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Manual sobre Técnicas Moleculares - Centro Jardín Botánico de ...

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Al exponerse todo el gel al tampón <strong>de</strong> tincción, durante un tiempo breve (máximo 1 h), la<br />

precipitación tendrá lugar en aquellos lugares a los que hayan emigrado las formas alélicas<br />

<strong>de</strong> esa particular enzima, dando un patrón <strong>de</strong> bandas particular. Al patrón <strong>de</strong> bandas<br />

resultante <strong>de</strong>l revelado <strong>de</strong> cada isozima se le <strong>de</strong>nomina zimograma.<br />

Interpretación <strong>de</strong> zimogramas<br />

La interpretación <strong>de</strong> los patrones isozímicos requiere una observación <strong>de</strong>tallada <strong>de</strong>l<br />

zimograma, para saber el número <strong>de</strong> locus/loci expresados, y un conocimiento previo <strong>de</strong> la<br />

estructura cuaternaria <strong>de</strong> la enzima, para po<strong>de</strong>r codificar los genotipos individ uales. El<br />

número <strong>de</strong> locus/loci involucrados en el patrón <strong>de</strong> bandas observado pue<strong>de</strong> <strong>de</strong>ducirse, en<br />

general, a partir <strong>de</strong> las distancias que separan tales bandas. Si las bandas están muy<br />

próximas entre sí, correspon<strong>de</strong>n a diferentes formas alélicas <strong>de</strong>l mismo locus, si están más<br />

distanciadas, correspon<strong>de</strong>n a formas alélicas <strong>de</strong> distintos loci. Para cada uno <strong>de</strong> esos loci se<br />

<strong>de</strong>ben codificar sus genotipos in<strong>de</strong>pendientemente. La estructura cuaternaria <strong>de</strong> las enzimas<br />

pue<strong>de</strong> ser monomérica, cuando presenta una sóla ca<strong>de</strong>na proteínica, dimérica, cuando<br />

presenta dos, tetramérica, cuando presenta cuatro, y hexamérica, cuando presenta seis. En<br />

plantas son conocidas las estructuras cuaternarias que poseen las enzimas más comúnmente<br />

estudiadas (Wee<strong>de</strong>n & Wen<strong>de</strong>l, 1989).<br />

La estructura cuaternaria <strong>de</strong> la enzima va a <strong>de</strong>terminar el patrón <strong>de</strong> bandas isozímicas que<br />

presenten los individuos heterocigotos. Suponiendo que se trata <strong>de</strong> individuos diploi<strong>de</strong>s, las<br />

bandas obtenidas para las formas alélicas <strong>de</strong> un gen (p.e. A y B) mostrarán una distinta<br />

migración, y se resolverán como una única banda en los individuos homocigotos (banda 1 =<br />

AA) (banda 2 = BB), in<strong>de</strong>pendientemente <strong>de</strong> la estructura cuaternaria que tenga la enzima.<br />

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