Cinética y capacidad neutralizante de los anticuerpos homólogos y ...

Indice
3.2. Caracterización de la infección secundaria en la epidemia cubana de virus DEN-2
Cuba, 1997_________________________________________________________________ 46
3.2.1. Muestras Serológicas ________________________________________________________ 46
3.2.2. Estudios Serológicos ________________________________________________________ 47
3.2.2.1. _________________________Determinación del título de anticuerpos IgG antidengue
______________________________________________________________________________ 47
3.2.2.2.Detección de Anticuerpos neutralizantes a los virus DEN-1 y DEN-2 por la técnica de NRNP.
______________________________________________________________________________ 47
3.2.3. Estudios Virológicos y Moleculares ____________________________________________ 52
3.2.3.1. Aislamiento Viral en las muestras de suero y vísceras de los fallecidos ____________ 52
3.2.3.2. Reacción en Cadena de la Polimerasa (RCP)_________________________________ 54
3.2.4. Análisis de los resultados_____________________________________________________ 54
3.3. Caracterización de la infecciones secundarias y terciarias en la Epidemia Cubana de
Dengue 3 Cuba, (2001/2002). Influencia de determinadas secuencias de infección viral en el
desarrollo de la forma severa de la enfermedad __________________________________ 56
3.3.1. Muestras Serológicas ________________________________________________________ 56
3.3.2. Estudios serológicos_________________________________________________________ 56
3.3.2.1. Elisa de Captura de IgM (CAM-ELISA) ____________________________________ 56
3.3.2.2. Detección de anticuerpos IgG y neutralizantes________________________________ 56
3.3.3. Análisis Estadístico _________________________________________________________ 57
3.4. Variación de los anticuerpos neutralizantes homólogos y heterólogos a diferentes
períodos de la infección promaria. Influencia de la ADA después de transcurrido 20 años.59
3.4.1. Muestras Serológicas ________________________________________________________ 59
3.4.2. Estudios serológicos_________________________________________________________ 59
3.4.2.1. Determinación de anticuerpos IgG y neutralizantes____________________________ 59
3.4.3. Ensayo de Amplificación Dependiente de Anticuerpos (ADA)________________________ 60
3.4.3.1. Procedimiento seguido para la ADA _______________________________________ 60
3.4.4. Análisis Estadístico _________________________________________________________ 61
3.5. Cinética de la respuesta de anticuerpos neutralizantes frente a cepas de diferentes
genotipos de virus DEN-3 en un panel de sueros humanos. _________________________ 63
3.5.1. Muestras Serológicas ________________________________________________________ 63
3.5.2. Estudios Serológicos ________________________________________________________ 63
3.5.3. Análisis Estadístico _________________________________________________________ 64
3.6. Cinética de anticuerpos neutralizantes y su relación con la viremia en 22 pacientes de
la Epidemia Cubana 2001-2002________________________________________________ 66
3.6.1. Pacientes y muestras de suero _________________________________________________ 66
3.6.2. Estudios serológicos_________________________________________________________ 67
3.6.2.1. Elisa de Captura de IgM (CAM-ELISA) ____________________________________ 67
3.6.2.2. Detección de anticuerpos IgG y neutralizantes________________________________ 67
3.6.3. Presentación de los resultados _________________________________________________ 67
3.6.4. Definiciones_______________________________________________________________ 68
3.6.5. Análisis de los resultados ____________________________________________________ 68
4. RESULTADOS Y DISCUSION _________________________________________71
4.1. Caracterización de la infección secundaria en la Epidemia Cubana de virus DEN-2 de
1997 ______________________________________________________________________ 71
4.2. Caracterización de las infecciones secundarias y terciarias en la Epidemia Cubana de
Dengue 3, (2001/2002). Influencia de las secuencias de infección virales en el desarrollo de
las formas severas de la enfermedad____________________________________________ 76