03.06.2013 Views

สมศ.7หนั.. - มหาวิทยาลัยธรรมศาสตร์

สมศ.7หนั.. - มหาวิทยาลัยธรรมศาสตร์

สมศ.7หนั.. - มหาวิทยาลัยธรรมศาสตร์

SHOW MORE
SHOW LESS

Create successful ePaper yourself

Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.

ค ำน ำ<br />

การวินิจฉัยเชื้อราก่อโรคทางห้องปฏิบัติการนี้<br />

ผู้จัดท<br />

าได้เล็งเห็นถึงความส าคัญอย่างยิ่ง<br />

ของการบริการด้านสุขภาพ และการเรียนการสอน โดยมีวัตถุประสงค์เพื่อใช้เป็นแนวทางใน<br />

การปฏิบัติงาน เพื่อให้เกิดความมั่นใจต่อผู้ปฏิบัติงานทางด้านเชื้อรา<br />

และเพื่อประกอบการเรียน<br />

การสอนวิชา ทน 307 ปฏิบัติการไวรัสวิทยาและกิณวิทยาทางการแพทย์ของนักศึกษา<br />

คณะสหเวชศาสตร์ <strong>มหาวิทยาลัยธรรมศาสตร์</strong> และวิชาการฝึกปฏิบัติงานในห้องปฏิบัติการ<br />

จุลชีววิทยาคลินิก (ทน 476) โดยเนื้อหาประกอบด้วยรายละเอียดทั้งภาคทฤษฎีและภาคปฏิบัติ<br />

ผู้จัดท<br />

าขอขอบคุณ ผศ.ดร. เสกสรรค์ สโมสรสุข คุณมัตติกา ฟุ้งกระจาย<br />

คุณสมโภชน์ ประจันทร์<br />

และ เจ้าหน้าที่หน่วยจุลชีววิทยา<br />

โรงพยาบาลธรรมศาสตร์เฉลิมพระเกียรติ ที่มีส่วนร่วม<br />

ในการช่วยเหลือ ท าให้การจัดท าหนังสือเล่มนี้<br />

ส าเร็จลุล่วงไปด้วยดี ผู้จัดท<br />

าหวังเป็นอย่างยิ่งว่า<br />

หนังสือเล่มนี้<br />

จะเป็นประโยชน์ในการพัฒนาคุณภาพการปฏิบัติงานด้านเชื้อราและการเรียนการ<br />

สอนต่อไป<br />

ผู<br />

้ช่วยศาสตราจารย์ ดร. วรดา สโมสรสุข<br />

2555


สำรบัญ<br />

หน้า<br />

่ บทที 1 บทน าเกี่ยวกับเชื้อรา<br />

1<br />

การสร้างหน่วยสืบพันธุ์แบบไม่อาศัยเพศ<br />

ของเชื้อรา<br />

2<br />

การแยกพิสูจน์ชนิดของเชื้อราภายใต้กล้องจุลทรรศน์<br />

3<br />

การสังเกตการเจริญและลักษณะโคโลนีของเชื้อรา<br />

9<br />

การท าลายเชื้อ<br />

10<br />

เทคนิคเบื้องต้นในการปฏิบัติงานตรวจวินิจฉัยเชื้อรา<br />

10<br />

การเพาะเชื้อราจากโคโลนี<br />

11<br />

่ บทที 2 การตรวจพิสูจน์เชื้อราจากสิ่งส่งตรวจ<br />

12<br />

การเก็บรักษาและส่งสิ่งส่งตรวจ<br />

13<br />

การเตรียมตัวอย่างส่งตรวจ 13<br />

โรคติดเชื้อราบริเวณผิวหนังส่วนนอก<br />

14<br />

น้ายาและสีย้อมเพื่อตรวจหาเชื้อรา<br />

16<br />

บทที่<br />

3 การตรวจพิสูจน์เชื้อราประเภท<br />

mold จากโคโลนี 22<br />

บทที่<br />

4 การเพาะเลี้ยงเชื้อราบนแผ่นสไลด์<br />

24<br />

่ บทที 5 การแยกพิสูจน์เชื้อราประเภทยีสต์<br />

34<br />

การย้อม โคโลนีของ yeast (direct mount)<br />

การตรวจเชื้อ<br />

Candida spp.<br />

34<br />

ด้วยวิธี Chromogenic Candida agar 36<br />

การศึกษาการสร้าง Germ tube 36<br />

การสร้าง Chlamydoconidia 37<br />

การตรวจหา capsule 38<br />

การทดสอบ Nitrate assimilation 38


่<br />

สำรบัญ<br />

หน้า<br />

บทที 5 การแยกพิสูจน์เชื้อราประเภทยีสต์<br />

(ต่อ)<br />

การทดสอบ Carbon assimilation 39<br />

การทดสอบ Sugar fermentation 39<br />

การทดสอบ Urease test 39<br />

บทที่<br />

6 การตรวจพิสูจน์ราสองรูป 43<br />

บทที่<br />

7 น้ายาและอาหารส<br />

าหรับเชื้อรา<br />

49<br />

บรรณานุกรม 59<br />

หมวดรูปสี 66<br />

ดรรชนีภาษาอังกฤษ 67


่ รูปที<br />

สำรบัญรูปภำพ<br />

หน้ำ<br />

1.1 แสดง non-septate hyphae และ septate hyphae 1<br />

1.2 แสดง Arthrospore, Chlamydospore และ Blastospore<br />

1.3 แสดง Macroconidia และ Microconidia<br />

4<br />

ของ Microsporum gypseum<br />

1.4 แสดง phialoconidia<br />

5<br />

ของ Aspergillus, Penicillium และ Phialophora 5<br />

1.5 แสดง Mucor spp. และ Rhizopus spp.<br />

1.6 แสดง zoospore ภายใน sporangium<br />

6<br />

และ zoospore ของ Pythium insidiosum 6<br />

1.7 แสดง Curvularia spp. 7<br />

1.8 แสดง Acremonium spp. 7<br />

1.9 แสดง Aspergillus spp, Penicillium spp. และ Phialophora spp. 8<br />

1.10 แสดงลักษณะ hyphae ต่าง ๆ 8<br />

1.11 แสดงการเตรียมพื้นที่ก่อนการปฏิบัติงาน<br />

10<br />

2.1 การย้อมสี Wright จากสิ่งส่งตรวจ<br />

เพื่อตรวจดูลักษณะของ<br />

Histoplasma capsulatum และ Penicillium marneffei 18<br />

2.2 การย้อมเชื้อราด้วยวิธี<br />

Grocott-Gomeri methenamine silver stain 18<br />

5.1 ตัวอย่างเชื้อที่ย้อมจากโคโลนีด้วย<br />

LPCB 35<br />

5.2 แสดงลักษณะการสร้าง germ tube ของเชื้อ<br />

Candida albicans<br />

5.3 แสดงลักษณะการสร้าง chlamydospores<br />

37<br />

ของเชื้อ<br />

Candida albicans 37<br />

5.4 แสดงผลการย้อม capsule เชื้อ<br />

Cryptococcus neoformans<br />

ด้วย india ink จะเห็น capsule เป็นวงใสล้อมรอบเซลล์<br />

6.1 แสดงผลการย้อม capsule เชื้อ<br />

Cryptococcus neoformans<br />

38<br />

ด้วย india ink จะเห็น capsule เป็นวงใสล้อมรอบเซลล์ 44


สำรบัญรูปภำพ<br />

รูปที่<br />

หน้ำ<br />

่<br />

่<br />

่<br />

6.2 เชื้อ<br />

Histoplasma capsulatum ถูกบ่มเพาะที 25 องศาเซลเซียส 45<br />

6.3 เชื้อ<br />

Histoplasma capsulatum ถูกบ่มเพาะที 37 องศาเซลเซียส<br />

6.4 Wright stain จาก แผลที่ผิวหนังของผู้ป่วย<br />

46<br />

ติดเชื้อ<br />

Penicillium marneffei 47<br />

6.5 เชื้อ<br />

Penicillium marneffei ถูกบ่มเพาะที 25 องศาเซลเซียส 47


่<br />

่<br />

่<br />

รูปสีที<br />

สำรบัญหมวดรูปสี<br />

หน้ำ<br />

1.1 แสดง non-septate hyphae และ septate hyphae 60<br />

1.2 แสดง Arthrospore, Chlamydospore และ Blastospore<br />

1.3 แสดง Macroconidia และ Microconidia<br />

60<br />

ของ Microsporum gypseum<br />

1.4 แสดง phialoconidia ของ Aspergillus, Penicillium<br />

60<br />

และ Phialophora 61<br />

1.5 แสดง Mucor spp. และ Rhizopus spp. 61<br />

1.6 แสดง zoospore ภายใน sporangium และ zoospore<br />

ของ Pythium insidiosum 61<br />

1.7 แสดง Curvularia spp. 62<br />

1.8 แสดง Acremonium spp. 62<br />

1.9 แสดง Aspergillus spp, Penicillium spp. และ Phialophora spp.<br />

2.1การย้อมสี Wright จากสิ่งส่งตรวจ<br />

เพื่อตรวจดูลักษณะ<br />

62<br />

ของ Histoplasma capsulatum และPenicillium marneffei 63<br />

2.2 การย้อมเชื้อราด้วยวิธี<br />

Grocott-Gomeri methenamine silver stain 63<br />

5.2 แสดงลักษณะการสร้าง germ tube ของเชื้อ<br />

Candida albicans 64<br />

5.3 แสดงลักษณะการสร้าง chlamydospores ของเชื้อCandida<br />

albicans<br />

5.4 แสดงผลการย้อม capsule เชื้อ<br />

Cryptococcus neoformans<br />

64<br />

ด้วย india ink จะเห็น capsule เป็นวงใสล้อมรอบเซลล์<br />

6.1 แสดงผลการย้อม capsule เชื้อ<br />

Cryptococcus neoformans<br />

64<br />

ด้วย india ink จะเห็น capsule เป็นวงใสล้อมรอบเซลล์ 65<br />

6.2 เชื้อ<br />

Histoplasma capsulatum ถูกบ่มเพาะที 25 องศาเซลซียส<br />

6.4 Wright stain จาก แผลที่ผิวหนังของผู้ป่วย<br />

65<br />

ติดเชื้อ<br />

Penicillium marneffei 66<br />

6.5 เชื้อ<br />

Penicillium marneffei ถูกบ่มเพาะที 25 องศาเซลซียส 66


่<br />

สำรบัญตำรำง<br />

ตำรำงที<br />

หน้ำ<br />

2.1 ตัวอย่างลักษณะของเชื้อราที่ตรวจพบจากสิ่งส่งตรวจโดยตรง<br />

20-21<br />

4.1 ตัวอย่างเชื้อที่ย้อมจากโคโลนีด้วย<br />

LPCB 27-33<br />

5.1 การจ าแนกลักษณะยีสต์ที่ตรวจพบเบื้องต้น<br />

34<br />

5.2 แสดงปฏิกิริยาที่เกิดขึ้นบน<br />

chromogenic agar 36<br />

5.3 ความสามารถในการใช้น้าตาลและ<br />

ไนเตรท ในกลุ่ม<br />

Candida spp.<br />

5.4 ความสามารถในการใช้น้าตาลและ<br />

ไนเตรท<br />

40<br />

ในกลุ่ม<br />

yeast และ yeast-like organisms<br />

5.5 ความสามารถในการใช้น้าตาลและ<br />

ไนเตรท<br />

41<br />

ในกลุ่ม<br />

Cryptococcus spp. 42<br />

7.1 เชื้อที่เจริญหรือถูกยับยั้งได้บนอาหารที่มี<br />

cycloheximide 52

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!