5.9 RMN Bidimensional

Resonancia Magnética Nuclear
Mezcla.- Consta de una secuencia retro-INEPT. Aquí las coherencias X en antifase con el protón
se reconvierten por transferencia de polarización en coherencias protónicas en antifase con X y al
final de la etapa quedan como coherencias protónicas en fase.
Detección.- Las coherencias protónicas evolucionan de acuerdo a sus desplazamientos químicos y
n
acoplamientos homonucleares P PJBHHB eliminándose el acoplamiento heteronuclear con X mediante
el desacoplador.
Tenemos entonces:
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Evolución durante tB1B: δ (P
PC*)
1
13 n
Detección durante tB2B: δ (P PH-unidos a P
PC*) + P PJBHHB
La diferencia fundamental con el HMQC radica en que en la dimensión FB1B están ausentes los
acoplamientos homonucleares, por lo que los anchos de línea en esta dimensión están
apreciablemente reducidos en el HSQC. Cuando se desea una buena resolución en FB1B por la
presencia de un gran número de señales, el experimento a escoger es el HSQC. Así, el espectro
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1 15
patrón para caracterizar una proteína marcada con P
PN es el P PH-P
PN-HSQC, que debe mostrar un
número de picos equivalentes al de residuos aminoacídicos en la estructura. En la Figura 5.133 se
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muestra el espectro P PH-P
PN-HSQC de una proteína.
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Figura 5.133 Espectro (sección) P PH-P
PN-HSQC 600 MHz de
la fracción soluble de un citocromo c (100 residuos AA)
Cada uno de los picos de cruce en el espectro anterior corresponde al grupo N-H de un residuo
aminoacídico. Obsérvese el gran número de señales que pueden distinguirse en esta parte del
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