• Prover, både före och efter fixering, samt all materiel som exponeras för dem, bör behandlas och avfallshanteras som potentiellt smittbärande material2 . Munpipettera aldrig reagens och undvik att hud eller slemhinnor kommer i kontakt med reagens eller prover. Om reagens eller prover skulle komma i kontakt med känsliga områden bör du tvätta dig med rikliga mängder vatten. Kontakta läkare. • Angående avfallshantering av potentiellt toxiska material hänvisar vi till gällande europeiska, nationella och lokala bestämmelser och förordningar. • Minimera mikrobiologisk kontamination av reagenser, annars kan en ökad icke-specifik infärgning bli resultatet. • Retrieval, inkubationstider eller temperaturer som avviker mot dem angivna kan ge felaktiga resultat. Varje sådan förändring måste valideras av användaren. Bruksanvisning Thyroid Transcription Factor-1 (SPT24) primär antikropp har utvecklats för användning på det automatiserade Bond-systemet i kombination med Bond Polymer Refine Detection. Rekommenderat färgningsprotokoll för Thyroid Transcription Factor-1 (SPT24) primär antikropp är IHC Protocol F. Värmeinducerat epitop-retrieval rekommenderas med användande av Bond Epitope Retrieval Solution 1 i 20 minuter. Förväntade resultat Normala vävnader Klon SPT24 detekterade tyroid transkriptionsfaktor-1-protein i cellkärnan hos follikelepitelceller i sköldkörteln (13/13) samt typ IIpneumocyter och Clara-celler i lunga (9/9). Viss reaktivitet sågs även i gliaceller i storhjärnan (3/3). Klon SPT24 färgade inte TTF-1 i en rad andra normala vävnader (n=140) såsom kolon (0/12), hjärna (0/8), placenta (0/4), njure (0/6), prostata (0/4), testikel (0/4), hjärta (0/4), mjälte (0/4), livmoderhals (0/5), lymfkörtel (0/2), tymus (0/13), tunga (0/1), endometrium (0/2), skelettmuskulatur (0/4), tonsill (0/4), spottkörtel (0/4), myometrium (0/1), navelsträng (0/1), urinledare (0/1), bronk (0/1), äggstock (0/4), äggledare (0/1), lever (0/4), bröst (0/4), matstrupe (0/4), magsäck (0/4), ryggmärg (0/1), öga (0/1), pankreas (0/4), ileum (0/4), blindtarm (0/1), rektum (0/1), binjure (0/4), mesotel (0/1), bisköldkörtel (0/1), perifer nerv (0/3), hypofys (0/3), benmärg (0/3), uterus (0/3) och hud (0/4). Tumörvävnader Klon SPT24 detekterade tyroid transkriptionsfaktor-1-protein i cellkärnan hos 26/32 adenokarcinom i lunga, 4/7 småcelliga karcinom i lunga, 2/3 bronkioalveolära karcinom i lunga, 6/6 papillära karcinom i sköldkörtel, 4/4 medullära karcinom i sköldkörtel, 3/3 follikulära karcinom i sköldkörtel, 1/1 follikulärt adenom i sköldkörtel, 1/1 Hashimotos tyreoidit, 19/56 tymom, 1/1 desmoplastisk småcellig rundcellstumör, 3/38 måttligt differentierade adenokarcinom i kolon, samt 1/1 karcinom i rektum. Klon SPT24 färgade inte skivepitelskarcinom i lunga (0/18), storcelliga karcinom i lunga (0/5), lågt differentierade adenokarcinom i kolon (0/4), högt differentierade adenokarcinom i kolon (0/3), oklassificerade adenokarcinom i kolon (0/3), mesoteliom (0/5), karcinoid i tunntarmen (0/4), atypisk karcinoid i tymus (1/5), metastaserande tumör i tymus (0/1), brösttumör (0/6), levertumör (0/8), renalcellskarcinom i njure (0/5), övergångsepitelkarcinom i njure (0/1), tekom i äggstock (0/1), granulosacelltumör i äggstock (0/1), juvenil granulosacelltumör i äggstock (0/1), seröst karcinom i äggstock (0/3), mucinöst karcinom i äggstock (0/2), germinalcellstumör i äggstock (0/1), klarcellskarcinom i äggstock (0/1), adenokarcinom i magsäck (0/4), adenokarcinom i pankreas (0/2), papillära mucinösa karcinom i pankreas (0/1), öcellstumör i pankreas (0/1), glukagonom i pankreas (0/1), seminom i testikel (0/3), blandad germinalcellstumör i testis (0/1), embryonalt karcinom i testis (0/1), astrocytom i hjärna (0/1), plexus koroidea-papillom i hjärna (0/1), melanom (0/3), basalcellkarcinom i hud (0/1), skivepitelkarcinom i hud (0/2), skivepitelkarcinom i penis (0/2), skivepitelkarcinom i matstrupe (0/2), skivepitelkarcinom i struphuvud (0/1), skivepitelkarcinom i tunga (0/2), skivepitelkarcinom i livmoderhals (0/1), karcinom i tunntarm (0/1), gastrointestinal stromatumör (GIST) (0/1), synovialsarkom (0/1), leiomyosarkom (0/1), Ewings sarkom (0/1), spolcellsrhabdomyosarkom (0/1), fibrös tumör i bukhinnenätet (0/1), övergångsepitelkarcinom i urinblåsa (0/2), småcelligt karcinom i urinblåsa (0/1), storcelligt B-cellslymfom (0/1), onkocytom i binjure (0/2), adenom i binjure (0/1), ganglioneurom (0/1), adenokarcinom i prostata (0/1), godartad prostatahyperplasi (0/1), stromasarkom i livmoderslemhinna (0/1), adenokarcinom i livmoderslemhinna (0/1), klarcellskarcinom i livmoderslemhinna (0/1), feokromocytom (0/1), paragangliom (0/1) samt tumör på livmoderhalsen (0/2). Thyroid Transcription Factor-1 (klon SPT24) rekommenderas för påvisande av TTF-1 i normala och neoplastiska vävnader samt som en av en uppsättning antikroppar för diagnostik. Produktspecifika begränsningar Thyroid Transcription Factor-1 (SPT24) har optimerats vid <strong>Leica</strong> <strong>Biosystems</strong> för användning med Bond Polymer Refine Detection och Bond hjälpreagenser. Användare som inte följer rekommenderade testprotokoll måste ta på sig ansvaret för att korrekt tolka patientresultat under dessa förhållanden. Som följd av variationer i vävnadsfixering och effektivitet hos antigenförstärkningen kan protokollets tider variera och de måste fastställas empiriskt. Negativa reagenskontroller bör användas när du optimerar återvinningsbetingelser och protokolltider. Felsökning Se referens 3 för förslag till åtgärder. Kontakta en lokal distributör eller <strong>Leica</strong> <strong>Biosystems</strong> regionkontor för att rapportera onormal infärgning. Mer information Mer information om immunfärgning med Bond-reagens finns under rubrikerna Bakgrund till metoden, Nödvändig materiel, Förbereda provet, Kvalitetskontroll, Verifiering av assayer, Tolka infärgningsresultat, Symbolförklaring för etiketter och Allmänna begränsningar i “Använda Bond-reagens” i Bonds användardokumentation. PA0364 Page 21
Bibliografi 1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992. 2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P. 3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996. 4. Berghmans T, Mascaux C, Martin B et al. Prognostic role of thyroid transcription factor-1 in stage III non-small cell lung cancer. Lung Cancer. 2006; 52(2): 219-224. 5. Penman D, Downie I, Roberts F. Positive immunostaining for thyroid transcription factor-1 in primary and metastatic colonic adenocarcinoma: a note of caution. Journal of Clinical Pathology. 2006; 59:663-664. 6. Comperat E, Zhang F, Perrotin C et al. Variable sensitivity and specificity of TTF-1 antibodies in lung metastatic adenocarcinoma of colorectal origin. Modern Pathology. 2005; 18(10):1371-1376. 7. Pan C-C, Chen PC-H, Tsay S-H et al. Cytoplasmic immunoreactivity for thyroid transcription factor-1 in hepatocellular carcinoma: a comparative immunohistochemical analysis of four commercial antibodies using a tissue array technique. American Journal of Clinical Pathology. 2004; 121(3):343-349. ProClin 950 är ett varumärke tillhörande Supelco som ingår i Sigma-Aldrich Corporation. Utgivningsdatum 22 april 2013 PA0364 Page 22