Opuntia albicarpa Scheinvar cv. “Reyna” - Aggie Horticulture - Texas ...

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Para la inducción a la brotación y la proliferación de
brotes, los propágulos fueron cultivados en 30 ml de
medio de cultivo, el cual se sirvió en frascos de vidrio
(Gerber®), con capacidad de 175 ml y tapaderas tipo
Magenta B-cap (Sigma Chemical Co., St. Louis, Missouri,
USA) (Figura 14.1). Como medio de cultivo
para la brotación y proliferación (Figura 14.1b, c, d) se
usó la formulación de sales minerales de Murashige y
Skoog, MS (1962), la cual se ajustó a un pH de 5.7 y
se suplementó con 5% de sacarosa [Sigma Chemical
Co.], 0.6% de Bacto-agar [Difco laboratories, Detroit
Michigan, USA], 2.5 mg L -1 de BA (6-benzyl aminopurina)
[Sigma Chemical Co.], y 5.0 mg L -1 de 2ip (N 6 -
[Δ 2 -Isopentenyl] adenina) [Sigma Chemical Co.]. Los
brotes fueron enraizados usando el mismo medio de
cultivo pero libre de reguladores de crecimiento.
Todos los cultivos fueron crecidos en un cuarto
de incubación con una temperatura ajustada a 25 ±
2 ºC, fotoperiodo de 16 horas luz y una intensidad
lumínica de 100 μmol m -2 seg -1 (densidad de flujo de
fotones fotosintéticos).
TRANSPLANTE, INOCULACIÓN,
ACLIMATIZACIÓN, Y CONDICIONES
DE CULTIVO
Al finalizar la micropropagación se seleccionaron
plantas de tamaño similar, se sacaron de los frascos
de cultivo y con agua corriente se lavó su sistema
radical para eliminar los residuos de agar. Las plantas
lavadas se transfirieron individualmente en
macetas de plástico (7.5 x 8.8 x 6.3 cm), que habían
sido previamente llenadas con una mezcla esterilizada
de arena y suelo (1:1) la cual tenía un bajo contenido
de P (1.65 μg g -1 de P extractable). En ese
momento se separaron las macetas en 4 grupos, de
los cuales 3 se inocularon con HEMA y el restante se
dejó sin inocular (control). Las cepas de endomicorrizas
fueron seleccionadas en base a su conocida
efectividad e infectividad observada en otras especies
vegetales (Aguilera-Gómez et al., 1998;
Estrada-Luna, 1999; Estrada-Luna et al., 2000;
Estrada-Luna y Davies, 2001). La inoculación con
HEMA se realizó en todos los casos aplicando 100 g
del inóculo en forma de banda a una altura de 80%
de llena la maceta. Para la inoculación del primer
grupo de plantas se usó la cepa ZAC-19 que es un
consorcio compuesto de las especies Glomus albi-
Micorrizas arbusculares en ecosistemas áridos y semiáridos
Arbuscular mycorrhizae in arid and semi-arid ecosystems
dum (Walker y Rhodes), G. claroides (Schenk y
Smith) y G. diaphanum (Morton y Walker) (Chamizo
et al., 1998), la cual fue colectada en suelos donde
se practica agricultura de secano para la producción
de frijol y maíz en el estado de Zacatecas, México
(Contreras y Ferrera-Cerrato, 1989). La inoculación
del segundo grupo se realizó con la cepa denominada
“Desierto de Sonora” que es un consorcio
colectado en el desierto de Sonora, México compuesto
de Glomus aggregatum (Schenck y Smith)
Koske, G. deserticola Trappe, Bloss y Menge, G.
geosporum (Nicolson y Gerdemann) Walker, G.
microaggregatum Koske, Gemma y Olexia, Sclerocystis
coremioides Berkeley y Broome, S. sinuosum
Gerdemann y Bakshi, Gigaspora margarita Becker y
Hall, Scutellospora calospora (Nicolson y Gerdemann)
Walker y Sanders, y S. gregaria (Schenk y
Nicolson) Walker y Sanders) (Aguilera-Gómez,
1998). Esta cepa se colectó en una localidad situada
a 90 Km. al Oeste de la ciudad de Hermosillo,
Sonora, México, cuya vegetación corresponde a
matorral desértico xerófilo y micrófilo dominado por
Carnegiea gigantea y Prosopis juliflora (Aguilera-
Gómez, 1998). En el tercer grupo la inoculación se
realizó con una cepa pura de G. intraradices
(Schenk and Smith) proveniente del INVAM [(International
Culture Collection of Arbuscular and Vesicular-
Arbuscular Mycorrhizal Fungi), West Virginia, USA].
El inóculo consistió de una mezcla 1:1 de suelo y
arena, secciones de raíces colonizadas de cebolla y
pasto azul o rye grass (cultivos hospederos), aproximadamente
4000 esporas, e hifas extra radicales, lo
cual se obtuvo como resultado del cultivo en maceta
de los HEMA.
Después del transplante, las plantas fueron crecidas
por tres semanas en un cuarto de cultivo con
las mismas condiciones mantenidas durante la
micropropagación. La primera semana después del
transplante las plantas fueron cubiertas con bolsas
de plástico para su aclimatización. Al cabo de la
cuarta semana las macetas se transfirieron a un
invernadero con temperatura promedio durante el
día y la noche de 35/20 ºC, fotoperiodo de 16 horas
luz y una intensidad lumínica máxima de 1100 μmol
m -2 seg -1 (densidad de flujo de fotones fotosintéticos)
a nivel de planta. Las plantas fueron fertilizadas
una vez a la semana con 100 ml de la solución nutritiva
de Long Ashton (Hewitt, 1966) ajustada a un pH