Manual sobre Técnicas Moleculares - Centro Jardín Botánico de ...

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La cartografía de los sitios de restricción de determinados genomas o regiones genómicas se consigue mediante las dobles restricciones enzimáticas. Las restricciones sencillas indican el número de fragmentos distintos que produce cada enzima individualmente mientras que las dobles restricciones permiten localizar sobre el mapa de dicho genoma las posiciones relativas de los sitios de restricción de una enzima respecto a los de otra. El conjunto de las dobles combinaciones posibles de varias enzimas conduce a la obtención de mapa completo de sus sitios de restricción. 54
Los fragmentos de restricción son alelos codominantes, ya que la ausencia de un sitio de restricción en un determinado genoma con respecto a la presencia de ese sitio en otro causa la aparición de un fragmento mayor en el primer caso, equivalente a la suma en tamaño de los dos fragmentos que se obtienen como consecuencia de esa restricción en el segundo. En un individuo que poseyeran ambas dotaciones genómicas (heterocigoto) se observaría un patrón mixto de ambos tipos de fragmentos. La desaparición de un sitio de restricción suele ser un evento más común que la aparición de un nuevo sitio, ya que para que se de el primer caso sólo se requiere una mutación de cualquiera de los nucleótidos que forman el sitio de restricción de esa enzima, mientras que para que tuviera lugar el segundo serían necesarias, en general, varias mutaciones coincidentes, hecho bastante más improbable. Los polimorfismos de longitud de los fragmentos de restricción constituyen por tanto alelos codominantes que pueden ser empleados en la caracterización taxonómica de plantas, en la detección de especies híbridas, y en estudios genético poblacionales. Han sido también utilizados en programas de mejora genética de plantas cultivadas, para favorecer la selección de cultivares en la progenie, para la detección de resistencias a agentes patógenos, y para el mapado de caracteres cuantitativos. Los RFLP han servido también como fuente de caracteres para los estudios filogenéticos. En los estudios basados en parsimonia se codifican como caracteres binarios las presencias o ausencias de los sitios de restricción, en los basados en distancias genéticas se utilizaron algoritmos que estimaban la probabilidad de que se dieran mutaciones en alguno de los nucleótidos de los sitios de restricción; éstos últimos análisis no tienen vigencia 55
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