apunts 15 - IES Guillem Cifre de Colonya

More documents

Recommendations

Info

Aquests reactius es mesclen en un tub d’assaig que s’introdueix en un aparell anomenat termociclador, que fa cicles de tres etapes: 4 1. Desnaturalització, en que s’eleva la temperatura a 90- 100º C per separar les cadenes del fragment d’ADN que es vol amplificar. 2. Hibridació (o alineament), a una temperatura d’uns 50º C, que permet la hibridació dels encebadors amb les seqüències complementàries en cada una de les cadenes d’ADN. 3. Elongació (o extensió) , a uns 70º C, de temperatura a la qual l’ADN polimerasa és activa i sintetitza les cadenes noves d’ADN. Aplicacions de la PCR - Seqüenciació: Generació de suficient ADN. - Estudis d’expressió: Es pot utilitzar per a estudi d’ARNm. Serveix per conèixer quan s’expressen gens tumorals o vírics i, en conseqüència, si es efectiva, o no, una teràpia - Biologia evolutiva: Degut a que pot ampliar molt petites quantitats d’ADN permet analitzar teixits d’espècies extingides (mamut, humans primitius...) i construir arbres filogenètics. L’ADN mitocondrial ha estat emprats per a molt estudis evolutius - Mapes de cromosomes. Ha permès poder realitzar el mapa del genoma humà. - Diagnòstic: És el de major impacte. Tècnica ideal per a diagnòstic prenatal i d’enfermetats hereditàries (amniocentesi etc) - Medicina forense i proves de paternitat: Ha permès determinar la identitat d’una persona desconeguda a partir d’un cabell, gota e sang, etc. Inserció de gens. Ús de vectors Per a la inserció de gens cal la utilització de vectors, entre els quals els més utilitzats són: El plasmidi bacterià Un plamidi és un petit ADN circular de doble hèlix del qual hi pot haver uns quants exemplars (de 20 à 50) en un mateix bacteri. Són com minicromosomes que es dupliquen autònomament. Si gràcies a la lisi dels bacteris queden lliures al medi, poden penetrar dins d'altres bacteris, procés anomenat transformació, especialment si les membranes es fan permeables a l'ADN per l'addició de clorur càlcic. Els bacteris receptors adquireixen així les propietats dels gens que hi ha al plasmidi. Per saber quins bacteris han sofert aquesta transformació, s'afegeixen, a més d ' aquest ADN, gens que codifiquen proteïnes degradadores d'antibiòtics als plasmidis que s ' utilitzen com a vectors d ' un ADN passatger. Aquesta circumstància després permet seleccionar els bacteris que han integrat el plasmidi, ja que són les úniques que sobreviuen en un medi amb antibiòtics. IES Guillem Cifre de Colonya. BIOLOGIA BATXILLERAT 2. Professor: Tomeu Vilanova
Els virus Els virus també s'utilitzen coma vectors. Quan un virus infecta un bacteri i s'inicia el cicle lític, destrueix l'ADN cel . lular, es replica l ' ADN víric i se sintetitzen les proteïnes de la càpsida. Posteriorment, els ADN vírics s'encapsulen i es formen nous virus. De vegades, per error, s' encapsulen segments de l'ADN bacterià. Aquests virus defectius poden infectar un segon bacteri, i introduir un segment de l’ADN del bacteri hoste anterior, procés que s’anomena transducció. El cosmidis Els cosmidis són un tipus de plasmidis que contenen els extrems complementaris del genoma del fag λ els anomenats extrems COS. Això els permet introduir-se en la càpside del fag i així passar a l’interior dels bacteris. Inserció de gens Com ja s’ha esmentat per a possibilitar la inserció de l'ADN passatger a l'ADN vector, és convenient tallar-los tots dos amb el mateix enzim de restricció. Aquests tallen en un punt determinat, situat en unes seqüències (anomenades palindròmiques) que són iguals en els dos filaments i que presenten simetria segons la complementarietat de les bases. D’aquesta manera els segments cohesius faciliten la formació d'ADN recombinants. Com que en els procariotes no hi ha procés de maduració de l' ARNm, si es vol intercalar un gen eucariòtic en un bacteri, no es pot introduir un segment d ' ADN amb introns i exons, sinó que s’ha d ' utilitzar un enzim d'origen víric, anomenat transcriptasa inversa o retrotranscriptasa, per produir ADN a partir d ' un filament d' ARNm madur (molècula en la qual ja no hi ha introns). Posteriorment s'ha de duplicar perquè es formi ADN de doble hèlix anomenat ADN complementari (ADNc), i finalment introduir-lo en un vector (un virus o un plasmidi) perquè el transporti a l' interior del bacteri. IES Guillem Cifre de Colonya. BIOLOGIA BATXILLERAT 2. Professor: Tomeu Vilanova 5
Page 1 and 2: 15 ENGINYERIA GENÉTICA I BIOTECNOL
Page 3: Localització de seqüències d’A
Page 7 and 8: 2 BIOTECNOLOGiA. CONCEPTE El terme
Page 9 and 10: Altres substàncies fabricades post
Page 11 and 12: - Una altra tècnica és la electro
Page 13 and 14: 4.2 LA BIOTECNOLOGÍA EN ANIMALS Ig
Page 15 and 16: 5 LA BIOTECNOLOGIA EN MEDICINA 5.1
Page 17 and 18: 5.3 APLICACIONS TERAPÈUTIQUES Vacu
Page 19 and 20: Les cèl.lules mare Una cèl·lula
Page 21 and 22: Biotecnologia en la ciència forens
Page 23: ACTIVITATS. ACTIVITATS. Tema Tema 1

apunts 15 - IES Guillem Cifre de Colonya

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

Delete template?

Save as template?