Info - Leica Biosystems
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Metodologia immunoistochimica per l’uso di anticorpi Novocastra TM su<br />
tessuto incluso in paraffina, utilizzando la tecnica di smascheramento<br />
ad alta temperatura dell’epitopo.<br />
A. Reagenti necessari ma non forniti<br />
1. Solventi standard utilizzati in immunoistochimica.<br />
2. Tampone Tris salino (TBS) 50 mM a pH 7.6.<br />
3. Soluzione di smascheramento dell’epitopo (vedere sezione C Soluzioni per lo smascheramento dell’epitopo).<br />
4. Diluente per anticorpi, NovocastraTM IHC Diluent, RE7133.<br />
5. Sistema di visualizzazione, NovolinkTM Polymer Detection Systems, RE7280-K (1250 tests), RE7150-K (500 tests), RE7140-K<br />
(250 tests) o RE7290-K (50 tests).<br />
6. Mezzo di montaggio - usare secondo le raccomandazioni del produttore.<br />
B. Attrezzature necessarie ma non fornit<br />
1. Set incubatore a 25 oC. 2. Dispositivo di riscaldamento per lo smascheramento dell’epitopo: bagno termostatico o vaporizzatore, autoclave o altre attrezzature<br />
termostatiche da laboratorio.<br />
3. Attrezzatura di base del laboratorio di immunoistochimica.steamer vaporizer.<br />
C. Soluzioni per lo smascheramento dell’epitopo (vedere le Raccomandazioni per l’uso per uno dei seguenti prodotti)<br />
RE7113 Epitope Retrieval Solution pH 6 (x10 Concentrate) 1 L<br />
RE7114 Epitope Retrieval Solution pH 6 (x10 Concentrate)<br />
500 mL<br />
RE7115 Epitope Retrieval Solution pH 6 (Ready to Use) 1 L<br />
RE7116 Epitope Retrieval Solution pH 8 (x10 Concentrate) 1 L<br />
RE7118 Epitope Retrieval Solution pH 8 (Ready to Use) 1 L<br />
RE7119 Epitope Retrieval Solution pH 9 (x10 Concentrate) 1 L<br />
RE7122 Epitope Retrieval Solution pH 9 (Ready to Use) 1 L<br />
NCL-L-IgM<br />
Page 13<br />
Tampone citrato contenente surfattante<br />
Tampone EDTA contenente surfattante<br />
Tampone Tris/EDTA contenente surfattante<br />
D. Metodologia<br />
Prima di intraprendere questa metodologia, l’utente deve aver acquisito esperienza con le tecniche immunoistochimiche.<br />
Gli utenti devono determinare le diluizioni ottimali degli anticorpi. Se non indicato diversamente, tutte le fasi vanno condotte a<br />
temperatura ambiente (25 oC). Smascheramento dell’epitopo<br />
Si prega di seguire le istruzioni per l’uso in Epitope Retrieval Solutions, RE7113, RE7114, RE7115, RE7116, RE7118, RE7119, RE7122.<br />
Visualizzazione<br />
Si prega di seguire le istruzioni per l’uso in NovolinkTM Polymer Detection Systems, RE7280-K (1250 tests), RE7150-K (500 tests),<br />
RE7140-K (250 tests) o RE7290-K (50 tests).<br />
E. Modifiche alla pubblicazione precedente<br />
Non applicabile.<br />
F. Data di pubblicazione<br />
23 aprile 2008 (CEprotocol/HTAUT+Novolink).
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