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UNIVERSIDAD COMPLUTENSE DE MADRID - Biblioteca de la ...

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λ Tampón <strong>de</strong> carga<br />

Se mezc<strong>la</strong> (V:V) glicerol y Rojo Cresol (500µg/ml). El<br />

primero proporciona <strong>la</strong> <strong>de</strong>nsidad optima para que no<br />

difunda <strong>la</strong> muestra al cargar<strong>la</strong> en el gel <strong>de</strong> agarosa,<br />

mientras el segundo proporciona el color rojoanaranjado<br />

que nos sirve para visualizar el progreso <strong>de</strong><br />

<strong>la</strong> electroforesis.<br />

λ TBE 10x, Tampón (Tris-Borate/EDTA)<br />

Disolver en 1 litro <strong>de</strong> H2O bi<strong>de</strong>sti<strong>la</strong>da 100 g <strong>de</strong> Tris +<br />

55 g <strong>de</strong> ácido bórico + 8.3 g <strong>de</strong> EDTA. El pH <strong>de</strong>be estar<br />

entre 8.2 y 8.4. Filtrar por 0.22 µ.<br />

λ TEA 50x, Tampón (Tris-Acetate/EDTA)<br />

Tris 2 M pH 8.0+ ácido acético g<strong>la</strong>cial 1 M + EDTA 0.1<br />

M. Filtrar por 0.22 µ.<br />

λ TMAC, Solución (Tetramethy<strong>la</strong>mmonium chlori<strong>de</strong>)<br />

Solución compuesta <strong>de</strong> TMAC 3M + 50 mM Tris-HCl<br />

(pH 8.0) + 0.5 M EDTA + 0.1% SDS.<br />

λ Tris 2M pH 7.5<br />

Disolver H2O bi<strong>de</strong>sti<strong>la</strong>da 254 g <strong>de</strong> Tris- HCl + 47.2 g <strong>de</strong><br />

Tris-Base. Ajustar el pH a 7.5. Enrasar a 1 litro.<br />

λ Tris 2M pH 8.0<br />

Disolver en H2O bi<strong>de</strong>sti<strong>la</strong>da 177.6 g <strong>de</strong> Tris-HCl + 106<br />

g <strong>de</strong> Tris-Base. Ajustar el pH a 8.0. Enrasar a 1 litro.<br />

λ Tris 2M pH 9.5<br />

Disolver en H2O bi<strong>de</strong>sti<strong>la</strong>da 177.6 g <strong>de</strong> Tris-HCl + 106<br />

g <strong>de</strong> Tris-Base. Ajustar el pH a 9.5. Enrasar a 1 litro.<br />

λ X-gal (5-Bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D-ga<strong>la</strong>ctosi<strong>de</strong>)<br />

Disolver X-gal en dimetilformamida para hacer una<br />

solución a 20 mg/ml. Alicuotar y guardar protegido <strong>de</strong><br />

<strong>la</strong> luz a -20ºC.<br />

Eduardo Gómez Casado<br />

Material y Métodos 77

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