Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) - FBMC
Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) - FBMC
Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) - FBMC
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
2) <strong>Reacción</strong> <strong>de</strong> secu<strong>en</strong>ciación y purificación<br />
Preparación <strong>de</strong> <strong>la</strong> Mix <strong>de</strong> seq<br />
Elongación <strong>en</strong> termoci<strong>la</strong>dores<br />
96°C 1 min.<br />
25 ciclos<br />
96°C 10 seg.<br />
50°C 5 seg.<br />
60°C 4 min.<br />
Purificación por precipitación<br />
Agregar: 2,5 l EDTA 125 mM + 30 l etanol absoluto.<br />
<strong>Reacción</strong> ¼ X Volúm<strong>en</strong><br />
BDT v3.1 1 ul<br />
5 x Seq Buffer 1.5 ul<br />
Primer 5 mM (5 pmol)<br />
Temp<strong>la</strong>do (conc. vs) 2ul<br />
Agua calidad ultrapura hasta 10ul VF<br />
C<strong>en</strong>trifugar 45 min a Max veloc. (4.000 rpm) <strong>en</strong> c<strong>en</strong>trífuga <strong>de</strong> p<strong>la</strong>cas. Eliminar solv<strong>en</strong>tes por inversión.<br />
Agregar: 120 l Etanol 70%.<br />
C<strong>en</strong>trifugar 15 min a Max veloc. (4.000 rpm) <strong>en</strong> c<strong>en</strong>trífuga <strong>de</strong> p<strong>la</strong>cas. Eliminar solv<strong>en</strong>tes por inversión.<br />
Secar precipitados a 37ºC por 30 min.<br />
3) Preparación <strong>de</strong> muestras para electroforesis <strong>en</strong> secu<strong>en</strong>ciador automático con sistemas automatizados para manejo <strong>de</strong><br />
líquidos<br />
Página 6 <strong>de</strong> 40
Change language