Cryptococcal Antigen Latex Agglutination System (CALAS®)

3. Tenendo il flaconcino del Controllo positivo in posizione verticale, distribuire
una goccia di reagente nei due anelli di reazione corrispondenti.
4. Distribuire 25 µL di Controllo dell’anticorpo e di Controllo negativo negli anelli
di reazione corrispondenti.
5. Distribuire 25 µL di campione biologico nei due anelli di reazione corrispondenti
(vedi Figura).
6. Tenendo il flaconcino del Lattice di ricerca in posizione verticale, distribuire una
goccia di reagente negli anelli di reazione corrispondenti.
7. Alla stesso modo, tenendo il flaconcino del Lattice di controllo in posizione
verticale, distribuire una goccia di reagente negli anelli di reazione
corrispondenti.
8. Utilizzando un bastoncino di legno diverso per ciascun anello, mescolare i
reagenti.
9. Ruotare la lastrina manualmente o per mezzo di un agitatore orbitante (125 ± 25
rpm) per 5 minuti.
10. Leggere I risultati immediatamente e classificarli secondo una scala di intensità
di agglutinazione crescente da negativo a 4+. Come riferimento per interpretare I
risultati, si può utilizzare la scheda fotografica fornita con il kit.
11. La scala di intensità di agglutinazione si basa sui seguenti parametri:
Negativa (-) = la sospensione ha un aspetto omogeneo; non si notano aggregati
visibili.
Uno più (1+) = si nota una fine granulazione contro uno sfondo lattescente.
Due più (2+) = aggregati piccoli ma ben visibili contro uno sfondo leggermente
torbido
Tre più (3+) = aggregati di varie dimensioni contro uno sfondo quasi limpido
Quattro più (4+) = aggregati di grandi dimensioni contro uno sfondo
perfettamente limpido
Titolazione:
I campioni che mostrano una reazione di agglutinazione 2+ con il Lattice di ricerca o
con il Lattice di controllo devono essere titolati utilizzando entrambi questi reagenti.
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