Cinética y capacidad neutralizante de los anticuerpos homólogos y ...

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Flujo de Trabajo Grupo I 252 sueros (adultos) confirmados dengue Materiales y Métodos Grupo II Grupo III 12 fallecidos por dengue (adultos) 141 Sueros 111 Vísceras (2-4 días) FH F Confirmación Virológica Aislamiento RCP Viral Tipo de Infección (MEI) Secundarios Secuencia de Infección (NRNP) 205 sueros (niños) no dengue 55
Materiales y Métodos 3.3. Caracterización de la infecciones secundarias y terciarias en la Epidemia Cubana de Dengue 3 Cuba, (2001/2002). Influencia de determinadas secuencias de infección viral en el desarrollo de la forma severa de la enfermedad 3.3.1. Muestras Serológicas Se estudiaron cuatro grupos de sueros: a) 6 sueros colectados entre el 5to-7mo día de la fiebre de casos clínicamente diagnosticados como FD (n=3) y FHD (n=3) en los que el diagnóstico clínico fue confirmado mediante la detección de anticuerpos IgM a dengue (178). b) 17 pares de sueros colectados entre el 5to-7mo día de la fiebre (primer suero) y 17-24 meses después (convaleciente tardío) en individuos con un cuadro clínico confirmado de FHD/SCD durante la epidemia de DEN-3 del 2001-2002 (178). c) 37 sueros de individuos con un cuadro clínico confirmado de FHD/SCD durante la epidemia de DEN-3 del 2001-2002 y que fueron colectados 17-24 meses después del inicio de la fiebre (178). d) 40 sueros de individuos con un cuadro clínico confirmado de FD durante la epidemia de DEN-3 del 2001-2002 y que fueron colectados 17-24 meses después del inicio de la fiebre (178). 3.3.2. Estudios serológicos 3.3.2.1. Elisa de Captura de IgM (CAM-ELISA) La detección de anticuerpos IgM a virus dengue se realizó en todos los casos que fue necesario, siguiendo el protocolo de Técnicas del Laboratorio de Arbovirus según las modificaciones realizadas por Vázquez y cols (195). 3.3.2.2. Detección de anticuerpos IgG y neutralizantes Se determinó el título de anticuerpos IgG mediante MEI siguiendo el protocolo descrito en el acápite III.2.2. La presencia de anticuerpos neutralizantes a los 4 serotipos del virus se realizó mediante NRNP siguiendo el protocolo descrito en el mismo acápite. En este estudio se empleó el método 2 en la determinación del título de anticuerpos neutralizantes en los grupos estudiados. Células empleadas 56
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