TESIS FICOTOXINAS MARINAS EVA FONFRIA

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Introducción
Figura 15. Detección de la variación del
índice de refracción mediante SPR. A) El
fenómeno de SPR se observa como una caída
en la intensidad reflejada para un cierto
ángulo de incidencia, que depende del índice
de refracción de la cara no-iluminada. B) Al
producirse la unión analito-ligando, la masa
en superficie varía cambiando el índice de
refracción, que a su vez cambia el ángulo
donde se produce SPR. C) Sensograma:
Representación del cambio de ángulo (en
RU) frente al tiempo, que permite seguir el
progreso de la interacción en la superficie a
tiempo real
Una vez se ha preparado el chip sensor con el ligando inmovilizado en la superficie,
el sensograma típico que se obtiene en un biosensor basado en SPR durante un ciclo
de análisis consta de cuatro etapas: línea basal, asociación, disociación y
regeneración (figura 16). El ciclo empieza mediante la inyección de tampón en flujo
continuo para establecer la línea basal que servirá de punto de referencia. En la etapa
de asociación, el tampón es reemplazado por la muestra. Si se produce la interacción
analito-ligando, el sensograma mostrará un perfil de subida, típico de la unión entre
dos moléculas. En la etapa siguiente, de disociación, se vuelve a inyectar tampón en
un flujo constante. Si la interacción tiene una alta afinidad el valor de unión
(respuesta) se mantendrá, mientras que si KD es alta, el sensograma mostrará una