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PRODUCCIÓN DE PROTEASAS DIGESTIVAS TIPO TRIPSINA DEL
TALADRO DEL MAÍZ Sesamia nonagrioides (LEFÈBVRE) MEDIANTE
SISTEMAS DE EXPRESIÓN HETERÓLOGA
DÍAZ-MENDOZA, M. 1 ; EDWARDS, M. 2 ; ORTEGO, F. 1 ; GATEHOUSE, A.M.R. 2 ;
CASTAÑERA, P. 1 ; HERNÁNDEZ-CRESPO, P. 1
1 Dpto. Biología de Plantas, Laboratorio de Interacciones Planta-Insecto, Centro de
Investigaciones Biológicas, CSIC., Ramiro de Maeztu 9, 28040-Madrid, España,
mdiazmen@cib.csic.es.
2 Institute for Research on Environment & Sustainability, School of Biology, University of
Newcastle. Devonshire Building, Newcastle NE1 7RU, Newcastle, UK.
El conocimiento de la actividad, diversidad y expresión de proteasas digestivas
en el taladro del maíz, Sesamia nonagrioides (Lefèbvre) (Lepidoptera, Noctuidae)
tiene un gran interés en el control de esta plaga, debido a su papel en la activación /
degradación de la proteína insecticida Cry1Ab expresada en el maíz transgénico y a
su posible implicación en la aparición de resistencia. Por trabajos previos, sabemos
que en extractos digestivos de larvas de S. nonagrioides se encuentran al menos
cuatro tripsinas distintas, pertenecientes a tres tipos filogenéticamente conservados
en lepidópteros (tripsinas I, IIa, IIb y III). Estas tripsinas han sido purificadas,
caracterizadas bioquímicamente y se han obtenido las secuencias completas de
sus cDNAs codificantes. Actualmente estamos estudiando la interacción de cada
una de estas tripsinas con Cry1Ab, con el objetivo de determinar el papel que puede
tener su expresión diferencial en la posible adquisición de resistencia. Sin embargo,
los estudios moleculares indican que en S. nonagrioides la diversidad de tripsinas
es aún mayor, ya que se conocen hasta 9 cDNAs distintos (4 tripsinas I, 4 tripsinas
II y 1 trypsina III). Algunas de estas tripsinas no se han podido purificar, por ello se
presenta como estrategia alternativa un sistema de expresión heteróloga que nos
permita producir tripsinas de distinta secuencia y estudiar su especificidad.
Palabras clave: Proteasas, tripsinas, Sesamia nonagrioides, Cry 1Ab, expresión
heteróloga
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