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TESIS FICOTOXINAS MARINAS EVA FONFRIA

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23<br />

Introducción<br />

En condiciones de reflexión interna total, si la interfase entre los medios se encuentra<br />

recubierta por una fina lámina de metal, y la luz incidente es monocromática y p-<br />

polarizada (el componente del vector eléctrico es paralelo al plano de incidencia), la<br />

onda evanescente se propagará a través del metal excitando los electrones libres de la<br />

superficie y convirtiéndolos en “plasmones” (oscilaciones colectivas de electrones)<br />

de superficie. Esto provoca un descenso muy grande en la reflectividad del metal ya<br />

que la energía de la luz incidente es “absorbida” por los electrones. Este fenómeno es<br />

conocido como la resonancia de plasmón superficial y tiene lugar para un<br />

determinado ángulo de luz incidente (ángulo SPR o ángulo de resonancia) [172-174].<br />

El ángulo de resonancia está determinado por varios factores: la longitud de onda de<br />

la luz incidente, las características del metal y el índice de refracción de los medios<br />

de ambas caras de éste. En los biosensores comerciales, la longitud de onda, el metal<br />

y el índice de refracción del medio donde incide la luz, se mantienen constantes, por<br />

lo que el determinante principal es el índice de refracción del medio por donde se<br />

propaga la onda evanescente (la cara no iluminada). Este índice depende de la masa<br />

de las moléculas unidas a la superficie metálica, por lo que si el analito transportado<br />

por la fase móvil a lo largo de una celda de flujo se une al ligando inmovilizado en la<br />

superficie, la masa variará cambiando el índice de refracción local y en consonancia,<br />

el ángulo de resonancia. Este cambio de ángulo se puede monitorizar en tiempo real<br />

a través de la medición de la intensidad de luz reflejada (figura 15 a-b).<br />

Las variaciones del ángulo de resonancia se expresan en unidades arbitrarias RU<br />

(unidades de resonancia), donde 1 RU corresponde a un cambio en el ángulo de<br />

0.0001º [175]. Representando RUs en función del tiempo, se obtiene un sensograma<br />

que nos ilustra el progreso de la interacción en tiempo real (figura 15 c).

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