BASES MOLECULARES DEL DOLOR NEUROPÁTICO: UNA ...

Cuando se ensayaron en mGluR4, los derivados del ciclohexano mostraron
un perfil farmacológico diferente respecto al agonista selectivo del grupo III
de los mGluR L-AP4. Uno de los compuestos mostró un perfil modulador
similar al compuesto padre VU0155041. Los cálculos realizados por el
equipo 4 permitieron identificar la conformación activa posible del
enantiómero (1R,2S)-2.
Subproyecto III. Construcción de un modelo basado en levadura
para el estudio de la función de los receptores metabotrópicos de
glutamato y el cribado de alto rendimiento (HTS) de bibliotecas de
ligandos
1) Se construyeron varios vectores de expresión basados en el plásmido
pWS93, que incluye el promotor ADH1. Estos vectores expresaron las
formas truncadas de mGluR4 y mGluR7 (pWS93-mGlu4_ y pWS93-
mGlu7_). Se hicieron dos versiones de cada uno, una llevando la secuencia
líder humana y la otra llevando la secuencia líder STE2.
2) Se obtuvieron y ensayaron diversas cepas de levadura expresando
versiones modificadas de la proteína GPA1 para permitir la conexión
adecuada entre las vías transductoras de señal del receptor de mamífero y
de levadura.
3) Hemos llevado a cabo diversos experimentos de expresión mostrando la
producción de los receptores truncados en levadura, y hemos seguido la
trayectoria de las proteínas expresadas por fraccionamiento subcelular
seguida de inmunotransferencia y de inmunolocalización usando
microscopia de fluorescencia.
4) Hemos puesto a punto diversas pruebas de crecimiento para probar la
respuesta de las células de levadura modificadas mediante ingeniería al PAM
VU0155041.
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