5.9 RMN Bidimensional

Resonancia Magnética Nuclear
de gradientes durante el período de mezcla. La inhomogeneidad asociada al pulso de
gradientes en z (inhomogeneidad a lo largo de z, campos BB0B
efectivos
que varían
linealmente) desfasa y anula toda coherencia SQ o DQ durante este tiempo pero no
afecta la magnetización longitudinal, que es la de interés en el NOESY. Las
interferencias más difíciles de eliminar son las coherencias a cero cuanto existentes
durante el período de mezcla que sean convertidas por el pulso final en coherencias a
simple cuanto detectables. El procedimiento más común para eliminar estas interferencias
es variar ligeramente en forma aleatoria el tiempo de mezcla de un incremento de tB1B a
otro. La magnetización de interés para el NOESY (magnetización longitudinal) es poco
sensible a pequeños cambios en τBmB, mientras que las coherencias a cero cuanto (oscilarán
de acuerdo al offset y serán muy sensible aún a cambios moderados de τBmB, anulándose
efectivamente por este procedimiento.
Los espectros NOESY presentan una apariencia similar al COSY, con simetría respecto
a la diagonal. Se prefiere su presentación en formato sensible a la fase, donde pueden
ajustarse todas las señales como absortivas positivas o negativas. Lo importante es el
signo relativo de las señales. Si ajustamos las señales en la diagonal como positivas, el
signo de los picos de cruce depende del origen del pico y de la movilidad de la red, como
se muestra en la Tabla 5.29.
Tabla 5.29 Signo de los picos de cruce en NOESY
Signo diagonal Origen pico cruce Signo pico de cruce
Positivo
NOE positivo (alta movilidad) Negativo
(convenio) NOE negativo (baja movilidad) Positivo
Intercambio químico Positivo
Dos espines en intercambio químico lento (señales independientes) pueden intercambiar
magnetización y dar lugar a picos de cruce en el NOESY. En moléculas pequeñas con NOEs
positivos los picos de cruce por contacto NOE y por intercambio químico pueden ser distinguidos
por su signo. Sin embargo en macromoléculas ambos picos de cruce tienen el mismo signo y no
pueden ser diferenciados.
Un parámetro importante a definir al diseñar un experimento NOESY es el tiempo de mezcla (ver
Tabla 5.30). Este debe por una parte ser lo suficientemente largo para permitir la creación del
NOE, pero por otra su duración esta limitada por la relajación longitudinal que tiende a debilitar
todas las señales. Si se quieren determinar distancias intenucleares se debe trabajar en la zona
lineal inicial de desarrollo del NOE, evitándose además la aparición de picos de cruce falsos por
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