Cinética y capacidad neutralizante de los anticuerpos homólogos y ...

Revisión Bibliográfica
anticuerpos IgG se utilizan muestras pareadas de sueros (tomadas en los primeros siete días
de comienzo de los síntomas y 14 a 21 días después). Adicionalmente, se ha demostrado la
utilidad de las muestras de sangre seca sobre el papel de filtro, tanto para la detección de
anticuerpos IgM como IgG específicos contra los virus del dengue; así como la utilidad de
la saliva para la detección de dichos anticuerpos, IgM e IgG (76).
2.11.1. Aislamiento e identificación viral
La muestra más utilizada para el aislamiento de los virus del DEN es el suero o el plasma
obtenidos durante el período febril (preferiblemente antes del quinto día del inicio de los
síntomas), cuando la viremia es elevada. En los casos fatales, pueden ser utilizados tejidos
frescos de necropsia de algunos órganos específicos como hígado, bazo, ganglios linfáticos
y timo (74).
Los sistemas biológicos empleados para el aislamiento viral son ratones lactantes, cultivos
celulares y mosquitos (74).
La inoculación intratoráxica de mosquitos es la técnica de mayor sensibilidad para el
aislamiento del virus DEN. Entre las especies más utilizadas están el Aedes albopictus,
Toxorynchites amboinensis y Toxorynchites splendens. Este método tiene la desventaja de
que requiere de facilidades especiales para el establecimiento y mantenimiento de las
colonias de mosquitos, así como de cierto grado de entrenamiento técnico para la
manipulación de los mismos (77).
La inoculación intracerebral de ratones lactantes ha sido utilizada tradicionalmente para el
aislamiento del virus DEN. Actualmente es considerado el método menos sensible (74).
La aplicación de las técnicas de cultivo celular para el aislamiento de los virus del DEN ha
permitido elevar la sensibilidad del mismo, con respecto a la inoculación intracerebral de
ratones lactantes. Para este propósito se han empleado líneas celulares de mamíferos: Vero
(riñón de mono verde africano), BHK-21 (riñón de hámster recién nacido), LLCMK2
(riñón de mono). Sin embargo, las líneas celulares obtenidas a partir de mosquitos son las
más sensibles y las de más amplio uso para el aislamiento de estos virus. Entre ellas están
AP61 (Aedes pseudoscutellaris), Tra-284 (Toxorrhynchites amboinensis), C6/36 (Aedes
albopictus), AP64 y CLA-1 (clonos de una línea celular de Aedes pseudoscutellaris) (78,
79). La sublínea celular C6/36 HT está adaptada a crecer a 33º C y exhibe el mismo efecto
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