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Cinética y capacidad neutralizante de los anticuerpos homólogos y ...

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Revisión Bibliográfica<br />

proteína <strong>de</strong> la envoltura (E) y la proteína <strong>de</strong> membrana (M), que dan lugar a las<br />

proyecciones <strong>de</strong> 7nm <strong>de</strong> longitud que sobresalen <strong>de</strong> la superficie <strong>de</strong>l virión (29).<br />

Las partículas virales que se encuentran <strong>de</strong>ntro <strong>de</strong> las vesículas intracelulares son<br />

inmaduras, contienen exclusivamente a la proteína precursora prM sin procesar y son<br />

menos infecciosas que las partículas liberadas al medio extracelular (30).<br />

2.4.1. Propieda<strong>de</strong>s físico-químicas<br />

Los viriones <strong>de</strong>l DEN presentan una <strong>de</strong>nsidad <strong>de</strong> flotación <strong>de</strong> 1.23 cm 3 y un coeficiente <strong>de</strong><br />

sedimentación <strong>de</strong> 210S (30). La envoltura lipídica constituye el 17% <strong>de</strong> <strong>los</strong> viriones, y<br />

como se <strong>de</strong>riva <strong>de</strong> lípidos celulares, las lipasas y <strong>los</strong> solventes lipídicos provocan la pérdida<br />

<strong>de</strong> la infectividad <strong>de</strong> la partícula viral. Estas son también inactivadas por el cloroformo, la<br />

formalina, el sulfato <strong>de</strong> protamina, el duo<strong>de</strong>cil sulfato <strong>de</strong> sodio, las proteasas, la luz<br />

ultravioleta y las radiaciones gamma. El tratamiento con beta-propiolactona es eficiente<br />

para la inactivación <strong>de</strong> <strong>los</strong> virus <strong>de</strong>l DEN, y permite retener la actividad antigénica mejor<br />

que la formalina o el tratamiento con fenol. La proteólisis enzimática con tripsina,<br />

quimotripsina, o papaína disminuyen la reactividad antigénica <strong>de</strong> la proteína E y <strong>los</strong><br />

<strong>de</strong>tergentes no iónicos, como el Tritón-X la solubilizan totalmente (31).<br />

Los virus <strong>de</strong>l DEN son rápidamente inactivados a altas temperaturas: a 50ºC la infectividad<br />

se reduce en un 50% en sólo 10 minutos y la inactivación total <strong>de</strong>l virus en la sangre o en<br />

soluciones proteicas ocurre por calentamiento a 56ºC durante 30 minutos. Las bajas<br />

temperaturas preservan la infectividad, con una mayor estabilidad a temperaturas menores<br />

<strong>de</strong> 60ºC, y se mantiene estable a 4ºC cuando el virus está liofilizado (32).<br />

2.4.2. Características antigénicas<br />

Los miembros <strong>de</strong>l género Flavivirus comparten sitios antigénicos comunes que son<br />

revelados por la prueba <strong>de</strong> inhibición <strong>de</strong> la hemaglutinación (IH), inicialmente tomada<br />

como base para su clasificación (33). La prueba <strong>de</strong> neutralización por reducción <strong>de</strong>l número<br />

<strong>de</strong> placas (NRNP) es mucho más discriminatoria, por lo que pue<strong>de</strong> ser usada para distinguir<br />

virus individuales <strong>de</strong>ntro <strong>de</strong>l género y subgrupos estrechamente relacionados. Usando como<br />

base la neutralización cruzada con antisueros hiperinmunes policlonales, 49 flavivirus han<br />

sido divididos en 8 complejos antigénicos que se correspon<strong>de</strong>n con la asociación a un<br />

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