TESIS FICOTOXINAS MARINAS EVA FONFRIA

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18.04.2013 Views

3. PUBLICACIONES 31 Publicaciones En este apartado de la memoria se describe la parte experimental y se presentan y discuten de forma específica los resultados obtenidos en esta tesis doctoral. Constituyen la sección un total de cuatro publicaciones, divididas en dos bloques en función de la técnica utilizada. Bloque A. Estudios realizados con biosensores basados en el fenómeno óptico de la resonancia del plasmón superficial. Los biosensores basados en SPR permiten la detección y monitorización de uniones moleculares en tiempo real sin necesidad de marcaje. En esta tesis se utilizaron para detectar y cuantificar toxinas PSP y YTX: Artículo 1. Paralytic Shellfish Poisoning detection by surface plasmon resonance-based biosensors in shellfish matrixes. E. S. Fonfría, N. Vilariño, K. Campbell, C. Elliott, S. A. Hauguey, B. Ben-Gigirey, J. M. Vieites, K. Kawatsu, L. M. Botana. Artículo publicado en Analytical chemistry 79 (2007): 6303-6311. La intoxicación paralizante por consumo de molusco es una de las más extendidas y peligrosas del mundo [1]. En este artículo se presenta un nuevo método de detección y cuantificación de estas ficotoxinas (en el rango 150-4000 ng/kg de molusco) mediante un ensayo de inhibición, donde las toxinas en solución procedentes de una muestra de molusco contaminado compiten con STX inmovilizada en un chip CM5 por la unión a un anticuerpo monoclonal anti-GTX2/3. El método de extracción más apropiado, en términos de interferencia de matriz y recuperación de toxina, fue determinado mediante el estudio de cinco protocolos de extracción en cinco especies de molusco. La mejor extracción se utilizó en el análisis de 14 muestras naturales, comparando los resultados obtenidos en el biosensor con los dos métodos oficiales de detección de toxinas PSP: bioensayo en ratón y HPLC. Los resultados del biosensor mostraron una sobreestimación de toxina respecto a los otros métodos, pero la correlación de las muestras negativas fue óptima, avalando su uso como método de criba.

3. PUBLICACIONES<br />

31<br />

Publicaciones<br />

En este apartado de la memoria se describe la parte experimental y se presentan y<br />

discuten de forma específica los resultados obtenidos en esta tesis doctoral.<br />

Constituyen la sección un total de cuatro publicaciones, divididas en dos bloques en<br />

función de la técnica utilizada.<br />

Bloque A. Estudios realizados con biosensores basados en el fenómeno óptico de la<br />

resonancia del plasmón superficial.<br />

Los biosensores basados en SPR permiten la detección y monitorización de uniones<br />

moleculares en tiempo real sin necesidad de marcaje. En esta tesis se utilizaron para<br />

detectar y cuantificar toxinas PSP y YTX:<br />

Artículo 1. Paralytic Shellfish Poisoning detection by surface plasmon<br />

resonance-based biosensors in shellfish matrixes. E. S. Fonfría, N. Vilariño, K.<br />

Campbell, C. Elliott, S. A. Hauguey, B. Ben-Gigirey, J. M. Vieites, K. Kawatsu, L.<br />

M. Botana. Artículo publicado en Analytical chemistry 79 (2007): 6303-6311. La<br />

intoxicación paralizante por consumo de molusco es una de las más extendidas y<br />

peligrosas del mundo [1]. En este artículo se presenta un nuevo método de detección<br />

y cuantificación de estas ficotoxinas (en el rango 150-4000 ng/kg de molusco)<br />

mediante un ensayo de inhibición, donde las toxinas en solución procedentes de una<br />

muestra de molusco contaminado compiten con STX inmovilizada en un chip CM5<br />

por la unión a un anticuerpo monoclonal anti-GTX2/3. El método de extracción más<br />

apropiado, en términos de interferencia de matriz y recuperación de toxina, fue<br />

determinado mediante el estudio de cinco protocolos de extracción en cinco especies<br />

de molusco. La mejor extracción se utilizó en el análisis de 14 muestras naturales,<br />

comparando los resultados obtenidos en el biosensor con los dos métodos oficiales<br />

de detección de toxinas PSP: bioensayo en ratón y HPLC. Los resultados del<br />

biosensor mostraron una sobreestimación de toxina respecto a los otros métodos,<br />

pero la correlación de las muestras negativas fue óptima, avalando su uso como<br />

método de criba.

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