Dra. Laura Pujols Tarrés Hospital Clínic i Provincial

More documents

Recommendations

Info

medi sol (S: 12%, G2/M: 21%, G0/G1: 61%). En concordança amb aquests resultats, l’MG262 (10 nM, 24 h) inhibeix completament la incorporació de timidina a l’ADN, tot provocant un aturada del cicle cel·lular en la fase G0/G1. L’aturada de la progressió del cicle cel·lular induït per MG262 es produeix per via acumulació de les proteïnes supressores del cicle cel·lular p21 i p27. Els efectes de la DEX sobre el cicle cel·lular són, en canvi, molt menys marcats. Així, la DEX (1.000 nM, 3 dies, n= 6) provoca una lleugera disminució de la fase G2/M (5%; p < 0,05), comparat amb les cèl·lules incubades amb medi de cultiu (7%), sense provocar canvis significatius en les fases G0/G1 i S del cicle cel·lular. Aquesta lleu disminució de la proliferació cel·lular induïda per DEX no va lligada a l’augment de p21 i p27. 2. Efecte de l’MG262 sobre l’expressió i la localització subcel·lular d’RGα. La incubació de fibroblasts nasals amb DEX (1.000 nM) durant 6, 12 i 24 hores produeix una disminució dependent de temps de l’expressió de l’ARNm i la proteïna de l’RGα. En els mateixos temps, l’MG262 (50 nM) provoca una disminució de l’expressió de l’ARNm de l’RGα, sense alterar significativament els nivells de la proteïna. La coincubació de DEX i MG262 impedeix la regulació a la baixa de l’RGα induïda per la DEX (figura 1). Figura 1. Imatge representativa de l’efecte de la coincubació d’MG262 i DEX (24 h) sobre l’expressió de l’RGα en fibroblasts 4
nasals. S’observa que la incubació amb DEX sola disminueix l’expressió proteica de l’RGα i que l’addició de l’MG262 impedeix la davallada de l’RGα induïda per la DEX. La imatge inferior mostra l’expressió de la proteïna constitutiva β-actina, tot mostrant igual càrrega proteica en tots els pous. La incubació de fibroblasts nasals amb DEX (100 nM) indueix un augment de la translocació de l’RGα al nucli cel·lular, essent màxim als 60 minuts i mantenint-se al nucli durant tot el període d’administració de DEX (180 minuts). La incubació amb MG262 sol (500 nM, 3-6 h) provoca un augment de l’RGα al nucli cel·lular. La coincubació amb DEX i MG262 sembla potenciar l’efecte de cadascun per separat. 3. Efecte de l’MG262 sobre l’activació de l’NF-κB i l’expressió de gens dependents d’NF-κB. La incubació de fibroblasts nasals amb MG262 impedeix la translocació al nucli induïda per TNFα o IL-1β de la subunitat p65 de l’NF-κB i provoca l’acumulació de la forma fosforilada de l’inhibidor de l’NF-κB, I-κBα. L’MG262 (500 nM, 4 h) inhibeix en un 50% la producció d’IL-6 tant en els fibroblasts d’individus controls com en els de pacients asmàtics (n= 6; p < 0,05 per a cada grup). En el mateix temps d’incubació i en els dos tipus cel·lulars, la DEX provoca una marcada inhibició dosidependent de la producció d’IL-6 (p < 0,01 per a cada grup). La inhibició de la producció d’IL-6 per part de la DEX (10 nM) fou sensiblement superior en els fibroblasts d’individus controls (35% de reducció; p < 0,05 comparat amb el medi) que en els fibroblasts de pacients asmàtics (27% de reducció; ns comparat amb el medi). La 5
Page 1 and 2: EFECTES DELS INHIBIDORS REVERSIBLES
Page 3: controls i de pacients asmàtics (s
Page 7 and 8: Figura 2. Efecte de l’MG262 (A) i
Page 9 and 10: Figura 3. Expressió de ti21Flt-1 e
Page 11 and 12: funció del fibroblast suggereix qu

Dra. Laura Pujols Tarrés Hospital Clínic i Provincial

Create successful ePaper yourself

Delete template?

Save as template?