Cinética y capacidad neutralizante de los anticuerpos homólogos y ...
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Materiales y Métodos<br />
3.3. Caracterización <strong>de</strong> la infecciones secundarias y terciarias en la<br />
Epi<strong>de</strong>mia Cubana <strong>de</strong> Dengue 3 Cuba, (2001/2002). Influencia <strong>de</strong><br />
<strong>de</strong>terminadas secuencias <strong>de</strong> infección viral en el <strong>de</strong>sarrollo <strong>de</strong> la forma<br />
severa <strong>de</strong> la enfermedad<br />
3.3.1. Muestras Serológicas<br />
Se estudiaron cuatro grupos <strong>de</strong> sueros:<br />
a) 6 sueros colectados entre el 5to-7mo día <strong>de</strong> la fiebre <strong>de</strong> casos clínicamente<br />
diagnosticados como FD (n=3) y FHD (n=3) en <strong>los</strong> que el diagnóstico clínico fue<br />
confirmado mediante la <strong>de</strong>tección <strong>de</strong> <strong>anticuerpos</strong> IgM a <strong>de</strong>ngue (178).<br />
b) 17 pares <strong>de</strong> sueros colectados entre el 5to-7mo día <strong>de</strong> la fiebre (primer suero) y 17-24<br />
meses <strong>de</strong>spués (convaleciente tardío) en individuos con un cuadro clínico confirmado <strong>de</strong><br />
FHD/SCD durante la epi<strong>de</strong>mia <strong>de</strong> DEN-3 <strong>de</strong>l 2001-2002 (178).<br />
c) 37 sueros <strong>de</strong> individuos con un cuadro clínico confirmado <strong>de</strong> FHD/SCD durante la<br />
epi<strong>de</strong>mia <strong>de</strong> DEN-3 <strong>de</strong>l 2001-2002 y que fueron colectados 17-24 meses <strong>de</strong>spués <strong>de</strong>l inicio<br />
<strong>de</strong> la fiebre (178).<br />
d) 40 sueros <strong>de</strong> individuos con un cuadro clínico confirmado <strong>de</strong> FD durante la epi<strong>de</strong>mia <strong>de</strong><br />
DEN-3 <strong>de</strong>l 2001-2002 y que fueron colectados 17-24 meses <strong>de</strong>spués <strong>de</strong>l inicio <strong>de</strong> la fiebre<br />
(178).<br />
3.3.2. Estudios serológicos<br />
3.3.2.1. Elisa <strong>de</strong> Captura <strong>de</strong> IgM (CAM-ELISA)<br />
La <strong>de</strong>tección <strong>de</strong> <strong>anticuerpos</strong> IgM a virus <strong>de</strong>ngue se realizó en todos <strong>los</strong> casos que fue<br />
necesario, siguiendo el protocolo <strong>de</strong> Técnicas <strong>de</strong>l Laboratorio <strong>de</strong> Arbovirus según las<br />
modificaciones realizadas por Vázquez y cols (195).<br />
3.3.2.2. Detección <strong>de</strong> <strong>anticuerpos</strong> IgG y <strong>neutralizante</strong>s<br />
Se <strong>de</strong>terminó el título <strong>de</strong> <strong>anticuerpos</strong> IgG mediante MEI siguiendo el protocolo <strong>de</strong>scrito en<br />
el acápite III.2.2. La presencia <strong>de</strong> <strong>anticuerpos</strong> <strong>neutralizante</strong>s a <strong>los</strong> 4 serotipos <strong>de</strong>l virus se<br />
realizó mediante NRNP siguiendo el protocolo <strong>de</strong>scrito en el mismo acápite. En este<br />
estudio se empleó el método 2 en la <strong>de</strong>terminación <strong>de</strong>l título <strong>de</strong> <strong>anticuerpos</strong> <strong>neutralizante</strong>s<br />
en <strong>los</strong> grupos estudiados.<br />
Células empleadas<br />
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