Morfología bacteriana 1
Morfología bacteriana 1
Morfología bacteriana 1
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MORFOLOGIA BACTERIANA<br />
Bioq. María Viviana Bojanich<br />
Microbiología General<br />
FACENA – UNNE- 2010<br />
1
Bacterias: Conceptos<br />
Pueden definirse como organismos unicelulares<br />
que:<br />
• se reproducen por fisión binaria,<br />
• la mayoría viven libremente y,<br />
• contienen toda la información genética, sistemas<br />
productores de energía y biosintéticos necesarios<br />
para su crecimiento y reproducción.<br />
2
Las bacterias son uno de los grupos más<br />
importantes del mundo microbiano, por:<br />
• nº de microorganismos,<br />
• importancia ecológica general ,y la<br />
• importancia práctica para seres humanos.<br />
Nuestros conocimientos de BM y fenómenos<br />
bioquímicos provienen de la investigación<br />
con bacterias<br />
3
Tamaño<br />
• Las bacterias son pequeñas y de estructura sencilla.<br />
• Tienen formas y tamaño característicos.<br />
• Son los m.o. de vida libre de menor tamaño que<br />
existen en la naturaleza.<br />
• Las más pequeñas, gén Mycoplasma, tienen aprox.<br />
0,3 µm de diámetro, casi como los virus mayores.<br />
• Existen investigaciones de células menores<br />
(nanobacterias o ultramicrobacterias)<br />
• Existen bacterias grandes que pueden alcanzar<br />
500 µm de longitud, y otras con un diámetro de 7 µm<br />
(igual que un eritrocito) 4
• Bacteria grande, con forma de cigarro que<br />
vive en el intestino del pez cirujano<br />
(Epulopiscium fishelsoni)<br />
• Volumen 1000 veces el de la E. coli<br />
• Móvil<br />
• Estructura de procariota<br />
Diferenciación entre procariotas y eucariotas<br />
en función del tamaño????<br />
5
Comparación<br />
6
Formas <strong>bacteriana</strong>s<br />
•Cocos<br />
•Cocobacilos<br />
•Bacilos<br />
•Vibrios<br />
•Espirilos<br />
•Otras formas:<br />
–Filamentos<br />
–Anillos casi cerrados<br />
–Con prolongaciones<br />
(prostecas)
Agrupaciones <strong>bacteriana</strong>s<br />
La agrupación deriva de la tendencia de las<br />
células hijas a permanecer parcialmente<br />
adheridas después de la división binaria, y<br />
dependerá del grado de adherencia entre<br />
células hijas y del plano de división de la<br />
bacteria.
• Un solo plano de división<br />
– De dos células:<br />
• Diplococos<br />
• diplobacilos<br />
– Cadenetas de varias células<br />
• estreptococos,<br />
• Estreptobacilos<br />
• Dos o más planos de división (en cocos)<br />
– Dos planos perpendiculares: tétradas<br />
– Tres planos ortogonales: sarcinas (paquetes cúbicos)<br />
– Muchos planos aleatorios: estafilococos
ULTRAESTRUCTURA BACTERIANA<br />
11
Elementos estructurales obligados y<br />
Obligados<br />
Membrana<br />
citoplasmática<br />
Citoplasma<br />
(Ribosomas)<br />
Genoma<br />
Pared celular<br />
facultativos<br />
Facultativos<br />
Cápsulas<br />
Flagelos<br />
Fimbrias o pili<br />
Esporas<br />
12
Elementos estructurales<br />
obligados<br />
Membrana citoplasmática<br />
Citoplasma (Ribosomas)<br />
Material genético<br />
Pared celular
Citoplasma o citosol<br />
• Ausencia de sistemas membranosos: RER,<br />
Aparato de Golgi.<br />
• Ausencia de mitocondrias.<br />
• Presencia de ribosomas y cuerpos de<br />
inclusión<br />
• Nucleoide: DNA cromosómico condensado,<br />
sin membrana nuclear limitante.<br />
• Enzimas, iones inorgánicos, gránulos y<br />
esporas.<br />
14
El citoplasma y su contenido<br />
• Citoplasma procariota es un sistema coloidal:<br />
– Fase dispersante: agua con sustancias en disolución<br />
(citosol)<br />
– Fase dispersa: macromoléculas y partículas<br />
supramoleculares<br />
• Contiene:<br />
– Material genético: cromosoma (y plásmidos)<br />
– Ribosomas<br />
– Inclusiones y orgánulos (no en todas)
Estructuras membranosas<br />
intracitoplásmicas<br />
• Estructuras derivadas de invaginaciones de<br />
la membrana:<br />
– Mesosomas<br />
– Cromatóforos<br />
– Otras invaginaciones<br />
• Tilacoides de cianobacterias
Inclusiones de reserva<br />
Las inclusiones de reserva son acúmulos de sustancias orgánicas o<br />
inorgánicas, rodeadas o no de una envoltura limitante de<br />
naturaleza proteínica, que se originan dentro del citoplasma bajo<br />
determinadas condiciones de crecimiento. Constituyen reservas de<br />
C o N (inclusiones orgánicas) y de P o S (inclusiones<br />
inorgánicas).<br />
• Inclusiones orgánicas<br />
– Inclusiones polisacarídicas (almidón, glucógeno)<br />
– Gránulos de poli-hidroxialcanoatos<br />
– Inclusiones de hidrocarburos<br />
– Gránulos de cianoficina<br />
• Inclusiones inorgánicas<br />
– Gránulos de polifosfato (metacromáticos)<br />
– Glóbulos de azufre
Organización<br />
Material genético<br />
• 1 solo cromosoma, se localiza en un área<br />
llamada nucleoide, y no está cubierto por<br />
membrana.<br />
• No asociado a histonas<br />
• Algunas bacterias pueden tener plásmidos<br />
Reproducción<br />
• Fisión binaria<br />
• Estabilidad genética
El cromosoma procariota:<br />
composición química y estructura<br />
• Los cromosomas aislados constan de<br />
– 60% de ADN<br />
– 30% de ARN<br />
– 10% de proteínas<br />
• Normalmente, un solo cromosoma circular,<br />
cerrado covalentemente (c.c.c.)<br />
• Haploidía, pero pueden existir varias copias del<br />
cromosoma cuando la bacteria crece rápido
Tamaño del cromosoma<br />
• Bacterias “típicas”: 3000-5000 kpb<br />
– Ej.: Escherichia coli (4700 kpb)<br />
• Bacterias pequeñas: 700-1000 kpb<br />
– Ej.: Mycoplasma genitalium (700 kpb)<br />
• Bacterias con ciclos complejos: 12000 kpb<br />
– Ej.: Actinomicetos, cianobacterias
LA MEMBRANA<br />
CITOPLASMÁTICA<br />
21
Composición química<br />
• Bicapa proteolipídica que delimita al<br />
protoplasto<br />
• Su proporción proteínas:lípidos es alta<br />
(80:20), mayor que en eucariotas<br />
• Carece de esteroles (salvo excepciones),<br />
pero muchas bacterias poseen hopanoides<br />
(triterpenoides pentacíclicos), que confieren<br />
parte de la rigidez a la membrana
Funciones<br />
• Barrera permeable selectiva entre el citoplasma y el medio<br />
ambiente.<br />
• Secreta proteínas destinadas a la excreción (toxinas y<br />
otros factores de virulencia).<br />
• Citocromos: metabolismo oxidativo.<br />
• Interviene en procesos de obtención de energía<br />
(respiración, fotosíntesis)<br />
• Sitio de síntesis de ADN, polímeros de pared celular y los<br />
lípidos de membrana<br />
• Enzimas que participan de la síntesis de la pared<br />
<strong>bacteriana</strong>.<br />
• Proteínas implicadas en el transporte activo de diversas<br />
sustancias: permeasas.<br />
23
PARED CELULAR<br />
Es una característica distintiva de los procariotas<br />
que no posee ningún otro ser vivo<br />
Su rigidez es lo que proporciona la forma a la<br />
bacteria.<br />
Sus funciones son:<br />
• Proteger a las bacterias de la diferencia de<br />
presión osmótica entre el medio interno y el<br />
exterior<br />
• Funciona como una barrera contra sustancias<br />
tóxicas químicas y biológicas presentes en el<br />
medio externo.<br />
24
Composición y estructura de la pared:<br />
peptidoglicano o mureína<br />
Mureína o peptidoglicano: cadena lineal de dos azúcares<br />
alternados, N-acetilglucosamina y ácido N-acetilmurámico.<br />
A cada residuo de NAM se halla ligado un tetrapéptido.<br />
25
Peptidoglucano (PG)<br />
composición química<br />
• La unidad disacarídica que se repite es:<br />
– N-acetilglucosamina (NAG)...<br />
...unida por enlace β(14) con...<br />
– ... N-acetilmurámico (NAM)<br />
• Las distintas unidades disacarídicas se unen entre<br />
sí mediante enlaces β(1—4)<br />
– Este enlace puede ser roto por la lisozima<br />
• La cadena tetrapeptídica sale desde el grupo<br />
–COOH del lactilo de cada NAM y suele ser:<br />
– L-ala D-glu m-DAP D-ala (G-)<br />
– L-ala D-glu L-lisina D-ala (G+)
Peptidoglicano o mureína<br />
Grampositiva Gramnegativa<br />
L-Alanina, D-glutámico, L-Lisina,<br />
D-Alanina<br />
L-Alanina, D-glutámico,<br />
Meso-diaminopimélico , D-Alanina<br />
Las cadenas polisacáridas paralelas se hallan unidas<br />
transversalmente directamente a través de los tetrapéptidos<br />
(bacterias gramnegativas) o a través de un puente de pentaglicina<br />
que conecta dos tetrapéptidos (bacterias grampositivas).<br />
27
Existen dos tipos de pared, que pueden diferenciarse por sus<br />
características tintoriales:<br />
1) aquellas capaces de retener el colorante cristal violta<br />
luego de la decoloración con alcohol-acetona, Gram +<br />
2) aquellas que pierden el colorante luego de la<br />
decoloración, Gram -<br />
28
Envolturas celulares de las bacterias<br />
grampositivas<br />
29
El PG de Gram-positivas está inmerso en una matriz aniónica (hasta<br />
50%) de:<br />
Ácidos teicoicos: polímeros (n
Envolturas celulares de las bacterias<br />
gramnegativas<br />
32
Membrana externa<br />
• Exclusiva de bacterias G-<br />
• Bicapa proteolípídica<br />
• Estructura muy asimética:<br />
– En la lámina externa:<br />
• 60% de proteínas<br />
• 40% de lipopolisacárido (exclusivo de Gram-)<br />
– En la lámina interna:<br />
• No hay lipopolisacárido<br />
• Existen<br />
– Fosfolípidos<br />
– Lipoproteínas<br />
– Otras proteínas
El lipopolisacárido<br />
•Lípido A: Fosfolípido con glucosamina<br />
•Core: Polisacárido no específico<br />
•Antígeno somático “O”: cadenas laterales de PS<br />
Unidad repetitiva de<br />
la cadena lateral<br />
Núcleo externo<br />
Núcleo interno<br />
A.G. saturados<br />
(C-14): beta-<br />
hidroximirístico<br />
Glucosamina-<br />
ß(16)glucosamina,<br />
con<br />
–OH en 1<br />
sustituido con –Petanolamina
Papeles y funciones del LPS<br />
• Papel estructural: Carácter masivo lípido A<br />
– Menor fluidez de esta membran<br />
– Más resistente a detergentes y solventes<br />
• Las cadenas laterales<br />
– menos permeable a moléculas hidrofóbicas (Ej.:<br />
resisten mejor muchos antibióticos)<br />
– Antígeno somático “O” bacterias Gram-negativas<br />
– Condiciona virulencia en bacterias patógenas<br />
• Se une a cationes Mg, Zn<br />
– Si añadimos agente quelante, como EDTA <br />
desorganización de la membrana externa
• Región del lípido A: endotoxina<br />
– Papel positivo:<br />
• El macrófago reconoce el LPS, y libera citoquinas<br />
activa el sistema inmune<br />
– Papel negativo:<br />
• A veces, el sistema inmune se activa “en exceso”<br />
por el LPS, dando síntomas patológicos<br />
– Inducción de fiebre (pirogenicidad)<br />
– Hipotensión, a veces con fallo cardiaco<br />
– Actividad necrótica en tejidos
Proteínas de la membrana<br />
externa<br />
• Porinas: forman trímeros, con canales interiores<br />
que atraviesan la membrana externa<br />
– Solo dejan pasar moléculas por debajo de cierto<br />
tamaño (
Papeles y funciones de la membrana<br />
• Tamiz molecular<br />
externa<br />
– Permite el paso de moléculas relativamente<br />
pequeñas<br />
– protección frente a agentes antibacterianos<br />
• Colorantes<br />
• Antibióticos<br />
• Enzimas (ej.: lisozima)<br />
• Ácidos biliares
• Condiciona propiedades de superficie:<br />
– Grado de humedad<br />
– Adhesividad<br />
– Carga eléctrica<br />
• Lugar donde se fijan las proteínas del<br />
sistema defensivo Complemento del<br />
hospedador<br />
• Lugares de adsorción de ciertos fagos
El espacio periplásmico<br />
(periplasma)<br />
• Compartimento acuoso, relleno del gel<br />
periplásmico:<br />
– RNasas y fosfatasas<br />
– Proteínas de transporte de ciertos nutrientes<br />
– Proteínas de unión a señales químicas<br />
– En bacterias desnitrificantes y quimiolitoautotrofas:<br />
proteínas de transporte de electrones<br />
• Función de osmorregulación
Todas las bacterias pueden<br />
asignarse como Gram + o Gram -<br />
con tres excepciones:<br />
• Micobacterias<br />
• Treponemas o espiroquetas<br />
• Micoplasmas
• Las micobacterias, tienen una estructura<br />
que responde a G+, pero no se tiñen por el<br />
gran contenido de lípidos de la pared.<br />
• Se utiliza la coloración de Ziehl-Neelsen.<br />
43
• Los treponemas, que tienen estructura de<br />
pared de G-, pero no pueden ser<br />
observados porque son tan finos que caen<br />
debajo del límite de resolución del MO<br />
• Los micoplasmas, que carecen de pared<br />
celular.<br />
44
Pared de las bacterias ácido-alcohol<br />
resistentes (BAAR)<br />
• Pared especial de ciertas Gram-positivas:<br />
Nocardia, Mycobacterium<br />
• Resisten la decoloración con clorhídrico-etanol<br />
( ácido-alcohol resistentes)<br />
• Esta propiedad deriva de:<br />
– Ácidos micólicos (ß-hidroxiácidos grasos ramificados<br />
en α, de cadena muy larga (hasta 91 C)<br />
– Glucolípidos<br />
– Ceras
Pared celular de las<br />
Mycobacterias<br />
Lipoarabinomananos<br />
Glicolípidos específicos de<br />
especie<br />
Acidos micólicos<br />
Peptidoglicano<br />
Fosfatidilinositol<br />
manósidos<br />
Membrana<br />
citoplasmática<br />
46<br />
Arabinogalactano
Lípidos de pared de bacterias AAR<br />
• Ácidos micólicos: ß-hidroxiácidos grasos ramificados en<br />
α, de cadena muy larga (hasta 91 C)<br />
– PGarabinogalactanoácidos micólicos<br />
• Glucolípidos:<br />
– Micolatos de trehalosa<br />
• Funcionan como “factor de crecimiento en cuerdas” en<br />
Mycobacterium<br />
– Sulfolípidos de trehalosa<br />
• Factores de virulencia<br />
• En Mycobacterium tuberculosis evasinas (inhiben la fusión<br />
fagosoma-lisosoma en macrófagos)<br />
– Micósidos (unión éster entre micólicos y azúcares)<br />
• Ceras: unión de micólicos con alcoholes ramificados de<br />
cadena larga (C30-C34)
Papeles conferidos por la pared<br />
BAAR<br />
• Aspecto y consistencia cérea de las colonias en<br />
placas de Petri<br />
• En medios líquidos crecen formando grumos<br />
• Gran impermeabilidad<br />
– Resistencia a desecación<br />
– Resistencia a agentes antibacterianos<br />
• Detergentes<br />
• Oxidantes<br />
• Ácidos y bases
Bacterias sin pared celular<br />
• Mycoplasmas<br />
• Protoplastos: son bacterias G+ que han<br />
perdido su pared celular.<br />
• Esferoplastos : son bacterias G- que han<br />
perdido parte de sus envolturas, y pueden<br />
replicarse in vitro.<br />
Formas L: pueden regenerar la bacteria G-<br />
49