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Morfología bacteriana 1

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MORFOLOGIA BACTERIANA<br />

Bioq. María Viviana Bojanich<br />

Microbiología General<br />

FACENA – UNNE- 2010<br />

1


Bacterias: Conceptos<br />

Pueden definirse como organismos unicelulares<br />

que:<br />

• se reproducen por fisión binaria,<br />

• la mayoría viven libremente y,<br />

• contienen toda la información genética, sistemas<br />

productores de energía y biosintéticos necesarios<br />

para su crecimiento y reproducción.<br />

2


Las bacterias son uno de los grupos más<br />

importantes del mundo microbiano, por:<br />

• nº de microorganismos,<br />

• importancia ecológica general ,y la<br />

• importancia práctica para seres humanos.<br />

Nuestros conocimientos de BM y fenómenos<br />

bioquímicos provienen de la investigación<br />

con bacterias<br />

3


Tamaño<br />

• Las bacterias son pequeñas y de estructura sencilla.<br />

• Tienen formas y tamaño característicos.<br />

• Son los m.o. de vida libre de menor tamaño que<br />

existen en la naturaleza.<br />

• Las más pequeñas, gén Mycoplasma, tienen aprox.<br />

0,3 µm de diámetro, casi como los virus mayores.<br />

• Existen investigaciones de células menores<br />

(nanobacterias o ultramicrobacterias)<br />

• Existen bacterias grandes que pueden alcanzar<br />

500 µm de longitud, y otras con un diámetro de 7 µm<br />

(igual que un eritrocito) 4


• Bacteria grande, con forma de cigarro que<br />

vive en el intestino del pez cirujano<br />

(Epulopiscium fishelsoni)<br />

• Volumen 1000 veces el de la E. coli<br />

• Móvil<br />

• Estructura de procariota<br />

Diferenciación entre procariotas y eucariotas<br />

en función del tamaño????<br />

5


Comparación<br />

6


Formas <strong>bacteriana</strong>s<br />

•Cocos<br />

•Cocobacilos<br />

•Bacilos<br />

•Vibrios<br />

•Espirilos<br />

•Otras formas:<br />

–Filamentos<br />

–Anillos casi cerrados<br />

–Con prolongaciones<br />

(prostecas)


Agrupaciones <strong>bacteriana</strong>s<br />

La agrupación deriva de la tendencia de las<br />

células hijas a permanecer parcialmente<br />

adheridas después de la división binaria, y<br />

dependerá del grado de adherencia entre<br />

células hijas y del plano de división de la<br />

bacteria.


• Un solo plano de división<br />

– De dos células:<br />

• Diplococos<br />

• diplobacilos<br />

– Cadenetas de varias células<br />

• estreptococos,<br />

• Estreptobacilos<br />

• Dos o más planos de división (en cocos)<br />

– Dos planos perpendiculares: tétradas<br />

– Tres planos ortogonales: sarcinas (paquetes cúbicos)<br />

– Muchos planos aleatorios: estafilococos


ULTRAESTRUCTURA BACTERIANA<br />

11


Elementos estructurales obligados y<br />

Obligados<br />

Membrana<br />

citoplasmática<br />

Citoplasma<br />

(Ribosomas)<br />

Genoma<br />

Pared celular<br />

facultativos<br />

Facultativos<br />

Cápsulas<br />

Flagelos<br />

Fimbrias o pili<br />

Esporas<br />

12


Elementos estructurales<br />

obligados<br />

Membrana citoplasmática<br />

Citoplasma (Ribosomas)<br />

Material genético<br />

Pared celular


Citoplasma o citosol<br />

• Ausencia de sistemas membranosos: RER,<br />

Aparato de Golgi.<br />

• Ausencia de mitocondrias.<br />

• Presencia de ribosomas y cuerpos de<br />

inclusión<br />

• Nucleoide: DNA cromosómico condensado,<br />

sin membrana nuclear limitante.<br />

• Enzimas, iones inorgánicos, gránulos y<br />

esporas.<br />

14


El citoplasma y su contenido<br />

• Citoplasma procariota es un sistema coloidal:<br />

– Fase dispersante: agua con sustancias en disolución<br />

(citosol)<br />

– Fase dispersa: macromoléculas y partículas<br />

supramoleculares<br />

• Contiene:<br />

– Material genético: cromosoma (y plásmidos)<br />

– Ribosomas<br />

– Inclusiones y orgánulos (no en todas)


Estructuras membranosas<br />

intracitoplásmicas<br />

• Estructuras derivadas de invaginaciones de<br />

la membrana:<br />

– Mesosomas<br />

– Cromatóforos<br />

– Otras invaginaciones<br />

• Tilacoides de cianobacterias


Inclusiones de reserva<br />

Las inclusiones de reserva son acúmulos de sustancias orgánicas o<br />

inorgánicas, rodeadas o no de una envoltura limitante de<br />

naturaleza proteínica, que se originan dentro del citoplasma bajo<br />

determinadas condiciones de crecimiento. Constituyen reservas de<br />

C o N (inclusiones orgánicas) y de P o S (inclusiones<br />

inorgánicas).<br />

• Inclusiones orgánicas<br />

– Inclusiones polisacarídicas (almidón, glucógeno)<br />

– Gránulos de poli-hidroxialcanoatos<br />

– Inclusiones de hidrocarburos<br />

– Gránulos de cianoficina<br />

• Inclusiones inorgánicas<br />

– Gránulos de polifosfato (metacromáticos)<br />

– Glóbulos de azufre


Organización<br />

Material genético<br />

• 1 solo cromosoma, se localiza en un área<br />

llamada nucleoide, y no está cubierto por<br />

membrana.<br />

• No asociado a histonas<br />

• Algunas bacterias pueden tener plásmidos<br />

Reproducción<br />

• Fisión binaria<br />

• Estabilidad genética


El cromosoma procariota:<br />

composición química y estructura<br />

• Los cromosomas aislados constan de<br />

– 60% de ADN<br />

– 30% de ARN<br />

– 10% de proteínas<br />

• Normalmente, un solo cromosoma circular,<br />

cerrado covalentemente (c.c.c.)<br />

• Haploidía, pero pueden existir varias copias del<br />

cromosoma cuando la bacteria crece rápido


Tamaño del cromosoma<br />

• Bacterias “típicas”: 3000-5000 kpb<br />

– Ej.: Escherichia coli (4700 kpb)<br />

• Bacterias pequeñas: 700-1000 kpb<br />

– Ej.: Mycoplasma genitalium (700 kpb)<br />

• Bacterias con ciclos complejos: 12000 kpb<br />

– Ej.: Actinomicetos, cianobacterias


LA MEMBRANA<br />

CITOPLASMÁTICA<br />

21


Composición química<br />

• Bicapa proteolipídica que delimita al<br />

protoplasto<br />

• Su proporción proteínas:lípidos es alta<br />

(80:20), mayor que en eucariotas<br />

• Carece de esteroles (salvo excepciones),<br />

pero muchas bacterias poseen hopanoides<br />

(triterpenoides pentacíclicos), que confieren<br />

parte de la rigidez a la membrana


Funciones<br />

• Barrera permeable selectiva entre el citoplasma y el medio<br />

ambiente.<br />

• Secreta proteínas destinadas a la excreción (toxinas y<br />

otros factores de virulencia).<br />

• Citocromos: metabolismo oxidativo.<br />

• Interviene en procesos de obtención de energía<br />

(respiración, fotosíntesis)<br />

• Sitio de síntesis de ADN, polímeros de pared celular y los<br />

lípidos de membrana<br />

• Enzimas que participan de la síntesis de la pared<br />

<strong>bacteriana</strong>.<br />

• Proteínas implicadas en el transporte activo de diversas<br />

sustancias: permeasas.<br />

23


PARED CELULAR<br />

Es una característica distintiva de los procariotas<br />

que no posee ningún otro ser vivo<br />

Su rigidez es lo que proporciona la forma a la<br />

bacteria.<br />

Sus funciones son:<br />

• Proteger a las bacterias de la diferencia de<br />

presión osmótica entre el medio interno y el<br />

exterior<br />

• Funciona como una barrera contra sustancias<br />

tóxicas químicas y biológicas presentes en el<br />

medio externo.<br />

24


Composición y estructura de la pared:<br />

peptidoglicano o mureína<br />

Mureína o peptidoglicano: cadena lineal de dos azúcares<br />

alternados, N-acetilglucosamina y ácido N-acetilmurámico.<br />

A cada residuo de NAM se halla ligado un tetrapéptido.<br />

25


Peptidoglucano (PG)<br />

composición química<br />

• La unidad disacarídica que se repite es:<br />

– N-acetilglucosamina (NAG)...<br />

...unida por enlace β(14) con...<br />

– ... N-acetilmurámico (NAM)<br />

• Las distintas unidades disacarídicas se unen entre<br />

sí mediante enlaces β(1—4)<br />

– Este enlace puede ser roto por la lisozima<br />

• La cadena tetrapeptídica sale desde el grupo<br />

–COOH del lactilo de cada NAM y suele ser:<br />

– L-ala D-glu m-DAP D-ala (G-)<br />

– L-ala D-glu L-lisina D-ala (G+)


Peptidoglicano o mureína<br />

Grampositiva Gramnegativa<br />

L-Alanina, D-glutámico, L-Lisina,<br />

D-Alanina<br />

L-Alanina, D-glutámico,<br />

Meso-diaminopimélico , D-Alanina<br />

Las cadenas polisacáridas paralelas se hallan unidas<br />

transversalmente directamente a través de los tetrapéptidos<br />

(bacterias gramnegativas) o a través de un puente de pentaglicina<br />

que conecta dos tetrapéptidos (bacterias grampositivas).<br />

27


Existen dos tipos de pared, que pueden diferenciarse por sus<br />

características tintoriales:<br />

1) aquellas capaces de retener el colorante cristal violta<br />

luego de la decoloración con alcohol-acetona, Gram +<br />

2) aquellas que pierden el colorante luego de la<br />

decoloración, Gram -<br />

28


Envolturas celulares de las bacterias<br />

grampositivas<br />

29


El PG de Gram-positivas está inmerso en una matriz aniónica (hasta<br />

50%) de:<br />

Ácidos teicoicos: polímeros (n


Envolturas celulares de las bacterias<br />

gramnegativas<br />

32


Membrana externa<br />

• Exclusiva de bacterias G-<br />

• Bicapa proteolípídica<br />

• Estructura muy asimética:<br />

– En la lámina externa:<br />

• 60% de proteínas<br />

• 40% de lipopolisacárido (exclusivo de Gram-)<br />

– En la lámina interna:<br />

• No hay lipopolisacárido<br />

• Existen<br />

– Fosfolípidos<br />

– Lipoproteínas<br />

– Otras proteínas


El lipopolisacárido<br />

•Lípido A: Fosfolípido con glucosamina<br />

•Core: Polisacárido no específico<br />

•Antígeno somático “O”: cadenas laterales de PS<br />

Unidad repetitiva de<br />

la cadena lateral<br />

Núcleo externo<br />

Núcleo interno<br />

A.G. saturados<br />

(C-14): beta-<br />

hidroximirístico<br />

Glucosamina-<br />

ß(16)glucosamina,<br />

con<br />

–OH en 1<br />

sustituido con –Petanolamina


Papeles y funciones del LPS<br />

• Papel estructural: Carácter masivo lípido A<br />

– Menor fluidez de esta membran<br />

– Más resistente a detergentes y solventes<br />

• Las cadenas laterales<br />

– menos permeable a moléculas hidrofóbicas (Ej.:<br />

resisten mejor muchos antibióticos)<br />

– Antígeno somático “O” bacterias Gram-negativas<br />

– Condiciona virulencia en bacterias patógenas<br />

• Se une a cationes Mg, Zn<br />

– Si añadimos agente quelante, como EDTA <br />

desorganización de la membrana externa


• Región del lípido A: endotoxina<br />

– Papel positivo:<br />

• El macrófago reconoce el LPS, y libera citoquinas<br />

activa el sistema inmune<br />

– Papel negativo:<br />

• A veces, el sistema inmune se activa “en exceso”<br />

por el LPS, dando síntomas patológicos<br />

– Inducción de fiebre (pirogenicidad)<br />

– Hipotensión, a veces con fallo cardiaco<br />

– Actividad necrótica en tejidos


Proteínas de la membrana<br />

externa<br />

• Porinas: forman trímeros, con canales interiores<br />

que atraviesan la membrana externa<br />

– Solo dejan pasar moléculas por debajo de cierto<br />

tamaño (


Papeles y funciones de la membrana<br />

• Tamiz molecular<br />

externa<br />

– Permite el paso de moléculas relativamente<br />

pequeñas<br />

– protección frente a agentes antibacterianos<br />

• Colorantes<br />

• Antibióticos<br />

• Enzimas (ej.: lisozima)<br />

• Ácidos biliares


• Condiciona propiedades de superficie:<br />

– Grado de humedad<br />

– Adhesividad<br />

– Carga eléctrica<br />

• Lugar donde se fijan las proteínas del<br />

sistema defensivo Complemento del<br />

hospedador<br />

• Lugares de adsorción de ciertos fagos


El espacio periplásmico<br />

(periplasma)<br />

• Compartimento acuoso, relleno del gel<br />

periplásmico:<br />

– RNasas y fosfatasas<br />

– Proteínas de transporte de ciertos nutrientes<br />

– Proteínas de unión a señales químicas<br />

– En bacterias desnitrificantes y quimiolitoautotrofas:<br />

proteínas de transporte de electrones<br />

• Función de osmorregulación


Todas las bacterias pueden<br />

asignarse como Gram + o Gram -<br />

con tres excepciones:<br />

• Micobacterias<br />

• Treponemas o espiroquetas<br />

• Micoplasmas


• Las micobacterias, tienen una estructura<br />

que responde a G+, pero no se tiñen por el<br />

gran contenido de lípidos de la pared.<br />

• Se utiliza la coloración de Ziehl-Neelsen.<br />

43


• Los treponemas, que tienen estructura de<br />

pared de G-, pero no pueden ser<br />

observados porque son tan finos que caen<br />

debajo del límite de resolución del MO<br />

• Los micoplasmas, que carecen de pared<br />

celular.<br />

44


Pared de las bacterias ácido-alcohol<br />

resistentes (BAAR)<br />

• Pared especial de ciertas Gram-positivas:<br />

Nocardia, Mycobacterium<br />

• Resisten la decoloración con clorhídrico-etanol<br />

( ácido-alcohol resistentes)<br />

• Esta propiedad deriva de:<br />

– Ácidos micólicos (ß-hidroxiácidos grasos ramificados<br />

en α, de cadena muy larga (hasta 91 C)<br />

– Glucolípidos<br />

– Ceras


Pared celular de las<br />

Mycobacterias<br />

Lipoarabinomananos<br />

Glicolípidos específicos de<br />

especie<br />

Acidos micólicos<br />

Peptidoglicano<br />

Fosfatidilinositol<br />

manósidos<br />

Membrana<br />

citoplasmática<br />

46<br />

Arabinogalactano


Lípidos de pared de bacterias AAR<br />

• Ácidos micólicos: ß-hidroxiácidos grasos ramificados en<br />

α, de cadena muy larga (hasta 91 C)<br />

– PGarabinogalactanoácidos micólicos<br />

• Glucolípidos:<br />

– Micolatos de trehalosa<br />

• Funcionan como “factor de crecimiento en cuerdas” en<br />

Mycobacterium<br />

– Sulfolípidos de trehalosa<br />

• Factores de virulencia<br />

• En Mycobacterium tuberculosis evasinas (inhiben la fusión<br />

fagosoma-lisosoma en macrófagos)<br />

– Micósidos (unión éster entre micólicos y azúcares)<br />

• Ceras: unión de micólicos con alcoholes ramificados de<br />

cadena larga (C30-C34)


Papeles conferidos por la pared<br />

BAAR<br />

• Aspecto y consistencia cérea de las colonias en<br />

placas de Petri<br />

• En medios líquidos crecen formando grumos<br />

• Gran impermeabilidad<br />

– Resistencia a desecación<br />

– Resistencia a agentes antibacterianos<br />

• Detergentes<br />

• Oxidantes<br />

• Ácidos y bases


Bacterias sin pared celular<br />

• Mycoplasmas<br />

• Protoplastos: son bacterias G+ que han<br />

perdido su pared celular.<br />

• Esferoplastos : son bacterias G- que han<br />

perdido parte de sus envolturas, y pueden<br />

replicarse in vitro.<br />

Formas L: pueden regenerar la bacteria G-<br />

49

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