Cinética y capacidad neutralizante de los anticuerpos homólogos y ...

Revisión Bibliográfica
citopático que las C6/36 originales, manifestándolo más rápidamente, y se obtienen
mayores títulos virales que a 28º C (80).
El efecto citopático inducido por los cuatro serotipos virales en las líneas celulares puede
ser variable, reportándose la formación de sincitios, la presencia de células gigantes
multinucleadas y la fagocitosis (6).
Independientemente del sistema biológico empleado para el aislamiento, la identificación
viral puede realizarse por ensayos de inmunofluorescencia (IF) y de NRNP, utilizando
anticuerpos monoclonales y sueros hiperinmunes (81, 82). Existen anticuerpos
monoclonales específicos de complejo, de subcomplejo y de tipo. La IF representa un
método simple, económico, confiable y rápido para la identificación viral (6).
El principal problema asociado a la identificación de los virus del DEN en los cultivos
celulares con la utilización de anticuerpos monoclonales es, en ocasiones, la pobre
replicación viral. Por tal razón, la identificación en la siembra primaria resulta imposible en
algunos casos, por lo que son necesarios 1 ó 2 pases en el mismo sistema celular con el
objetivo de incrementar el número de células infectadas por el virus (6).
2.11.2. Técnicas serológicas
El diagnóstico serológico de los virus del DEN es complicado debido a la existencia de
determinantes antigénicos de reactividad cruzada compartidos por los cuatro serotipos
virales y otros flavivirus (68).
Entre los métodos clásicos desarrollados para demostrar la presencia de anticuerpos contra
los virus del DEN están la IH con eritrocitos de ganso, la NRNP y la fijación del
complemento (FC) (82, 83). La IH y la FC no permiten la determinación del serotipo
infectante. La NRNP es más sensible y específica de tipo, aunque más costosa y compleja
(6).
Las técnicas serológicas más utilizadas para el diagnóstico del virus DEN son la IF, los
ensayos inmunoenzimáticos sobre fase sólida (ELISA) y los radioinmunoensayos. Los
ELISA son de gran utilidad como pruebas diagnósticas por ser económicos, rápidos, fáciles
de ejecutar y por mostrar a su vez una elevada sensibilidad. La detección de anticuerpos
anti-DEN por ELISA de captura de IgM (CAM-ELISA) es el ensayo serológico utilizado
por la mayoría de los laboratorios para la vigilancia del DEN. Por lo general, la IgM se
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