Teoría Evolutiva - Docentes.unal.edu.co - Universidad Nacional de ...

Fue desarrollada en la década de los años sesenta. Cuando una molécula de DNA
en solución es sometida al calor, sus cadenas complementarias se separan a una
temperatura dada que es propia para cada especie; la causa de esto es que se pierden
las uniones de hidrógeno entre las dos cadenas.
La técnica consiste en producir este efecto en cada una de las moléculas a
comparar (por separado) y una vez obtenidas, romperlas en fragmentos de unos 500
nucleótidos, por acción de enzimas proteolíticas. El siguiente paso es colocar en una
misma solución fragmentos correspondientes de las especies que se van a comparar:
las cadenas ahora tienden a unirse formando nuevos enlaces de hidrógeno, para
producir una doble hélice híbrida (puesto que pertenece a dos especies distintas). La
unión entre las dos no es tan firme como la de las cadenas originales, debido a que no
todos los nucleótidos son complementarios (no todas las bases son iguales en las
dos especies). Una vez formada la cadena híbrida se vuelve a colocar al calor y se
observa a qué temperatura se separa. Esto sucede a una temperatura menor porque
hay un menor número de uniones. El descenso de 1ºC corresponde al 1% de bases no
complementarias, es decir que hay una diferencia de por lo menos un 1% entre el ADN
de una especie y el de la otra. Los resultados estiman las diferencias relativas entre
las dos moléculas.
- Electroforesis de Proteínas
Analiza el comportamiento de las proteínas sometidas a un campo eléctrico. Las
moléculas a analizar se colocan sobre un gel a través del cual se pasa una corriente
eléctrica. Las proteínas sometidas al campo, tienden a desplazarse sobre el gel a
distintas velocidades, dependiendo principalmente de su carga neta, la cual depende
del tipo de aminoácidos que la constituyen. Las proteínas al final de la prueba
ocupan distintas posiciones, si las moléculas poseen carga diferente. Cuando se
comparan proteínas de un tipo (por ejemplo la hemoglobina) provenientes de distintas
especies (e inclusive de distintos individuos de la misma especie) se puede estimar la
diferencia en su estructura química. Entre más emparentadas estén las especies
habrá mayor similitud. Este método calibra indirectamente la estructura del ADN, ya
que si las proteínas son diferentes, es porque los genes que las producen presentan
modificaciones. Sin embargo, la prueba tiende a subestimar las mutaciones, pues un
mismo aminoácido puede ser codificado por varios codones (es decir la sustitución
de una base por otra -mutación- puede no manifestarse), lo cual no se registraría en la
electroforesis. Incluso aminoácidos distintos pueden tener la misma carga eléctrica y
no serían detectados. Aún con estas limitaciones es un método rápido y bastante
exacto.
- Secuencias de aminoácidos
Se analiza directamente la estructura química de las cadenas polipeptídicas (la
secuencia de los aminoácidos que componen las proteínas). Este método es más
exacto que la electroforesis, pero al mismo tiempo más dispendioso y costoso.
- Estudios inmunológicos
Utilizando diversas técnicas inmunológicas se comparan las reacciones inmunes
entre especies diferentes, obteniéndose indirectamente una apreciación de la
estructura de las proteínas analizadas.
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