessário mas não fornecido<br />

1. Incubador regulado para 25 oC. 2. Dispositivo de aquecimento para a recuperação de epítopos: banho-maria ou vaporizador, panela de pressão ou outro equipamento<br />

de laboratório com controlo da temperatura.<br />

3. Equipamento geral de laboratório de imunohistoquímica.<br />

C. Soluções de recuperação de epítopos (ver as Recomendações sobre a utilização de um dos seguintes produtos)<br />

RE7113 Epitope Retrieval Solution pH 6 (x10 Concentrate) 1 L<br />

RE7114 Epitope Retrieval Solution pH 6 (x10 Concentrate)<br />

500 mL<br />

RE7115 Epitope Retrieval Solution pH 6 (Ready to Use) 1 L<br />

RE7116 Epitope Retrieval Solution pH 8 (x10 Concentrate) 1 L<br />

RE7118 Epitope Retrieval Solution pH 8 (Ready to Use) 1 L<br />

RE7119 Epitope Retrieval Solution pH 9 (x10 Concentrate) 1 L<br />

RE7122 Epitope Retrieval Solution pH 9 (Ready to Use) 1 L<br />

NCL-L-IgM<br />

Page 25<br />

Tampão à base de citrato contendo um surfactante<br />

Tampão à base de EDTA contendo um surfactante<br />

Tampão à base de Tris/EDTA contendo um tensioactivo<br />

D. Metodologia<br />

Antes de intentar esta metodologia, o utilizador deve ter recebido a devida formação em técnicas de imunohistoquímica.<br />

O cliente deve determinar quais as fórmulas de diluição ideais para os anticorpos. A não ser indicação em contrário, todas as etapas<br />

devem ser efectuadas à temperatura ambiente (25 oC). Recuperação de epítopos<br />

Aderir às instruções de utilização aplicáveis às Epitope Retrieval Solutions RE7113, RE7114, RE7115, RE7116, RE7118, RE7119 e<br />

RE7122.<br />

Visualização<br />

Aderir às instruções de utilização dos NovolinkTM Polymer Detection Systems, RE7280-K (1250 tests), RE7150-K (500 tests), RE7140-K<br />

(250 tests) ou RE7290-K (50 tests).<br />

E. Emendas da edição anterior<br />

Não é aplicável.<br />

F. Data de emissão<br />

23 de abril de 2008 (CEprotocol/HTAUT+Novolink).

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