campañas diva-artabria i (2002 y 2003) - Universidade de Santiago ...

3. Metodología
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formol al 10%. Las muestras se sumergieron en un recipiente cerrado con un
volumen de solución descalcificante 20 veces superior al volumen de la muestra
durante 12 horas, renovándolo y agitándolo periódicamente.
3.5.2. DESHIDRATACIÓN
Tras la descalcificación se procedió a la deshidratación de las muestras en
baños de etanol de gradación creciente que eliminaron el EDTA y el agua de los
tejidos corporales. El proceso consistió en tres baños en etanol de 70º, seguidos de
tres baños en etanol de 90º y finalmente tres baños en etanol absoluto; cada baño
tuvo una duración de 20 minutos y siempre se utilizó un volumen de etanol 10 veces
superior al volumen de las muestras. En el último baño en etanol absoluto se
añadieron unas gotas de una solución saturada de eosina en etanol absoluto, así los
especímenes adquirieron un color rojizo que facilitó su orientación durante el
proceso de corte.
3.5.3. CORTES DE PARAFINA
Los cortes de parafina constituyen la forma usual de trabajo en un laboratorio
de histología y permite obtener series de cortes histológicos de hasta 5 µm de grosor.
Antes de proceder a la obtención de los cortes de parafina, el material de estudio se
sometió a un proceso de aclarado e inclusión para después proceder a la preparación
de los bloques, tal y como se detalla a continuación:
Aclarado. Las muestras, perfectamente deshidratadas, se impregnaron en xilol,
un disolvente de la parafina miscible con el etanol y la parafina; se pasaron las
muestras por dos baños de xilol de 10 a 15 minutos hasta que se tornaron
transparentes y después se secaron con un poco de papel de filtro.
Inclusión y confección de bloques. Para la inclusión de las muestras se
utilizó parafina, una sustancia con una densidad parecida a la de los tejidos y que a
temperatura ambiente es sólida y lo suficientemente consistente para confeccionar
bloques que pueden ser cortados con un microtomo. En una estufa, a no más de
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