Manual sobre Técnicas Moleculares - Centro Jardín Botánico de ...
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Al exponerse todo el gel al tampón <strong>de</strong> tincción, durante un tiempo breve (máximo 1 h), la<br />
precipitación tendrá lugar en aquellos lugares a los que hayan emigrado las formas alélicas<br />
<strong>de</strong> esa particular enzima, dando un patrón <strong>de</strong> bandas particular. Al patrón <strong>de</strong> bandas<br />
resultante <strong>de</strong>l revelado <strong>de</strong> cada isozima se le <strong>de</strong>nomina zimograma.<br />
Interpretación <strong>de</strong> zimogramas<br />
La interpretación <strong>de</strong> los patrones isozímicos requiere una observación <strong>de</strong>tallada <strong>de</strong>l<br />
zimograma, para saber el número <strong>de</strong> locus/loci expresados, y un conocimiento previo <strong>de</strong> la<br />
estructura cuaternaria <strong>de</strong> la enzima, para po<strong>de</strong>r codificar los genotipos individ uales. El<br />
número <strong>de</strong> locus/loci involucrados en el patrón <strong>de</strong> bandas observado pue<strong>de</strong> <strong>de</strong>ducirse, en<br />
general, a partir <strong>de</strong> las distancias que separan tales bandas. Si las bandas están muy<br />
próximas entre sí, correspon<strong>de</strong>n a diferentes formas alélicas <strong>de</strong>l mismo locus, si están más<br />
distanciadas, correspon<strong>de</strong>n a formas alélicas <strong>de</strong> distintos loci. Para cada uno <strong>de</strong> esos loci se<br />
<strong>de</strong>ben codificar sus genotipos in<strong>de</strong>pendientemente. La estructura cuaternaria <strong>de</strong> las enzimas<br />
pue<strong>de</strong> ser monomérica, cuando presenta una sóla ca<strong>de</strong>na proteínica, dimérica, cuando<br />
presenta dos, tetramérica, cuando presenta cuatro, y hexamérica, cuando presenta seis. En<br />
plantas son conocidas las estructuras cuaternarias que poseen las enzimas más comúnmente<br />
estudiadas (Wee<strong>de</strong>n & Wen<strong>de</strong>l, 1989).<br />
La estructura cuaternaria <strong>de</strong> la enzima va a <strong>de</strong>terminar el patrón <strong>de</strong> bandas isozímicas que<br />
presenten los individuos heterocigotos. Suponiendo que se trata <strong>de</strong> individuos diploi<strong>de</strong>s, las<br />
bandas obtenidas para las formas alélicas <strong>de</strong> un gen (p.e. A y B) mostrarán una distinta<br />
migración, y se resolverán como una única banda en los individuos homocigotos (banda 1 =<br />
AA) (banda 2 = BB), in<strong>de</strong>pendientemente <strong>de</strong> la estructura cuaternaria que tenga la enzima.<br />
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