campañas diva-artabria i (2002 y 2003) - Universidade de Santiago ...

3. Metodología
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montaje líquido miscible en hidrocarburos bencénicos como el xilol. Antes de
montar las preparaciones, primero se deshidrataron con un pase en etanol absoluto y
después se sumergieron en un baño de xilol. Finalmente se añadieron unas gotas de
la resina, se colocó el cubreobjetos y se dejaron secar al menos durante 24 horas.
3.5.4. CORTES SEMIFINOS
La técnica de cortes semifinos permite obtener cortes histológicos de 0,5 a 2
µm de grosor. Con las técnicas tradicionales de cortes semifinos se obtienen cortes
independientes, pero en este trabajo se utilizó un método que permite conseguir tiras
de cortes (BLUMER et al., 2002), requisito indispensable para poder estudiar y
reconstruir la anatomía interna de los solenogastros. Las muestras se incluyeron en
araldita, una resina epoxi sintética que polimeriza generando bloques duros de los
que se pueden obtener cortes más delgados que con la parafina tradicional y que
aunque tiene menor velocidad de infiltración que otras resinas, proporciona una
buena conservación de la estructura celular y de los cortes.
Aclarado. Para eliminar el etanol se utilizó el óxido de propileno
(CH 3CHCH 2O), un disolvente orgánico que además favorece la infiltración de la
resina. Las muestras se sumergieron en una solución 1:1 de etanol absoluto y óxido
de propileno durante 20 minutos y después se pasaron a una solución de óxido de
propileno durante 1 hora, renovándola al menos tres veces.
Inclusión y preparación de los bloques. Las muestras se pasaron a una
mezcla 1:1 de óxido de propileno y araldita en un recipiente cerrado durante 2 horas
a temperatura ambiente. Después se abrió ligeramente la tapa y se dejaron toda la
noche para que se completase la infiltración de la resina. Para la preparación de los
bloques se emplearon moldes de plástico de ultramicrotomía en los que se pueden
obtener hasta un total de 15 pequeños bloques con forma de un paralelepípedo
(Figura 8A). Los moldes se embebieron con resina nueva y se colocaron las muestras
cerca del extremo anterior. Seguidamente, se pasaron a una cámara de presión donde
se sometieron a cuatro ciclos de 200 bares repartidos en 1 hora. Después se
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