TESIS FICOTOXINAS MARINAS EVA FONFRIA

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Introducción
dos espines de ambos estados son iguales). Se denomina fluorescencia a la emisión
de un fotón producida por el retorno de un electrón desde un estado singulete a su
estado basal (siendo la fosforescencia el retorno desde un estado triplete). Al tener
los espines opuestos, la transición del electrón entre los dos estados se produce
rápidamente, por lo que la media del tiempo transcurrido entre la excitación y la
emisión (tiempo de vida) en fluorescencia es del orden de nanosegundos [157]. El
fotón emitido presenta una longitud de onda mayor que el fotón absorbido, puesto
que su energía es menor al perder parte en el proceso.
La teoría de la polarización de fluorescencia (FP) fue descrita por primera vez por
Jean Perrin en 1926 [158] y desarrollada por Gregorio Weber y colaboradores en
1950 [159]. El principio físico de esta teoría se basa en la observación de pequeñas
moléculas fluorescentes en solución. Si se excitan estas moléculas con luz plana
polarizada (el vector eléctrico vibra sólo en un plano) emitirán luz polarizada
siempre que permanezcan estacionarias (sin moverse) durante su tiempo de vida
fluorescente. Por el contrario, si durante ese período las moléculas rotan o voltean, la
luz emitida será despolarizada (emitirán en planos distintos al de excitación). La
polarización de la luz que emite una molécula fluorescente en estas condiciones es
proporcional a su tiempo de relajación rotacional (tiempo que tarda en girar un
ángulo de 68.5º), que a su vez, está relacionado con la viscosidad (η), la temperatura
(T), el volumen molecular (v) y la constante de los gases (R), según la ecuación de
Stokes [160]:
3·v·η
Tiempo de relajación rotacional =
R·T
Si la viscosidad y la temperatura se mantienen constantes, la polarización está
directamente relacionada con el volumen molecular (es decir, el tamaño molecular).
Si la molécula es muy grande, sus movimientos son muy lentos con lo cuál, la luz
emitida permanece mayoritariamente polarizada. Sin embargo, para moléculas
pequeñas, donde la velocidad de rotación es más rápida, la luz emitida será en gran
parte despolarizada. De este manera, si se produce unión entre una molécula
fluorescente pequeña con otra molécula de mayor tamaño, podremos observar un
cambio en los valores de polarización y seguir su interacción de forma eficiente
(figura 11).