Manual sobre Técnicas Moleculares - Centro Jardín Botánico de ...
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Configuración del enzima: Dimérico Número de isozimas: 3 Tampón de electroforesis recomendado: 1 Aldolasa (ALD) Cantidad Tris -HCl 0.1 M Ph 8 50 ml Fructosa 1,6 difosfato (Trisodium salt) 100 mg Arsenato sódico 1.0M 0.5 ml Gliceraldehido-3-fosfato deshidrogenasa 100 U NAD* (10 mg/ml) 1 ml MTT* (20 mg/ml) 1 ml PMS* (4 mg/ml) 0.5 ml Indicaciones específicas: Mezclar los ingredientes e incubar en oscuridad a temperatura ambiente hasta la aparición de bandas azules. Después, eliminar el tampón de tinción, lavar y fijar. Configuración del enzima: Tetramérico Número de isozimas: 1 Tampón de electroforesis recomendado: 2 Diaforasa (DIA) Cantidad Tris -HCl 0.1 M Ph 8 50 ml 2,6 diclorofenol-indofenol 5 mg NADH* 20 mg MTT* (20 mg/ml) 1 ml Indicaciones específicas: Puede resultar equivalente al sistema MNR. Mezclar los ingredientes e incubar en oscuridad a temperatura ambiente hasta la aparición de bandas azules. Después, eliminar el tampón de tinción, lavar y fijar. Configuración del enzima: Monomérico, Dimérico, Tetramérico (depende del locus). Número de isozimas: 2-6 Tampón de electroforesis recomendado: 1, 2 L-Glutamato deshidrogenasa (GDH) Cantidad Tris -HCl 0.1 M Ph 8 50 ml L-ácido glutámico (Neutralizado a Ph 8.0 con NaOH en pastillas) 10 ml NAD* (10 mg/ml) 1 ml MTT* (20 mg/ml) 0.5 ml PMS* (4 mg/ml) 0.5 ml 74
Indicaciones específicas: Mezclar los ingredientes e incubar en oscuridad a temperatura ambiente hasta la aparición de bandas azules. Después, eliminar el tampón de tinción, lavar y fijar. Configuración del enzima: Hexamérico Número de isozimas: 1 Tampón de electroforesis recomendado: 2 Isocitrato deshidrogenasa (IDH) Cantidad Tris -HCl 0.1 M Ph 8 50 ml Ácido isocítrico (Trisodium salt) 50 mg MgCl2 1M 2.5 ml NADP* (10 mg/ml) 0.5 ml MTT* (20 mg/ml) 0.5 ml PMS* (4 mg/ml) 0.5 ml Indicaciones específicas: Mezclar los ingredientes e incubar en oscuridad a temperatura ambiente hasta la aparición de bandas azules. Después, eliminar el tampón de tinción, lavar y fijar. Configuración del enzima: Dimérico Número de isozimas: 1 Tampón de electroforesis recomendado: 3 Enzima málica (EM) Cantidad Tris -HCl 0.1 M Ph 8 50 ml DL-Ácido málico 2.0M 5 ml (Neutralizado a Ph 8.0 con NaOH en pastillas) MgCl2 1M 1 ml NADP* (10 mg/ml) 1 ml MTT* (20 mg/ml) 1 ml PMS* (4 mg/ml) 0.5 ml Indicaciones específicas: Mezclar los ingredientes e incubar en oscuridad a temperatura ambiente hasta la aparición de bandas azules. Después, eliminar el tampón de tinción, lavar y fijar. Configuración del enzima: Tetramérico Número de isozimas: 1 Tampón de electroforesis recomendado: 2 α y βEsterasas (EST) Cantidad fosfato monosódico 0.1 M Ph 6 50 ml α-Naphtylacetato 20 mg β-Naphtylacetato 20 mg Fast Blue RR salt* 50 mg 75
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Indicaciones específicas: Mezclar los ingredientes e incubar en oscuridad a temperatura ambiente hasta la<br />
aparición <strong>de</strong> bandas azules. Después, eliminar el tampón <strong>de</strong> tinción, lavar y fijar.<br />
Configuración <strong>de</strong>l enzima: Hexamérico<br />
Número <strong>de</strong> isozimas: 1<br />
Tampón <strong>de</strong> electroforesis recomendado: 2<br />
Isocitrato <strong>de</strong>shidrogenasa (IDH) Cantidad<br />
Tris -HCl 0.1 M Ph 8 50 ml<br />
Ácido isocítrico (Trisodium salt) 50 mg<br />
MgCl2 1M 2.5 ml<br />
NADP* (10 mg/ml) 0.5 ml<br />
MTT* (20 mg/ml) 0.5 ml<br />
PMS* (4 mg/ml) 0.5 ml<br />
Indicaciones específicas: Mezclar los ingredientes e incubar en oscuridad a temperatura ambiente hasta la<br />
aparición <strong>de</strong> bandas azules. Después, eliminar el tampón <strong>de</strong> tinción, lavar y fijar.<br />
Configuración <strong>de</strong>l enzima: Dimérico<br />
Número <strong>de</strong> isozimas: 1<br />
Tampón <strong>de</strong> electroforesis recomendado: 3<br />
Enzima málica (EM) Cantidad<br />
Tris -HCl 0.1 M Ph 8 50 ml<br />
DL-Ácido málico 2.0M 5 ml<br />
(Neutralizado a Ph 8.0 con NaOH en pastillas)<br />
MgCl2 1M 1 ml<br />
NADP* (10 mg/ml) 1 ml<br />
MTT* (20 mg/ml) 1 ml<br />
PMS* (4 mg/ml) 0.5 ml<br />
Indicaciones específicas: Mezclar los ingredientes e incubar en oscuridad a temperatura ambiente hasta la<br />
aparición <strong>de</strong> bandas azules. Después, eliminar el tampón <strong>de</strong> tinción, lavar y fijar.<br />
Configuración <strong>de</strong>l enzima: Tetramérico<br />
Número <strong>de</strong> isozimas: 1<br />
Tampón <strong>de</strong> electroforesis recomendado: 2<br />
α y βEsterasas (EST) Cantidad<br />
fosfato monosódico 0.1 M Ph 6 50 ml<br />
α-Naphtylacetato 20 mg<br />
β-Naphtylacetato 20 mg<br />
Fast Blue RR salt* 50 mg<br />
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